1.15933.0005 1.15933.0025 Preparación del reactivo Tinción nuclear Solución de Carmín Para preparar aprox. 100 ml de solución se añaden juntos: Carmín (C.I. 75470) Certistain® Microscopía solución acuosa y saturada de carbonato lítico (aprox. 1,25 %) Carmín (C.I. 75470) 3,6 g 100 ml hervir durante 15 minutos dejar enfriar (laca de calcio y aluminio del ácido carmínico) Timol para microscopía Certistain® 1g añadir, disolver y filtrar Producto sanitario para diagnóstico in vitro para tinción nuclear y detección de glucógeno en cortes histológicos El presente colorante “Carmín (C.I. 75470) (laca de calcio y aluminio del ácido carmínico) - para microscopía Certistain®” es utilizado para el diagnóstico celular en la medicina humana y se empleo en el examen histológico de muestras de origen humano. Se trata de un colorante seco que se utiliza para la preparación de una solución de colorante, junto con otros materiales de diagnóstico in vitro pertenecientes a nuestra cartera, hace evaluables determinadas para el diagnóstico estructuras de destino (mediante fijación, dado el caso inclusión, tinción con la solución carmín arriba indicada, contratinción, montaje) en material de examen histológico. Principio es laca de calcio y aluminio del ácido carmínico El carmín es un colorante natural (colorante de cochinilla), de estructura todavía no del todo aclarada, que se obtiene de cochinillas (Dactylopius coccus cacti) por extracción. El carmín se usa para tinción como laca de color con ayuda de una solución mordiente de litio, aluminio o boro. El carmín se usa en diversas tinciones, p. ej. para detección de glucógeno y sustancias mucoides (carmín de Best), para tinción nuclear tras impregnación con plata o para tinción vital. Material de las muestras Como material de partida se usan cortes de tejido fijados con formalina, e incluidos en parafina (cortes parafínicos de 3 - 5 µm de espesor). Reactivos Art. 115933 Carmín (C.I. 75470) (laca de calcio y aluminio del ácido carmínico) para microscopía Certistain® Carmín (C.I. 75470) Certistain® 2g Potasio cloruro 5g Agua destilada 60 ml disolver con el calor Potasio carbonato 1g añadir y llevar a ebullición cuidadosamente (¡espumación intensa!) Hervir durante unos minutos, viraje de color a rojo oscuro dejar enfriar Amoníaco en solución 25% 20 ml añadir y mezclar Cerrar bien y conservar en lugar fresco. La solución es estable durante 2 meses. Solución de tabajo de carmín de Best Para preparar aprox. 80 ml de solución se añaden juntos: Solución primaria de carmín filtrata 20 ml Amoníaco en solución 25% 30 ml Metanol 30 ml mezclar 5 g, 25 g Solución de diferenciación Para preparar aprox. 220 ml de solución se añaden juntos: Necesario además: para la tinción nuclear Art. 100327 Ácido clorhídrico-alcohol para microscopía Art. 105680 Litio carbonato p.a. EMSURE® ACS,ISO,Reag. Ph Eur 1 l, 5 l Art. T0501 Sigma Thymol >99.0% Detección de glucógeno con solución de carmín de Best Solución primaria de carmín de Best Para preparar aprox. 80 ml de solución se añaden juntos: 250 g Metanol 40 ml Etanol 80 ml mezclar Agua destilada para la detección de glucógeno Art. 100974 Etanol desnaturalizado con aprox. 1 l, 2,5 l 1 % de metiletilcetona para análisis EMSURE® Art. 104928 Potasio carbonato 500 g, 1 kg p.a. EMSURE® ACS,ISO,Reag. Ph Eur Art. 104936 Potasio cloruro 250 g, 500 g, p.a. EMSURE® 1 kg Art. 105432 Amoníaco en solución 25% 1 l, 2,5 l, 5 l p.a. EMSURE® Art. 106009 Metanol 1 l, 2,5 l, 5 l para análisis EMSURE® ACS,ISO,Reag. Ph Eur Art. 109249 Hemalumbre en solución según Mayer 500 ml, 1 l, 2,5 l para la microscopía Preparación de las muestras La toma de muestra debe ser realizada por personal especializado. Todas las muestras deben tratarse de acuerdo con el estado de la tecnología. Todas las muestras deben estar rotuladas inequívocamente. Deben usarse instrumentos adecuados para la toma de muestras y en la preparación, y deben seguirse las instrucciones del fabricante para la aplicación / el empleo. Desparafinar de forma típica los cortes y rehidratar. 100 ml añadir Las soluciones de coloranterecién preparadas deben filtrarse antes de su uso. Técnica de tinción nuclear Desparafinar de forma habitual los preparados histológicos y rehidratar en serie descendente de alcohol. Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo después de los diferentes pasos de tinción, de esta manera se podrá evitar el innecesario arrastre de soluciones. Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los períodos indicados. Notas técnicas Portaobjetos con corte parafínico Agua destilada 1 minuto Solución de carmín 3 minutos Ácido clorhídrico-alcohol (inmediatamente) 1 minuto Ácido clorhídrico-alcohol 1 minuto El microscopio usado debería corresponder a los requisitos de un laboratorio de diagnóstico médico. Si se utilizan procesadores de histología y aparatos automáticos de tinción, deberán tenerse en cuenta las instrucciones de operación del fabricante, tanto del aparato como del software. Hay que procurar que se evapore la cantidad menor posible de amoníaco a partir de la solución primaria y de la solución de trabajo de carmín de Best. Las soluciones de coloranterecién preparadas deben filtrarse antes de su uso. Eliminar el aceite de inmersión en exceso antes de archivar. Ácido clorhídrico-alcohol 1 minuto Agua destilada enjuagar Etanol 96 % 1 minuto Diagnóstico Etanol 96 % 1 minuto Etanol 100 % 1 minuto Los diagnósticos deberán ser establecidos solamente por personas autorizadas y cualificadas. Deberán emplearse terminologías vigentes. Deberán elegirse y realizarse ensayos ulteriores según métodos reconocidos. Cada aplicación debería implicar controles adecuados para descartar resultados erróneos. Etanol 100 % 1 minuto ® Xileno o Neo-Clear 1 minuto Xileno o Neo-Clear® 1 minuto Montar con Neo-Mount® los preparados humedecidos con Neo-Clear®, o los preparados humedecidos con xileno con p. ej. Entellan® Nuevo y cubreobjetos. Los preparados histológicos pueden ser montados y almacenados con medios de montaje anhidros (p. ej. Entellan® Nuevo o Neo-Mount®) y cubre-objetos después de la deshidratación (series de alcohol ascendentes) y la clarificación con xileno o Neo-Clear®. Para el análisis de preparados teñidos con un aumento microscópico >40x se recomienda el uso de aceite de inmersión. Resultado Núcleos celulares Tejido rojo rosa claro, incoloro Desparafinar de forma habitual los preparados histológicos y rehidratar en serie descendente de alcohol. Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo después de los diferentes pasos de tinción, de esta manera se podrá evitar el innecesario arrastre de soluciones. Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los períodos indicados. 1 minuto 3 - 5 minutos Agua del grifo 3 - 5 minutos Solución de tabajo de carmín de Best 5 - 20 minutos Solución de diferenciación (cambiar 1x) Estabilidad Carmín (C.I. 75470) (laca de calcio y aluminio del ácido carmínico) - para microscopía Certistain® se puede utilizar hasta la fecha de caducidad indicada. Después de abrir el frasco por primera vez, el contenido almacenado entre +5 °C y +30 °C es utilizable hasta la fecha de caducidad indicada. Los frascos deben mantenerse siempre bien cerrados. Cerrar bien y conservar en lugar fresco la solución primaria de carmín. La solución es estable durante 2 meses. Solamente para uso profesional. Para evitar errores, la aplicación debería ser realizada por personal especializado. Deben cumplirse las directivas nacionales sobre seguridad en el trabajo y aseguramiento de la calidad. Deben emplearse microscopios equipados de acuerdo con el estándar. Protección contra infecciones Debe observarse a toda costa una protección eficaz contra infecciones de acuerdo con las directivas de laboratorio. Indicaciones para la eliminación de residuos Portaobjetos con corte parafínico Hemalumbre en solución según Mayer Guardar Carmín (C.I. 75470) (laca de calcio y aluminio del ácido carmínico) para microscopía Certistain® de +5 °C a +30 °C. Notas sobre el empleo Técnica de Detección de glucógeno con solución de carmín de Best Agua destilada Almacenamiento enjuagar hasta que ya no se desprendan nubes de color El envase debe ser eliminado de acuerdo con las directivas válidas de eliminación de residuos. Las soluciones usadas y las soluciones caducadas deben eliminarse como desecho peligroso, debiéndose cumplir las directivas locales de eliminación de residuos. Podrá pedirse información sobre los procedimientos de eliminación bajo el Quick Link “Hints for Disposal of Microscopy Products” en www.microscopy-products.com. Dentro de la UE tiene validez el REGLAMENTO (CE) Nº 1272/2008 sobre la clasificación, el etiquetado y el envasado de sustancias y mezclas, por el que se modifican y derogan las Directivas 67/548/CEE y 1999/45/CE y se modifica el Reglamento (CE) Nº 1907/2006. Etanol 80 % enjuagar Reactivos auxiliares Etanol 96 % 1 minuto Etanol 96 % 1 minuto Etanol 100 % 1 minuto Art. 100327 Ácido clorhídrico-alcohol para microscopía Art. 100974 Etanol desnaturalizado con aprox. 1 % de metiletilcetona para análisis EMSURE® Art. 104699 Aceite de inmersión para microscopía Art. 104928 Potasio carbonato p.a. EMSURE® ACS,ISO,Reag. Ph Eur Art. 104936 Potasio cloruro p.a. EMSURE® Art. 105432 Amoníaco en solución 25% p.a. EMSURE® Art. 105680 Litio carbonato p.a. EMSURE® ACS,ISO,Reag. Ph Eur Art. 106009 Metanol para análisis EMSURE® ACS,ISO,Reag. Ph Eur Art. 107961 Entellan® Nuevo medio de montaje rápido para microscopía Art. 108298 Xileno (mezcla de isómeros) para histología Etanol 100 % 1 minuto Xileno o Neo-Clear 1 minuto ® Xileno o Neo-Clear® 1 minuto Montar con Neo-Mount los preparados humedecidos con Neo-Clear®, o los preparados humedecidos con xileno con p. ej. Entellan® Nuevo y cubreobjetos. ® Los preparados histológicos pueden ser montados y almacenados con medios de montaje anhidros (p. ej. Entellan® Nuevo o Neo-Mount®) y cubre-objetos después de la deshidratación (series de alcohol ascendentes) y la clarificación con xileno o Neo-Clear®. Para el análisis de preparados teñidos con un aumento microscópico >40x se recomienda el uso de aceite de inmersión. Resultado Glucógenorojo Mucosidad, fibrina, amiloiderosa a rojo 1 l, 5 l 1 l, 2,5 l frasco gotero de 100 ml, 100 ml, 500 ml 500 g, 1 kg 250 g, 500 g, 1 kg 1 l, 2,5 l, 5 l 250 g 1 l, 2,5 l, 5 l 100 ml, 500 ml, 1l 4l Art. 109016 Art. 109249 Art. 109843 Neo-Mount® medio de montaje anhidro para microscopía Hemalumbre en solución según Mayer para la microscopía Neo-Clear® (sustituto de xileno) para microscopía frasco gotero de 100 ml, 500 ml Art. Thymol >99.0% Sigma T0501 500 ml, 1 l, 2,5 l 5l Clasificación de substancias peligrosas Art. 115933 Tener en cuenta la clasificación de substancias peligrosas en la etiqueta y las indicaciones en la ficha de datos de seguridad. La ficha de seguridad está disponible en el sitio web y a solicitud. Componentes principales del producto Art. 115933 C.I. 75470 C44H37O27AlCa x 3 H2O M = 1118,78 g/mol Otros productos de IVD Art. 100121 Rojo nuclear en solución de aluminio sulfato al 0,1% para microscopía Art. 100496 Formaldehído en solución 4%, tamponado, pH 6,9 (aprox. 10% de formalina en solución) para histología Art. 105175 Hematoxilina en solución modificada según Gill II para microscopía Art. 109844 Eosina A al 0,5% en solución acuosa para microscopía Art. 115976 Kit de hematoxilina férrica según Weigert para tinción nuclear in histología 500 ml 350 ml y 700 ml (en frasco de cuello ancho), 5 l, 10 l, 10 l Titripac® 500 ml, 2,5 l 1 l, 2,5 l 2x 500 ml Literatura 1. Romeis - Mikroskopische Technik, Editors: Mulisch, Maria, Welsch, Ulrich, 2015, Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2. Theory and Practice of Histological Techniques, John D Bancroft and Marilyn Gamble, 6th Edition 3. Conn’s Biological Stains: A Handbook of Dyes, Stains and Fluorochromes for Use in Biology and Medicine, 10th Edition, (ed. Horobin, R.W. and Kiernan, J.A). Bios, 2002 Consult instructions for use Manufacturer Caution, consult accompanying documents Catalog number Use by YYYY-MM-DD Status: 2017-11-17 Merck KGaA, 64271 Darmstadt, Germany Tel. +49(0)6151 72-2440 www.microscopy-products.com EMD Millipore Corporation, 290 Concord Road, Billerica, MA 01821, USA, Tel. +1-978-715-4321 Batch code Temperature limitation
