Resumen: En el año 2023 (año en curso) se realizó una investigación experimental en los Laboratorios Avanzados de Ciencias Experimentales (LACE) de la Escuela Nacional Preparatoria (ENP), con el objetivo de comprender más a fondo las consecuencias que tiene el vape en jóvenes. Se reunieron 3 grupos, uno denominado control, un grupo de consumo frecuente el cual se sometió a consumir diariamente el vape; y un grupo de consumo intermitente que solamente vapeo cada dos días. Para poder observar los cambios citomorfológicos se realizaron pruebas de esputo con tinción de Papanicolaou, y se observaron los resultados. Los resultados arrojaron la presencia de metaplasia, inflamación (células polimorfonucleares), irritación y bacterias. Introducción: En los últimos años, el uso de vapes o cigarrillos electrónicos ha aumentado significativamente en todo el mundo, incluyendo México. Aunque inicialmente estos se promocionaron como una alternativa más saludable al tabaco tradicional, su popularidad entre los jóvenes ha planteado nuevas preocupaciones de salud pública, ya que las múltiples advertencias sobre su consumo han sido minimizadas y desatendidas, a pesar de haberse emitido alertas por sociedades respiratorias mundiales. Por el contrario, las ventas de los dispositivos han sido exponenciales, a pesar de ser ilegales en varios países, tal cual es el caso de México (desde marzo de 2020), llegando incluso a existir sitios específicos para realizar esta actividad. Los riesgos a la salud pública emanan primordialmente del esperado incremento en adictos a la nicotina, que pasan a fumar cigarrillos normales y/o cigarrillos electrónicos; sin embargo, también están aquellos generados por los efectos irritantes en el pulmón, aunados a los debidos al mal funcionamiento de las baterías y al calentamiento del dispositivo. (Thirión-Romero. I., et al. 2019) 1 Marco Teórico: Los cigarrillos electrónicos son conocidos por muchos nombres diferentes, incluyendo e-cigs, sistemas electrónicos diseñados para suministrar nicotina (ENDS), sistemas alternativos para suministrar nicotina (ANDS), e-hookahs, mods, vape, etc. Los cigarrillos electrónicos (CE) fueron inventados en China, entraron al mercado en 2003 y su empleo se ha ido extendiendo rápidamente por todo el mundo con o sin autorización oficial. (Monraz, S. et. al., 2015). Estos dispositivos incluyen una batería para la activación de este, una fuente de calor que calienta un líquido para convertirlo en un aerosol de partículas diminutas, un cartucho o depósito que contiene el líquido, y una boquilla para inhalar el aerosol. (American Cancer Society, 2022) El aerosol de los cigarrillos electrónicos es una fuente de alta exposición del sistema respiratorio humano a partículas finas (100-160 nm); su tamaño y concentración son similares a los del humo del tabaco. Muchos cigarrillos electrónicos contienen nicotina, la cual se origina del tabaco. Por ello, la FDA los clasifica como “productos de tabaco”. La nicotina, además de ser altamente adictiva, puede ser letal en medida 0.5-1 mg/kg de peso en adultos y 0.10.2 mg/kg de peso en niños, ingerir o incluso tener contacto con la piel de forma accidental con el contenido de líquido de un cigarrillo electrónico es altamente peligroso. (Monraz, S. et. al., 2015) (American Cancer Society, 2022) Otros componentes incluyen conservadores como propilenglicol; que le encontramos efectos irritantes en las mucosas y el árbol respiratorio, glicerol, etilenglicol y cantidades medibles reportadas de estaño, plomo, níquel, cromo, nitrosaminas, compuestos carbamilo, metales, compuestos orgánicos volátiles, y compuestos fenólicos. Se incluyen saborizantes que generan irritantes y/o carcinógenos como el formaldehído, acetaldehído, óxido de propileno y la acroleína (toxina) del glicerol, entre otros. Sin embargo, estos compuestos se encuentran en cantidades menores en comparación con el cigarrillo convencional. El líquido contiene, en general, un solvente, que puede ser glicerina vegetal; relacionada con casos de neumonía lipoidea, propilenglicol (ya antes mencionado) o una mezcla de ellos, y uno o más saborizantes. (Monraz, S. et al., 2015) (Córdoba, R., 2014) (Alvear, G., 2017). 2 A nivel sistemático podemos encontrar daños como: Tabla 1. Efectos asociados a la utilización de SEAN Aparato respiratorio •Irritación de mucosas • Aumento de las secreciones respiratorias • Hipoxemia • Insuficiencia respiratoria aguda • Neumonía lipoidea • Hemorragia alveolar difusa • Neumonitis por hipersensibilidad • Fibrosis pulmonar Aparato cardiovascular • Infiltración de células inflamatorias en los vasos sanguíneos • Aumento de la oxidación de lipoproteínas de baja densidad (LDL) • Aumento de la frecuencia cardiaca basal • Incremento de la agregación plaquetaria y formación de coágulos Autoría Propia EVALI, del acrónimo en inglés (E-cigarette or vaping associated lung injury), es una enfermedad con una lesión pulmonar grave y síntomas constitucionales y gastrointestinales. En el 2012 se reportó el primer caso donde mediante lavado broncoalveolar se hallaron numerosos macrófagos cargados de grasa, por lo que se hizo el diagnóstico de neumonía lipoidea. En el 2020 se reportó un número inusual de personas internadas por enfermedad respiratoria que tenían todas como antecedente común usar CE, reportados por la CDC. (Accinelli, R. 2020). El EVALI puede ocasionar los siguientes síntomas: ● Dificultad para respirar ● Tos ● Diarrea, náuseas, vómitos y dolor abdominal ● Dolor torácico ● Latidos cardíacos rápidos ● Fiebre y escalofríos ● Respiración rápida y superficial 3 Varios estudios han demostrado que el acetato de Vitamina E tiene relación con el riesgo de contraer EVALI. Esta es una sustancia sintética que se encuentra en algunos productos de vapes, mayoritariamente en productos de cigarros electrónicos que tienen presencia de THC. Cuando se inhala esta sustancia química, daña a los pulmones. Un estudio realizado en el año 2020 detectó acetato de vitamina E en el líquido pulmonar de 48 de los 51 pacientes con EVALI de los que se tomaron muestras. En cambio, las muestras de líquido pulmonar tomadas a personas sanas no contenían esta vitamina (BC Blount, MP Karwowski, JL Pirkle. 2020). En febrero de 2020, el gobierno mexicano anunció una prohibición temporal de la importación de dispositivos de vaporización (vapes) y líquidos para vapeo. La medida se tomó en respuesta a la creciente preocupación por el aumento de casos de enfermedades pulmonares relacionadas con el vapeo en Estados Unidos. Posteriormente, en marzo de 2020, el gobierno mexicano emitió una regulación que prohibía definitivamente la comercialización, importación y exportación de dispositivos electrónicos para fumar (incluyendo los vapes) que contengan nicotina. Sin embargo, los dispositivos que no contienen nicotina no están prohibidos. Esta prohibición se aplica tanto a la venta en línea como a la venta en tiendas físicas, y las autoridades han llevado a cabo operativos para confiscar estos productos ahora ilegales en todo el país. Es importante señalar que la regulación también establece sanciones para aquellos que violen la prohibición, incluyendo multas y la posibilidad de enfrentar cargos penales. 4 Problemática: Entre los adolescentes existe la moda de utilizar los cigarrillos electrónicos, ya que se presentan como una alternativa más saludable o menos dañina. La OMS reconoció a través de diversos estudios que un fumador que se pasa al vapeo reduce los daños ocasionados en su salud con respecto al tabaco convencional. Pero esta alternativa suena demasiado buena para ser verdad y existen en internet variados estudios que niegan su completa seguridad dotando al líquido del vape con sustancias dañinas, por lo tanto, debemos preguntarnos ¿es realmente inocuo? Y en caso de que no, ¿Cuáles son los posibles daños provocados por su consumo? Por medio de la presente investigación, profundizaremos más en la búsqueda de los daños a nivel citológico en jóvenes generados por las sustancias encontradas en los vapes, de forma tal que esta información sea difundida y cree concientización en este sector de la población. Objetivos: General: Describir cambios producidos por el consumo de cigarrillos electrónicos (CE), en jóvenes. Particulares: ● Realizar encuestas pre y post consumo para determinar posibles alteraciones sintomatológicas ● Realizar pruebas citológicas de expectoración con tinción papanicolaou a jóvenes de 18 a 19 años. ● Observar y describir cambios citológicos 5 Hipótesis En las muestras proporcionadas por los sujetos experimentales, se espera observar daño celular en tejido pulmonar y malestar general. Metodología: 1. Se llevó a cabo una encuesta a personas interesadas en participar en el proyecto para conocer sus condiciones iniciales (Anexo 3. Pág.22) (situación de salud y consumo de cigarrillos electrónicos u otras sustancias). Posteriormente, se clasificaron en 2 grupos: el grupo control (sin contacto alguno con vape) y el grupo experimental mismo que a su vez se dividió en consumo frecuente y esporádico. 2. Se realizó una citología de expectoración (anexo 1. Pág. 20) a todos los participantes antes de comenzar con la experimentación, con el fin de tener una valoración inicial y registrar con mayor facilidad los cambios que fueran surgiendo. 3. Las muestras fueron teñidas con la tinción de Papanicolaou (anexo 2 pág.20) para su posterior observación al microscopio. 4. Al grupo control se le dio la instrucción de evitar el vape mientras se efectuaba el experimento. 5. Al grupo experimental se le reunía para las sesiones de consumo supervisadas y se le limitó el acceso al vape fuera de estas durante los 10 días de consumo. 6. El grupo de consumo frecuente tuvo sesiones diarias, mientras que el grupo esporádico su consumo fue cada tercer día. 7. Se tomaron citologías de expectoración de todos los integrantes de los grupos cada 3 días y se tiñeron para su observación y comparación. 8. Por último, se observaron al microscopio todas las muestras. 6 Resultados Tabla 1. Grupo de consumo frecuente. (% respecto al superficie total de la muestra) Sujeto I Sujeto B Sujeto L Sujeto F Sujeto S Muestra 25% de células Material Material escaso 25% de Material 1 escaso células escaso inflamatorias y escasas inflamatorias Muestra Abundante 25% de 2 células metaplasia, 25% de Material escaso células inflamatorias, inflamatorias, presenta escamas y 25% de Macrófagos, células 25% de inflamatorias células con escamas metaplasia y macrófagos 50% de células inflamatorias. Muestra Escamas 25% de 3 Material escaso 25% de Material células con células escaso metaplasia. inflamatorias células inflamatorias Muestra Escasas células con 4 Escamas Material escaso metaplasia, Escamas y Escamas mucho moco abundantes macrófagos, hemosiderina Muestra Escasas células con Presencia de 5 escamas y células células inflamatorias inflamatorias y presencia en un 25% de escamas metaplasia Escamas Escamas 25% de 7 Muestra Solo escamas Material 6 escaso Escaso material Escamas 50% de células inflamatorias Tabla 2. Grupo de consumo esporádico. (% aprox. respecto al superficie total de la muestra) Sujeto A Muestra Escamas Sujeto Ca Sujeto C Sujeto M Sujeto D Escamas Material Escamas Células con 1 escaso metaplasia en un 50%, inflamatorias en un 50% y escasos macrófagos Muestra Escamas Células Sin Material Células inflamatorias 2 inflamatorias en alteraciones escaso en un 25% con un 50% y presencia de escamas escamas. Muestra Bacterias Escasos 3 Muestra Material 4 Bacterias y Células con Escasas células con macrófagos, 50 % 25% de metaplasia e metaplasia y células de células con células inflamatorias inflamatorias en un metaplasia e inflamatorias con presencia 50% inflamatorias en de escasas un 50% escamas Material escaso escaso Material Material 25% de células escaso escaso inflamatorias Muestra Escamas 50% de células 25% de 25% de 25% de células con 5 inflamatorias células células metaplasia y 25% de inflamatorias inflamatorias células inflamatorias con con presencia de 8 presencia de escamas escamas Muestra Escamas 50 % de células Escaso Escaso Escasas células con 6 inflamatorias material material metaplasia, 25% de células inflamatorias y presencia de escamas Tabla 3. Síntomas detectados por los sujetos después del consumo (Media de síntomas presentados por los sujetos a lo largo de las sesiones) Síntoma % Síntoma % Síntoma % Dolor de cabeza 13.33 Hambre 3.33 Nada 8.33 Ardor de garganta 11.66 Espasmos musculares 1.66 Hipo 1.66 Garganta seca 15 Respiración pesada 1.66 Relajación 1.66 Malestar general 1.66 Fiebre 1.66 Dolor abdominal 1.66 Molestias en la nariz 1.66 Perdida del apetito 1.66 Ardor abdominal 1.66 Irritación en boca y garganta 6.66 Falta de aire 6.66 Sensación de frescura en la garganta 3.33 Tos 8.33 Mareos 1.66 Picor en la garganta 1.66 Dolor de garganta 1.66 Obtenida de los datos del anexo 3. Pag 22. 9 imágenes Ilustración 1.1 Presencia de bacterias de tipo Coco, enfocada con microscopio fotónico a 100x. Ilustración 1.2. Presencia de bacterias tipo Coco en la muestra, enfocada con microscopio fotónico a 100x. Ilustración 2 Muestra de expectoración con Células sin alteraciones, enfocado con microscopio fotónico a 10x. Ilustración 3 Macrófago enfocado con microscopio fotónico a 100x. Ilustración 4 Células cilíndricas y queratinizadas, enfocadas en microscopio fotónico a 40x. Ilustración 5 Hemosiderina enfocada con microscopio fotónico a 40x. 10 Ilustración 6 Células con tendencia a queratinizarse, enfocado con microscopio fotónico a 40x. Ilustración 8.1 células polimorfonucleares (inflamatorias) toma experimental. (Debido al microscopio usado no se visualizan los núcleos) Ilustración7 Escamas enfocadas con microscopio fotónico a 4x. Ilustración 8.2 Numerosos leucocitos de tipo PMN en un LS de aspecto purulento (Papanicolaou, 200x). Foto teórica (Martinez-Giron. R. 2019) Ilustración 1 células con metaplasia enfocadas con microscopio fotónico en aumento 40x. 11 Análisis de resultados Sujeto I: El estado inicial del sujeto sugiere que ya existía algún daño o irritación al iniciar la toma de muestras. A partir de la segunda muestra ya es posible observar metaplasia e irritación a un nivel pulmonar, de igual manera se puede apreciar irritación en el ámbito de vías aéreas altas. Para este sujeto en particular resulta destacable la aparición de hemosiderina, lo cual podría indicar una hemorragia alveolar, según Tabaj. G. (2010) “Luego de un episodio de sangrado los macrófagos alveolares convierten el hierro de la hemoglobina en hemosiderina en el lapso de 36 a 72 horas.”. La patogénesis de la hemorragia alveolar difusa no es un proceso completamente entendido ni uniforme, parece ser que el evento más importante involucra la producción de anticuerpos en contra de la membrana basal alvéolo capilar y glomerular dirigidos en contra de un antígeno común presente en ambas membranas y al parecer desencadenado por un evento inflamatorio infeccioso (virus) o no infeccioso (fumar) que favorece la expresión de este antígeno y la reacción inmunológica secundaria, en esta entidad se encuentran anticuerpos circulantes en contra de las membranas basales correspondientes al riñón y al pulmón (Ortiz, G. s.f); Sin embargo, hace falta realizar más estudios como radiografías para diagnosticar cualquier afección en el sujeto y relacionar las hemorragias alveolares con el consumo de cigarrillos electrónicos. Es prudente también mencionar que debido al tipo de obtención de la muestra la hemorragia podría pertenecer a cualquier parte de las vías áreas. Respecto a este mismo sujeto la abundancia de macrófagos puede ser indicativo de una respuesta inflamatoria, de una infección en el área donde se tomó la muestra o síndrome de activación del macrófago, El síndrome de activación del macrófago (SAM) es un proceso inflamatorio secundario a una activación del sistema mononuclear fagocítico, con proliferación de histiocitos y hemofagocitosis. Se puede describir como una alteración no maligna de la regulación del sistema inmune, que puede estar asociado con infección, virus, malignidad, medicamentos, administración prolongada de lípidos en alimentación parenteral y enfermedades reumáticas. Reiteramos que es importante tener en cuenta que los resultados de la muestra no deben 12 interpretarse de forma aislada, sino en conjunto con la historia clínica del paciente y otros resultados de pruebas y exámenes complementarios, por lo cual no podemos asegurar la existencia de una enfermedad como el SAM en este sujeto. Para los demás sujetos observamos de manera general que una mayoría de las muestras no reflejan la condición del tejido pulmonar, sino que nos muestran el estado de las vías áreas altas (faringe y laringe), de lo cual es destacable el hecho de la presencia de escamas y células inflamatorias (polimorfonucleares) que indican irritación e inflamación, lo cual ha sido relacionado con el acetato de vitamina E, propilenglicol y saborizantes (generadores de aldehídos y óxido de propileno.). Encontramos múltiples pruebas que presentan metaplasia en niveles moderados (de 0 a 50% de la superficie total de la muestra) a las cuales les preceden muestras que indican irritación e inflamación. En el caso de algunos sujetos del grupo amarillo, encontramos que se dio un brote de bacterias del tipo coco; situación que se ha visto está relacionada al consumo de vapes tal como lo menciona Thirión-Romero. I. en su artículo Daño pulmonar grave en vapeadores (2021): “se ha descrito un incremento de síntomas respiratorios en sujetos con pulmones sanos, un empeoramiento de síntomas respiratorios en pacientes con asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) y fibrosis quística, así como un incremento en la virulencia de microorganismos como Staphylococcus aureus, y un aumento en la tasa de infecciones por virus”. Esto puede estar asociado al daño a la microbiota, específicamente a un desequilibrio de la microbiota oral y respiratoria, lo que promueve el crecimiento de bacterias patógenas. Reservas Uno de los sesgos de nuestra investigación son los altos niveles de contaminación a los que están expuestos nuestros sujetos de prueba, debido a que viven en la zona metropolitana de la CDMX. Por lo tanto, como se describe en el artículo de Metaplasia de vías aéreas asociada a tabaquismo y contaminación ambiental mediante esputo de Ferman, F. et al. (2018): “la contaminación ambiental como el tabaquismo afectan el funcionamiento normal 13 del epitelio respiratorio ... lo cual provoca estrés oxidativo que conlleva al desarrollo de inflamación crónica”. Dicho esto, hay que aclarar que durante el proceso de consumo de nuestra investigación se presentó un pico alarmante en los niveles de contaminación, que dio como resultado una contingencia ambiental el día 24/02/2023, el cual fue declarado como el primer día del año con más contaminación ambiental; según informa el gobierno de la CDMX (anexo 4 pág.23). Esto pudo alterar los resultados de la investigación, situación que es observable en la muestra número 5 de cada grupo y sujeto (dado a que la muestra se tomó en ese día). Esto es una variable que no fue controlada y expuso a nuestros sujetos, creando en ellos respuestas de irritación e inflamación. Sintomatología detectada Ardor de garganta, garganta seca, dolor de garganta, irritación en boca y garganta y tos: Estos malestares los encontramos relacionados entre sí, debido principalmente a su ubicación anatómica. La garganta actúa como el conducto para el aire, los alimentos y los líquidos. (Stanford Medicine, 2022); por esto la garganta es un órgano que se encuentra en constante fricción por el paso de alimentos, al igual que aire y sus componentes. Así que se le considera resistente a estos cambios, pero al ponerla en contacto con los compuestos irritantes del cigarrillo electrónico ( ya antes mencionados), como el formaldehído, acetaldehído y óxido de propileno, la acroleína del glicerol, nitrosaminas, metales, compuestos orgánicos volátiles, carbonilo y fenólicos; genera esta sensación de ardor, irritación o incluso dolor. En otro sentido, la sequedad la podemos relacionar con la falta de lubricación de la garganta después de estar en contacto con las sustancias irritantes. De esta forma la tos, resulta ser la solución que tiene el cuerpo de responder cuando algo irrita la garganta o las vías respiratorias (Mayo Clinic, 2020). También agrupamos a la tos con estos malestares puesto que, es el mecanismo del cuerpo para combatir la sequedad. 14 Dolor de cabeza, Mareos, Relajación, Respiración pesada, Falta de aire: Estos malestares los relacionamos entre sí por tender a ser propiciados por sustancias específicas del cigarrillo electrónico, como la nicotina y el propilenglicol; ya que pueden afectar la circulación sanguínea y la oxigenación del cerebro, sobre este mismo eje es dónde entraría la respiración pesada y/o la falta de aire (Farsalinos, K. E., & Kistler, K. A. 2019). Aunque la relajación se debe a la nicotina que se encuentra en la mayoría de los líquidos de cigarrillos electrónicos, este psicoactivo es en realidad un estimulante del sistema nervioso, que puede aumentar temporalmente los niveles de dopamina y otros neurotransmisores en el cerebro; provocando una sensación de relajación o euforia (National Institute on Drug Abuse, 2020). Es indispensable señalar que los síntomas mencionados anteriormente no son del todo completa y directamente relacionables con el uso de los vapes, esto debido a las innumerables variables externas como, la salud de cada sujeto. Ahora bien, para todos los demás síntomas descritos por los sujetos, aún no se han desarrollado investigaciones que los vinculen acertadamente con el consumo de cigarrillos electrónicos, ya que se ven opuestos a lo que ya se ha descrito en esta investigación, razón por la cual sugerimos la creación de nuevas investigaciones en dichos temas. Conclusión En relación con los resultados obtenidos y la comparación de nuestra hipótesis planteada podemos decir, que como se esperaba notamos un evidente cambio citológico como la metaplasia, inflamación e irritación; lo cual pudimos relacionar directamente con los químicos encontrados en los cigarrillos electrónicos, tal como puede ser el propilenglicol y glicerol en la irritación, o los saborizantes con efectos carcinógenos. Respondiendo a la pregunta acerca de su inocuidad, podemos decir que no lo son, pues generaron efectos negativos en un periodo muy corto de tiempo (10 días). Gracias a los resultados obtenidos, podemos decir que no se recomienda en absoluto su consumo; ni siquiera como una terapia alterna para dejar los cigarros 15 de tabaco, puesto que su consumo genera mutaciones al igual que los cigarrillos convencionales, mismas que están relacionadas con etapas tempranas de cáncer. Aunado a esto también se encuentra la susceptibilidad que generan a infecciones virales y bacterianas; así como la afectación de otros sistemas como el cardiovascular. En un nivel sintomatológico se pudo concluir que se encontraron efectos adversos como dolores de cabeza, mareos, fiebre, resequedad en la garganta, etc. Los cuales se pueden relacionar con la nicotina principalmente. Sustancia que representa un psicoactivo muy fuerte y una de las razones más comunes para que las personas continúen con el consumo de este tipo de drogas, gracias a que generalmente produce una emoción de euforia y aumento de la concentración. Es por esto que su legalización la vemos como una opción para evitar el consumo en jóvenes; ya que, si se hace de manera legal como los cigarros de tabaco, se puede prohibir su alcance a menores de edad o uso y abuso de jóvenes entre 18 a 22 años. Además de que se pueden regular los químicos que se encuentran presentes en estos, no obstante, estos deberían seguir las mismas inhibiciones para el consumo que siguen otros productos como: el aumento de impuestos, colocación de leyendas y uso de imágenes precautorias en los empaques. Por último, consideramos que es de suma importancia generar más campañas de concientización sobre el uso de cigarrillos electrónicos, en las cuales el pilar sea el aprendizaje sobre los efectos adversos que estos tiene en el cuerpo, tanto a corto como a largo plazo; así como también divulgar los efectos que tiene un consumo intermitente, que puede dañar incluso tanto como un consumo frecuente. 16 Referencias 1. Accinelli, R., Lam, J., & B.Tafur, K. (2020). EL CIGARRILLO ELECTRÓNICO: UN PROBLEMA DE SALUD EMERGENTE. 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Headache attributed to ecigarettes: a systematic review. Internal and emergency medicine, 14(5), 665-677. doi: 10.1007/s11739-019-02072-0 7. Ferman-Cano, F. et al. (1970) Metaplasia de Vías Aéreas Asociada a tabaquismo Y Contaminación Ambiental Mediante Esputo*, Revista Médica del Instituto Mexicano del Seguro Social. Available at: https://www.redalyc.org/jatsRepo/4577/457754052010/html/index. html. 8. Monraz-Pérez, S., Regalado Pineda, J., & Pérez Padilla, R. (2022, 14 noviembre). El cigarrillo electrónico: Peligro u oportunidad. CDC. https://www.cdc.gov/tobacco/basic_information/e- cigarettes/spanish/los-riesgos-de-los-cigarrillos-electronicos-parajovenes.html#:~:text=El%20uso%20de%20cigarrillos%20electr%C 3%B3nicos,los%2020%20a%2025%20a%C3%B1os. 9. National Institute on Drug Abuse. (2020). What are electronic cigarettes? Retrieved from https://www.drugabuse.gov/publications/drugfacts/electroniccigarettes-e-cigarettes 10. Ortiz, G., & Varón, F. (s. f.). 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Confirmaron la primera muerte por vapeo en México.infobae. https://www.infobae.com/america/mexico/2019/11/09/confirmaronla-primera-muerte-por-vapeo-en-mexico/ ANEXOS Anexo 1: Toma de muestra de expectoración o esputo; la técnica de esputo con una efectividad de entre el 40% (si se realiza solo una) y un 90% (si se realizan 5), consiste en la extracción de células de la vía respiratoria, con la finalidad de posteriormente, realizar una preparación la cual será analizada al microscopio. 20 Para extraer la muestra en caso de que no sea capaz de toser profundamente y sacar una flema de los pulmones, se puede inducir por medio de nebulizaciones. La flema en cuanto se adquiere debe ser fijada en etanol al 96% Anexo 2: Tinción de Papanicolau Se basa en la reacción de los colorantes con los elementos celulares y su captación varía de acuerdo con el PH. Fijar en alcohol al 96% 5 minutos. Enjuagar en agua Lavados. Hematoxilina 1 minuto Agua Lavados. Agua amoniacal Hasta que el color vire. Agua Lavados. Alcohol al 96% Lavados. OG 6 3 minutos. Alcohol al 96% Lavados. Alcohol al 96% Lavados. EA 50 3 minutos. Alcohol al 96% Lavados. Alcohol al 96% Lavados. 21 Alcohol al 100% 5 minutos. Alcohol 100% 5 minutos. Xilol 5 minutos. Xilol 5 minutos. Montaje Resultados: Núcleos: Azul o morado Citoplasma: Naranja en células queratinizadas, amarillo calabaza en células superficiales, cianófila en células basales o parabasales, rosa en células con mediana actividad metabólica y estrogénica. Anexo 3: •Encuesta inicial de descarte 1. Edad 2. Sexo 3. ¿Usas cigarrillos electrónicos? 4. ¿Qué tan seguido? 5. ¿Fumas alguna otra sustancia (cigarro, marihuana, etc.)? 6. ¿Has tenido alguna enfermedad en vías respiratorias en los últimos 4 meses 7. ¿Has tenido Covid-19? 8. En caso de que tu respuesta sea si, ¿hace cuánto? 9. ¿Has tenido enfermedades en las vías respiratorias que te dejen secuelas graves o permanentes? 10. ¿Te interesaría consumir vapes? 11. ¿Por qué no vapeas? 12. En caso de ser un candidato viable, ¿te interesaría participar en un estudio sobre cigarrillos electrónicos? 22 13. Si tu respuesta es si déjanos un número o red social para contactarte. Encuesta de Pre-consumo Correo electrónico: Nombre: 1. ¿Cómo te sientes hoy? 2. ¿Estas o te sientes estresado? 3. ¿Te sientes presionado? 4. ¿Por qué te sientes presionado? 5. ¿Tienes tos o alguna enfermedad? 6. ¿Estás cansado o tienes fatiga? Encuesta de Post consumo 1. ¿Cómo te sientes? 2. ¿Estas o te sientes estresado? 3. ¿Tienes tos? 4. ¿Tienes sequedad? 5. ¿Sientes que te falta el aire? 6. ¿Estás cansado o tienes fatiga? 7. ¿Notaste algún cambio? Anexo 4: Calidad del Aire on. (2023, 24 febrero). Twitter. https://twitter.com/Aire_CDMX/status/1629125325199183877?s=20 23 Gobierno de la Ciudad de México on. (2023, 24 febrero). Twitter. https://twitter.com/GobCDMX/status/1629210948912447488?cxt=HHwWgIDUobyuj5wtAAA 24