PROBLEMAS DE BIOQUÍMICA Curso 2003-2004 BIOENERGÉTICA, TRANSPORTE Y METABOLISMO Nota: Cuando no se indique lo contrario, la temperatura se considerará 25°C. 1. Calcular el calor estándar de formación del ácido acético a 25°C: 2C + 2H2 + O2 ----> CH3-COOH a partir de los valores siguientes: Ho = -870,9 kJ/mol CH3-COOH Hof = -393,1 kJ/mol C Hof = -285,6 kJ/mol H2 CH3-COOH + 2O2 ----> 2CO2 + 2H2O C + O2 --——> CO2 H2 + 1/2O2 --—-> H2O Sol. -486,5 kJ/mol CH3-COOH 2. El disacárido maltosa puede hidrolizarse para rendir las moléculas del monosacárido glucosa, de acuerdo con la ecuación: Cl2H220ll + H2O —-—> 2C6H12O6 A partir del calor estándar de combustión de cada uno de los azúcares implicados: C6H12O6 + 6O2 ---> 6CO2 + 6H2O Cl2H22Oll + 12O2 ---> 12CO2 + 11H2O Calcular el calor de la reacción presión constante. Sol. -17,55 kJ/mol maltosa. Ho = -2.813,1 kJ/mol glucosa Ho = -5.643,8 kJ/mol maltosa de hidrólisis cuando se realiza a 3. El calor estándar de combustión del etanol a 25°C y 1 atm de presión es –1.372 kJ/mol. El calor estándar de combustión del acetaldehido es – 1.167 kJ/mol. Considerando que Go para la oxidación del etanol a acetaldehido es de -197 kJ/mol, calcular: a) Ho; b) So para dicha reacción. Sol. Ho = -205 kJ/mol; b) So = -26,8 J/mol-1 K-1 4. El ácido polirriboadenílico en disolución a pH neutro y baja temperatura forma una estructura helicoidal. A 35°C se produce una transición conformacional con unos valores de H = 33,44 kJ/mol y G = 11,6 kJ/mol. Calcúlese la variación de entropía del proceso e indíquese el grado de ordenamiento de las estructuras inicial y final. Sol. S = 146,3 J/mol-1 K-1 5. Calcular G' para la hidrólisis del ATP a ADP y Pi en las condiciones que existen en una célula muscular en reposo: [ATP] = 5,0 mM, [ADP] = 0,5 mM, [Pi] = 5,0 mM (considerar 37°C). G'o(pH 7,0) = -32,2 kJ/mol. Sol. -51,8 kJ/mol. 1 6. ¿A qué concentración mínima debe estar presente el malato para que la reacción catalizada por la fumarasa: malato -—> fumarato + H2O (Go = +3,13 kJ/mol) vaya hacia la derecha si el fumarato está presente a una concentración de 10-3 M? (considerar 37°C). Sol. 3,3 x 10-3 M. 7. La glucosa-6-fosfato (G-6-P) se hidrolizó enzimáticamente a pH 7 y 25°C hasta glucosa y fosfato inorgánico. La concentración inicial de G-6P fue 0,1 M. Una vez alcanzado el equilibrio sólo el 0,05% de la G-6-P original permanecía como tal. Calcular: a) Keq y Go para la hidrólisis de la G-6-P; b) Keq y Go para la reacción de síntesis de G-6-P a partir de glucosa y fosfato. Sol. a) Keq = 199; G'o = -13,11 kJ/mol; b) K'eq = 5 x 10-3 M-1; G'o = + 13,11 kJ/mol. 8. Se ha medido la constante de equilibrio de la reacción de la tripsina con diversos inhibidores de su acción. Los valores obtenidos son: Inhibidor de tripsina K’eq de soja 109 M ovomucoide 3 x 107 M de haba de lima 2 x 109 M Calcúlese la variación de energía libre estándar de la reacción en cada caso. Los valores obtenidos, mediante calorimetría, de la variación de entalpía de la reacción en condiciones estándar son 35,95 kJ/mol; 23,4 kJ/mol y 8,8 kJ/mol, respectivamente, para cada uno de los inhibidores. ¿Cuál es la variación de entropía que se produce en la reacción de la tripsina con sus inhibidores, procedentes de diversas fuentes, en condiciones estándar? Sol. G'o (kJ/mol-1) -51,4 -42,6 -53,1 So (J/mol-1 K-1) 292,8 221,48 207,4 9. G'o para la hidrólisis del ATP a pH 7 y 25°C es de -32,2 kJ/mol, G'o para la hidrólisis de la glucosa-6-fosfato a pH 7 y 25°C es -13,11 kJ/mol. A partir de estos datos calcular G'o y K'eq para la reacción que tiene lugar entre la glucosa y el ATP catalizada por la enzima hexokinasa. Sol. G'o = -19,1 kJ/mol; K'eq = 2,21 x 103. 10. La ruptura del citrato hasta acetato y oxalacetato tiene un G'o = -2,84 kJ/mol. La reacción de formación de citrato a partir de oxalacetato y acetil-CoA posee, en las mismas condiciones de pH y temperatura, una K'eq = 3,2 x 105. A partir de estos valores calcular la energía libre 2 estándar aparente acetato y CoA. y la K'eq para la hidrólisis del acetil-CoA hasta Sol. G'o = -34,27 kJ/mol; K'eq = 106 M (a 25°C). 11. Calcular K'eq y G'o globales, para la conversión de ácido fumárico en ácido cítrico a pH 7, 25°C y en presencia de las enzimas, cosubstratos y cofactores adecuados: fumarasa Fumarato + H2O <--------> malato K'eq = 4,5 málico deshidrogenasa Malato + NAD+ <--------------------> oxalacetato + NADH + H+ K'eq = 1,3 x l0-5 citrato sintasa Oxalacetato + Ac–CoA +H2O <-----------------> citrato + CoA-SH K'eq = 3,2 x l05 Sol. K'eq = 18,72; Go = -7,25 kJ/mol 12. En células de levadura respirando activamente, la razón ATP/ADP es aproximadamente 10. ¿Cuál debe ser el valor de la razón 3fosfoglicerato/l,3-difosfoglicerato para hacer termodinámicamente favorable la reacción de la fosfoglicerato kinasa, en la dirección de síntesis de 1,3-difosfoglicerato? Dato: G'o = +18 kJ/mol. Sol. 142 13. La enzima manosa isomerasa cataliza la reacción: manosa <----> fructosa Con objeto de obtener datos termodinámicos de la reacción se midieron las concentraciones de manosa y fructosa en el equilibrio a pH 7,0 y 25°C, siendo, respectivamente, 1,63 x 10-3 y 4,0 x 10-3 M. Calcúlese la constante de equilibrio de la reacción, la variación de energía libre estándar y la variación de energía libre cuando la concentración de fructosa es 8,0 x 10-3 M y la manosa 6,0 x 10-4 M. ¿Es, en estas condiciones, espontánea la reacción en el sentido escrito? Sol. K'eq = 2,45; G'o = -2.220 J/mol; G' = 4.197 J/mol. 14. G'o de la reacción A + B <—-> C + D vale -8,2 kJ/mol a pH 7,0 y 25°C. Si partimos de una concentración 4 mM de A y 6 mM de B a pH 7,0 y 25°C. ¿Cuáles serán, en el equilibrio, las concentraciones de cada uno de los reactivos y productos? Sol. [C] = [D] = 3,7 x 10-3 M; [B] = 2,3 x 10-3 M; [A] = 0,3 x l0-3 M 15. Cuando se parte de una solución 1 mM de A y 2 mM de B a pH 7,0 y 25°C y se añade un catalizador apropiado, tiene lugar la siguiente reacción: A + B <——> C + D. Una vez alcanzado el equilibrio, se mide la concentración de B y resulta ser 1,25 mM. Calcular G'o de esta reacción. Sol. G'o = -1,46 kJ/mol. 3 16. La siguiente reacción: Fosfoenolpiruvato + ADP <—-——-> piruvato + ATP posee un G'o = -31,35 kJ/mol. A) Si el fosfoenolpiruvato y el ADP están presentes inicialmente a concentración 10 mM, pero no hay piruvato ni ATP ¿cuáles serían en equilibrio las concentraciones de sustratos y productos? B) ¿Qué valor tendría G' si las concentraciones de sustratos y productos fueran [ADP]/[ATP] = 4, [piruvato] = 3 x 10-2 M y [fosfoenolpiruvato] = 1 x 10-5 M? Sol. A) [fosfoenolpiruvato] = 2 x 10-5 M; [ADP] = 2 x 10-5 M; [piruvato] = 9,97 x 10-3 M y [ATP] = 9,97 x 10-3 M. B) G' = -14,9 kJ/mol. 17. La sacarosa se hidroliza a glucosa y fructosa en presencia de sacarasa con una K'eq = 2 x 10-5 M y la fructosa se convierte en glucosa mediante la hexosa isomerasa con una K'eq = 2. La glucosa se utiliza en la reacción: Glucosa + ATP <-—-—-> Glucosa 6-P + ADP G'o = -16,42 kJ/mol. A) Escribir las reacciones de la sacarasa y de la hexosa isomerasa y hallar sus G'o. B) Hallar G'o para la reacción de conversión de la sacarosa en Glucosa-6P. C) Si la sacarosa es 0,6 mM en condiciones de equilibrio y la relación [ATP]/[ADP] = 3, calcular la concentración de glucosa-6-P. Todas las reacciones transcurren a 37°C. Sol. A) G'o (sacarasa) = 28 kJ/mol; G'o (isomerasa) = -1,8 kJ/mol. B) G'o = -6,7 kJ/mol. C) [Glucosa]eq = 0,27 M 18. La K'eq de la hidrólisis del acetato de etilo a 25°C en presencia de HCl 0,1 M es 0,33 M. Calcular: a) Go a 25°C de esta reacción a ese pH; b) K'eq y G’o a 25°C a pH 7. PKa acético = 5. Sol. a) G'o(pH=l) = +2,8 kJ/mol; b) K'eq = 33 M; G'o(pH=7) = -8,65 kJ/mol. 19. La hidrólisis del Acetil-CoA es una reacción exergónica en condiciones estándar: acetil-CoA + H2O <—-—> acetato + H+ + CoA–SH Go = -15,5 kJ/mol ¿Qué valor tendrá G' de esta reacción a 25°C y pH 7, cuando acetato, CoA y acetil-CoA están todos presentes a concentración 10 mM? pKa acético = 5. Sol. -38,3 kJ/mol 20. La K'eq de la reacción de hidrólisis del acetil-CoA a 27°C y pH 7 tiene un valor de 5 x 104 M . a) ¿Cuánto valdrá el G' para esa reacción a 27°C y pH 3 cuando acetilCoA, acético y CoA están todos ellos presentes a concentración 10 mM? pKa acético = 5. 4 b) Si desde las condiciones descritas en el apartado a quisiéramos llevar la reacción al equilibrio aumentando la concentración de sólo uno de los compuestos participantes en la misma ¿qué compuesto elegirías? ¿Hasta qué valor se tendría que aumentar su concentración? Sol. a) G'(pH=3) = -27,2 kJ/mol; b) acético o CoA, hasta 500 M 21. Una enzima lleva a cabo la siguiente reacción de escisión: AH <——> BH + C G'o(pH 4) = +25,1 kJ/mol. Los pKa de AH y BH son 13 y 6, respectivamente. a) En condiciones estándar, ¿a partir de qué pH la reacción tenderá a ocurrir hacia la derecha? b) ¿Cuáles serán las concentraciones en el equilibrio, a pH 8, si partimos de 1 M de AH? ¿Y si inicialmente hay 0,1 M de AH y 0,01 M de BH? c) A pH 7,5, y si [BH] = [C] = 10-7 M y [AH] = 100 mM, ¿qué eficiencia en la conservación de la energía es necesaria para sintetizar un mol de ATP? G'o(pH 7,5) para la síntesis de ATP = +33,44 kJ/mol. Sol. a) pH = 10,38; b) [AH] = 0,932 M; [BH] = [C] = 0,068 M; [AH] = 0,085 M, [BH] = 0,0246 M, [C] = 1,46 x 10-2 M; c) 57,5%. 22. Considérese la siguiente reacción que tiene lugar a pH 3: AH + B <-----> A + BH Su cambio de energía libre estándar es; G'o = -16,7 kJ/mol. BH tiene un pKa = 5, mientras que AH tiene un pKa = 9. Escribir la reacción que se daría a pH 7 y calcular su constante de equilibrio aparente (K'eq). Sabiendo que el cambio de energía libre estándar a pH 7 para la formación de ATP a partir de ADP y Pi es de 33,44 kJ/mol ¿Cuál será a pH 7 la relación mínima de [sustratos]/[productos] necesaria para que a la reacción de un mol de uno de los sustratos, con un mol del otro se pueda acoplar la síntesis de un mol de ATP en condiciones estándar? Sol. AH + B <---> A + B- + H+; K'eq = 8,2 x 104; [sustratos]/[productos] = 8,3 23. La llamada ruta GS-GOGAT es la principal vía de asimilación de amonio en la mayoría de los microorganismos. En dicha ruta, la enzima glutamina sintetasa cataliza la reacción: glutámico + NH4+ <---> glutamina + H2O con una K'eq (PH 7) = 3,2 x 10-3 M-1 Glutámico: pKa (α-COOH) = 2; pKa (R-COOH) = 4; pKa (α-NH3+) = 10 Glutamina: pKa (α-COOH) = 2; pKa (α-NH3+) = 9 a) Calcular qué eficiencia mínima en la conservación de energía debe darse a pH 9,5 en condiciones estándar para que la síntesis de 1 molécula de glutamina se pueda acoplar a la hidrólisis de 1 molécula de ATP. Dato: G'o (pH 7) hidrólisis de ATP = -32,2 kJ/mol b) Si [ATP] = 4 μM, [ADP] = 6 μM, [Pi] = 2 μM, [Glu] = 15 μM, [NH4+] = 3 μM y [Gln] = 25 μM, escribir la reacción acoplada a pH 7 en el sentido termodinámicamente favorable, así como el valor del incremento de energía libre de dicha reacción. c) Con unas concentraciones de [Glu] = 2 μM y [Gln] = 7 μM, y de [ATP] = [ADP] = [Pi] = 1 μM, calcular la concentración máxima de amonio necesaria para que a pH 11 la reacción acoplada transcurra en el sentido de síntesis de ATP. 5 Sol. a) 80%; b) Glu- + H+ + NH4+ + ATP --> Gln + ADP + Pi; G' = -16,6 kJ/mol; c) 2,63 μM 24. Sea la reacción: Acetil-CoA + H2O <---> Acético + CoA cuya K'eq = 3,5 x l0-2 a 25°C y pH=0. a) Calcular la relación mínima [Acético]/[AcCoA] que invierte el sentido de la reacción a pH = 0 cuando la [CoA] = 100 mM. b) Considerando la misma concentración de CoA y una razón de [Acético]/[AcCoA] = 100 ¿A qué pH podría invertirse el sentido de la reacción? ¿Cuál es el G'o de la reacción a ese pH? Datos: pKa (acético) = 5 Sol. a) 0,35; b) pH = 7,5; G'o = -5,7 kJ/mol 25. La reacción : A <-—> nBH + C tiene, a pH 4 y 25°C, un G'o = -16,5 kJ/mol A. La energía liberada por la reacción a pH 8 y en condiciones estándar, disipándose el 30% en forma de calor, se utiliza para sintetizar dos moles de ATP, cuando [ADP]/[ATP] = 104 y [Pi] = 10 mM. a) Determinar el número de moles de BH implicados en la reacción. b) Determinar la K'eq (pH 10). Datos: pKa(BH) = 5; G'o(pH 8) = 30,5 kJ/mol para la síntesis de ATP. Sol. a) n = 2; b) K'eq (pH 10) = 7,6 x 1012 M 26. A 25°C y en presencia de SO4H2 0,05 mM, la reacción CH + DH <-—> A + B posee un G'o = -47,9 kJ/mol. Sabiendo que pKa(CH) = 5 y pKa(DH) = 7, se pide: a) G'o y K'eq a pH 6 y pH 10 . Escribir la reacción a los pH indicados, asi como el sentido de la misma. b) Calcular las concentraciones en el equilibrio de C, D, B y A a pH 10, cuando se parte de las concentraciones iniciales: [A] = [B] = 100 mM. c) La síntesis de una molécula X se acopla a la citada reacción con una eficiencia del 15%. ¿Cual será el G'o para la síntesis de X si a pH 6 se sintetizan 3 moléculas de X? Sol.a) G'o(pH 6) = -42,2 kJ/mol; K'eq= 2,5 x 107; G'o(pH 10) = -2 kJ/mol; Keq = 2,25 b) [C-] = [D-] = 40 mM; [A] = [B] = 60 mM c) Para la síntesis de X Go(pH 6) = +2,1 kJ/mol 27. A pH 7, el potencial normal, Eo, del sistema riboflavina reducida/riboflavina oxidada es -0,186 V. Calcular el porcentaje de forma oxidada y reducida presente en una solución de riboflavina cuyo potencial es -O,214 V a dicho pH sabiendo que se transfieren 2 electrones. Sol. Forma oxidada = 10,5%; forma reducida = 89,5% 28. Una solución que contiene NADH y NAD+ a concentraciones 10 mM y 1 mM respectivamente se mezcla con el mismo volumen de otra que contiene acetaldehido y etanol 0,01 M cada uno. Escribir la reacción que podría producirse espontáneamente y calcular su E'. 6 E'o (pH 7) NAD+/NADH = -0,32 V E'o (pH 7) acetaldehido/etanol = -0,20 V Sol. El NADH reduce al acetaldehido. E' = +0,15 V 29. La K'eq a pH 7 de la reacción: etanol + NAD+ <---> acetaldehido + NADH + H+ tiene un valor de 1,15 x 10-4. Sabiendo que E'o (pH 7) del par acetaldehido/etanol es -0,20 V, calcular E'o (pH 7) del par NAD+/NADH. Sol. -0,318 V. 30. Calcular el valor de G'o y K'eq a 30°C y pH 7 para la oxidación del agente reductor AH2 por el agente oxidante B. En las condiciones siguientes: E'o(A/AH2) = -0,45 V; E'o(B/BH2) = +0,25 V. Sol. G'o = -134,6 kJ/mol; K'eq = 2 x 1023 31. Una solución conteniendo 0,1 mol de succinato, fumarato, riboflavina y riboflavina-H2 se preparó a 30°C y pH 7. Escribir la reacción termodinámicamente favorable y calcular E'o asi como G'o. A pH 7, E'o (riboflavina/riboflavina-H2) = -0,2 V y E'o (fumarato/succinato) = +0,03 V Sol. La riboflavina-H2 reduce al fumarato. E'o = +0,23 V; G'o = -44,2 kJ/mol 32. E'o (citbox/citbred) = 0,00 V; E'o (FMN/FMNH2) = -0,12 V. Escribir la reacción que tendría lugar espontáneamente en condiciones estándar. ¿Qué par actuaría como oxidante? ¿y como reductor? Calcular G'o y K'eq. Sol. El FMNH2 reduce al citocromo b. Par oxidante: citbred/citbox; par reductor: FMN/FMNH2. G'o = -23,1 kJ/mol de FMNH2 ó -11,55 kJ/mol de citocromo b K'eq = 10,8 x 103 33. Se disuelven 10 moles de acetato, 2 moles de malato, 5 de acetaldehido y 1 de oxalacetato en agua a pH 7,0 y 25°C en presencia de un catalizador adecuado. Escribir la ecuación de la reacción que tiene lugar, indicando en qué sentido se produce. Indicar además qué compuesto se oxida y cuál se reduce. ¿Qué par actúa como oxidante? E'o (oxalacetato/malato) = -0,102 V E'o (acetato/acetaldehido) = -0,60 V Sol. Actúa como oxidante el par oxaloacetato/malato. 34. Calcular el valor de G'o y K'eq a pH 7,0 y 25°C para la siguiente reacción: FADH2 + 2 citocromo c (Fe3+) <-—> FAD + 2 citocromo c (Fe2+) + 2 H+ Los potenciales normales aparentes de los sistemas de la flavina y del citocromo c son -0,06 V y +0,25 V respectivamente, a la misma temperatura y pH. Sol. G'O = -59,8 kJ/mol de FADH2 ó -29,9 kJ/mol de citocromo c. K'eq = 3 x 1010 7 35. Escríbase la reacción espontánea que se produce y calcúlese su G' cuando se añade la enzima láctico deshidrogenasa a una solución que contiene piruvato, lactato, NAD+ y NADH en las proporciones siguientes: a) [lactato]/[piruvato] = 1; [NAD+]/[NADH] = 1 b) [lactato]/[piruvato] = 1000; [NAD+]/[NADH] = 1000 E'o (pH 7) piruvato/lactato = -0,19 V E'o (pH 7) NAD+/NADH = -0,32 V Sol. a) El NADH reduce al piruvato. G'o = -25 kJ/mol; b) el lactato reduce al NAD+. G' = -9,6 kJ/mol 36. La triosa-fosfato deshidrogenasa cataliza la siguiente reacción: 3-fosfogliceraldehido + NAD+ + Pi <---> 1,3 difosfoglicerato + NADH + H+ a) ¿En qué sentido se desarrollará esta reacción cuando el sistema esté en condiciones estándar a pH 7,0 y 30°C? b) A esta misma temperatura y pH ¿en qué sentido se desarrollará espontáneamente la reacción si [NAD+]/[NADH] = 100, [Pi] = 0,01 M y [3fosfogliceraldehido]/[1,3-difosfoglicerato] = 200. Calcular AG' en uno y otro caso. E'o (l,3-difosfoglicerato/3-fosfogliceraldehido, Pi) = -0,29 V E'o (NAD+/NADH) = -0,32 V Sol. a) Formación de 3-fosfogliceraldehido. AG'o = -5,8 kJ/mol b) Formación de 1,3-difosfoglicerato. AG'=-7,8 kJ/mol 37. Acetaldehido + NAD+ <---> acetato + NADH + 2H+ La G' de esta reacción vale -71,1 kJ/mol cuando la concentración inicial de acetaldehido es 50 veces mayor que la de acetato y la de NAD+ 20 veces mayor que la de NADH, a pH 7,0 y 25°C. Calcular el potencial normal de óxido-reducción a pH 7,0 del par acetaldehido/acetato sabiendo que el del par NAD+/NADH es -0,32 V. Sol. E'o = -0,6 V 38. Si la concentración intracelular de succinato para cada una de las sustancias, calcúlese el valor [FADH2]/[FAD] que se necesitará para que la reacción redox vaya en el sentido de formación de succinato. E'o (succinato/fumarato) = +0,03 V. E'o (FADH2/FAD) = Sol. [FADH2]/[FAD] = y fumarato es 10-4 M mínimo de la relación entre estos dos pares -0,06 10-3 39. La glutámico deshidrogenasa cataliza la siguiente reacción: -cetoglutarato + NADH + NH4+ <-—> glutamato + NAD+ + H2O Si intracelularmente los valores de las relaciones entre las concentraciones de las formas reducida y oxidada de cada uno de los pares redox que intervienen son, en ambos casos, 10/1, calcular la concentración mínima de NH4+ necesaria para dirigir la reacción en el sentido de la síntesis de glutamato. A pH 7,0 y 30°C: E'o (NAD+/NADH) = -0,32 V E'o (α-cetoglutarato,NH3/glutamato) = -0,14 V. Sol. [NH4+] = 10-6 M. 8 40. A 25°C y pH 7, el E'o del par NAD+/NADH es -0,32 V y el del par oxalacetato/malato -0,17 V. En contra de lo predecible, en el organismo vivo el NAD+ es reducido por el malato que pasa a oxalacetato. Calcular el G'o asociado a dicha reacción y explicar por qué a pesar de ser endergónica se produce normalmente en los organismos vivos. Sol. G'o = +28,95 kJ/mol. 41. Una de las principales reacciones de la glucolisis es la oxidación del GAP por el NAD+ acoplada a la síntesis de ATP: GAP + NAD+ + ADP + Pi <---> 3PG + NADH + H+ + ATP Esta reacción es la suma de otra dos, una de óxido-reducción y otra de fosforilación: GAP + NAD+ + H2O <-—> 3PG + NADH + H+ ADP + Pi <--> ATP + H2O La reacción redox implica 2 electrones. El potencial del par 3PG/GAP a pH 7, y cuando la concentración de GAP es 100 veces mayor que la de 3PG es -0,61 V. El del par NAD+/NADH, al mismo pH, es -0,25 V cuando la razón NAD+/NADH es 200. La K'eq de la reacción de síntesis de ATP es 1,82 x 10-6 M. a) En condiciones estándar y a pH 7, ¿cuánto vale el G'o de la reacción acoplada? b) ¿Cuánto vale la K'eq a pH 7 de la misma reacción? c) Determinar para la reacción de oxidación del GAP, qué concentración de 3PG habrá en el equilibrio cuando [NAD+]/[NADH] = 10-4 y [GAP]= 10-6 M. ¿Cuánto valdrá G' (pH 7) en esas condiciones? d) Si las razones [NAD+]/[NADH] y [GAP]/[3PG] son 104, ¿cuál debe ser la eficiencia en la conservación de la energía para que se puedan sintetizar dos moléculas de ATP a partir de la oxidación de un GAP? Sol. a) G'o = -12 kJ/mol; b) K'eq = 127,6 M-1, c) [3PG] = 7 x 10-3 M; d) 72,5% 42. El potencial normal a pH 0 del par de 2e- AH2/A es 0,40 V. Calcular el potencial normal a pH 4, 9 y 10, sabiendo que los valores de pKa son pKa1 = 8 y pKa2 = 11. Sol. E'o (pH 4,0) = +0,16 V; E'o (pH 9,0) = -0,11 V; E'o (pH 10,0) = -0,14 V 43. Los pares redox DPIPox/DPIPred y dehidroascórbico/ascórbico pueden reaccionar intercambiándose electrones. Escribir la reacción que tiene lugar y decir qué par actúa como oxidante a pH 5 y a pH 10, cuando la relación [DPIPox]/[DPIPred] = 0,1 y la relación [dehidroascórbico]/ [ascórbico] = 100. Los pKas del ácido ascórbico son 4 y 11 y el pKa del grupo fenólico del DPIP que interviene en la relación vale 11. E'o (pH 7,0) DPIPox/DPIPred = 0,22 V. E'o (pH 7,0) Dehidroasc/Asc. = 0,08 V Sol. pH 5, DPIPox/DPIPred; pH l0, Dehidroasc/Asc. 44. Dada la siguiente reacción a pH 7: acetaldehido + H2O + NAD+ <---> acetato + NADH + 2H+ 9 Calcular G'o a) a pH 7; b) a pH 5; c) ¿Qué variación experimentará la K'eq de la reacción cuando el pH del medio desciende desde 7 hasta 5? pKa del acetato = 5; pKa del NADH2+ = 4. E'o (pH 7) acetato/acetaldehido = -0,6 V. E'o (pH 7) NAD+/NADH = -0,32 V. Sol. a) -53,8 kJ/mol; b) -30,4 kJ/mol; c) Se hace 104 veces menor. 45. El ácido ascórbico puede determinarse utilizando el indicador redox 2,6-diclorofenol-indofenol. a) escribir la reacción que tiene lugar y calcular E'o y K'eq a pH 7,0 y 30°C. b) La determinación anterior se realiza normalmente a pH 5. ¿Cómo cambia la constante de equilibrio? E'o (pH 7) dehidroascorbato/ascorbato = +0,06 V. E'o (pH 7) DPIP/DPIPH2 = +0,22 V. Los pKa del ascórbico son 4 y 11, pKa del DPIPH2 = 10. Sol. E'o = +0,16 V; K'eq = 1,95 x 105. b) Se hace 100 veces mayor. 46. Supongamos la reacción siguiente, que tiene lugar por intercambio de 1 electrón entre dos pares redox, a pH 5 y 30°C: AH + B <——> A + BH E'o (pH 5) del par A/AH es igual a 0,2 V, y el del par B/BH a -0,1 V. Sabiendo que en el ensayo la relación [B]/[BH] es de 10 y que [A]= 10-5 M, a) Calcular la concentración mínima de AH necesaria para que la reacción tenga lugar hacia la derecha de forma espontánea, b) Escribir la reacción que tendría lugar a pH 9 manteniendo AH y B como reactivos, c) ¿Cuál sería el cambio de energía libre estándar aparente y la constante de equilibrio aparente a este pH? Los valores de pKa para AH y BH son 13 y 7 respectivamente. Sol. [AH] = 0,1 M; b) AH + B <--> A + B- + H+; c) G'o (pH 9) = 17,1 kJ/mol, K'eq (pH 9) = 1,12 x 10-3. 47. Dados los siguientes pares redox: Acetato/Acetaldehido E'o (pH 7,0) = -0,6 V 2H+ + Oxalacetato/Malato E'o (pH 7,0) = -0,17 V pKa (ácido acético) = 5 Calcular: a) G' a pH 3,0 cuando la relación [acetaldehido]/[acetato] = 5 y [malato]/[oxalacetato] = 10; b) decir qué compuesto se oxida y cuál se reduce a pH 8,0, con la misma relación que en el apartado a; c) calcular la K'eq a pH 11 de la reacción redox. Sol. a) G' = -69,6 kJ/mol; b) El acetaldehido se oxida y el oxalacetato se reduce; c) K'eq = 3,1 x 1018. 48. Calcular G'o y K’eq a pH 7,0 y a pH 3,0 de la siguiente reacción: Acetaldehido + H2O + NAD+ <--> Acetato + NADH + 2H+ sabiendo que E'o (pH 7) acetato/acetaldehido = -0,6 V, E'o (pH 7) NAD+/NADH + H+ = -0,32 V y que el NADH2+ tiene un pKa = 4 y el ácido acético un pKa = 5. Sol. a) G'o = -53,9 kJ/mol; K'eq = 2,6 x 109 10 b) G'o (pH 3) = -25,5 kJ/mol; K'eq = 3 x 104 49. La reacción catalizada por la lactato deshidrogenasa, Piruvato + NADH + H+ <---> Lactato + NAD+ transcurre con una variación de energía libre G' = -43,7 kJ/mol a pH 7,0 y 30°C, cuando la concentración de piruvato es 3 mM, la de lactato 0,2 mM y la relación [NADH]/[NAD+] vale 100. Calcular: a) La constante de equilibrio aparente de la reacción, K'eq. b) El potencial redox normal del par lactato/piruvato al citado pH. Dato: E'o = -0,32 V para el par NAD+/NADH. Sol. K'eq = 2,1 x 104; b) E'o = -0,19 V. 50. A pH 3, 7 y 10 determinar el E', el G' y el sentido de la reacción (indicándola por escrito) cuando mezclamos NADH2+ 0,1 M, NAD+ 1 M, ascorbato 0,01 M y dehidroascorbato 0,1 M. pKa (NADH2+) = 4, pKa1 (ascórbico) = 4, pKa2 (ascórbico) = 8. E'o a pH 7, 30°C ---------------dehidroascor + 2H+ + 2e- ---> ascor + H+ NAD+ + 2H+ + 2e- --—> NADH + H+ 0,06 V -0,32 V A pH 7, ¿cuál debería ser la eficiencia en la conservación de la energía para que se pudiese sintetizar 1 mol de ATP? G'o (pH 7) para la síntesis de ATP = 33,4 kJ/mol. Sol. pH 3: G' = -73,15 kJ/mol, E' = 0,38 V; pH 7, igual que pH 3; pH 10: G' = -84,8 kJ/mol; E'= 0,44 V. Eficiencia = 45,7% 51. Considérense los pares redox: FAD + 2H+ + 2 e- -—> FADH2 cit a3–Fe3+ + le- ---> cit a3-Fe2+ pKa1 (FADH2) = 4, pKa2 (FADH2) = 6 Sabiendo que la reducción del citocromo por FADH2 libera 70,2 kJ/mol de citocromo en condiciones estándar a pH = 7 y 25°C. Calcular: a) E'o (pH 7) del par FAD/FADH2 , E'o (cit Fe3+ /cit Fe2+) = 0,55 V b) E' de ambos pares a pH = 3, cuando [FAD]/[FADH2] = 20 y [cit Fe3+]/[cit Fe2+] = 0,1. c) Suponiendo que la reacción redox se acopla a la síntesis de ATP con una eficiencia del 65%, ¿cuántos moles de ATP se formarían por mol de FADH2 si la síntesis de ATP ocurre en condiciones estándar y la reacción redox en las condiciones expresadas en el apartado anterior? G'o (sínt. ATP) = 31,8 kJ/mol Sol. a) E'o (pH 7) = -0,19 V. b) E'(pH 3)FAD/FADH2 = -0,024 V; E'(pH 3) Cit Fe3+ /cit Fe2+ = 0,52 V. c) 2 moles ATP/mol FADH2 11 52. Considérense los pares redox cuyas reacciones se indican a continuación: A + 2e- + 2H+ --> AH2 Eo = -0,4 V B + 2e- -—> B2EO = -0,6 V La forma AH2 tiene dos pKa con valores 5 y 9, respectivamente. a) Escribe la reacción de reducción de A por B a pH 7 y calcula su E'o b) Calcula cuál ha de ser el valor mínimo de la relación [B=]/[B] para que la reacción sea favorable a 25°C y pH 7 cuando la relación de las formas oxidada y reducida del otro par es igual a 1. c) En presencia de una concentración de ADP igual a 1 mM, calcula cuál ha de ser la relación [ATP]/[Pi] para que, considerando una eficiencia del 50% en la conservación de la energía, la hidrólisis de 1 mol de ATP permita la reducción de 1 mol de A en condiciones estándar a 25°C y pH 7. G'o para la hidrólisis del ATP a pH 7 = -32,2 kJ/mol Sol. a) A + B= + H+ <---> AH- + B; E'o = -0,16 V b) 1,7 x 105 c) 59,64 53. La constante aparente de equilibrio (K'eq) a 25°C y pH 7 para la siguiente reacción: X + NADH <——> X= + NAD+ + H+ es 1,08 x 104. Calcular: a) El potencial normal del par redox X/X= en dichas condiciones. b) La relación de concentraciones X/X= para que, a pH 9 y con una relación [NAD+]/[NADH] =10, la diferencia de potencial no estándar sea igual a +0,09 V. c) La eficacia en la conservación de energía, sabiendo que en las condiciones del apartado b) la reacción permite la síntesis de 1 mol de ATP por cada 3 moles de X cuando se parte de unas concentraciones de ATP, ADP y Pi de 5, 1, y 10 mM, respectivamente. Datos: G'o (hidrólisis ATP) = -31,35 kJ/mol E'o (NAD+/NADH+) (pH 7) = -0,32 V pKa (NADH2+) = 4 Sol. a) -0,20 V; b) 0,01; c) 90% 54. A 25°C y pH 7 la constante de equilibrio aparente (K'eq) para la reacción: Piruvato + NADH + H+ <---> Lactato + NAD+ es 2 x 104. Calcular: a) El potencial normal (E'o) del par lactato/piruvato, sabiendo que el par NAD+/NADH posee un potencial normal de -0,32 V. b) La relación de concentraciones entre el piruvato y el lactato para que, con una relación [NADH]/[NAD+] = 25, la diferencia de potencial aparente (E') sea igual a 0,325 V. c) El cambio de energía libre standar (G'o) para la síntesis de ATP, sabiendo que si se parte de unas concentraciones de ATP, ADP y Pi de 1, 5 y 3 mM, respectivamente, y con una eficiencia del 60% se sintetizó un mol de ATP por mol de piruvato en las condiciones del apartado b). Sol. a) -0,192 V; b) [lactato]/[piruvato] = 4,8 x 10-6; c) G'o (ATP) = 27,2 kJ/mol. 12 55. Calcular a pH 0, 7 y 11 E' y G', asi como el sentido de la reacción que tiene lugar (indicando ésta por escrito), cuando se mezcla: reactivo concentración + NADH2 NAD+ Ascorbato Dehidroascorbato volumen 0,6 M 0,3 M 0,03 M 0,6 M 50 100 100 50 ml ml ml ml Sabiendo que: E'o (pH 7 y 30°C) Dehidroascorbato + 2H+ + 2e- ---> ascorbato- + H+ 0,06 V NAD+ + 2H+ + 2e- --—> NADH + H+ -0,32 V pKa (NADH2+) = 4; pKa1 (ascorbato) = 4; pKa2 (ascorbato) = 8 Sol.: pH 0 y pH 7: G' = -79 kJ/mol; E' = 0,41 V pH = 11: G' = -96,1 kJ/mol; E' = 0,5 V 56. Determinada reacción: AH2 + 2B + ADP + Pi <--—> 2BH + A + ATP transcurre a 30°C con un G'o (pH 4) = -6,27 kJ/mol de B. Esta reacción resulta del acoplamiento de otras dos, una de óxido-reducción y otra de fosforilación: 1) AH2 + 2B <——> 2BH + A 2) ADP + Pi <——> ATP La K'eq para la hidrólisis del ATP es 6 x 105 M (para cualquier pH). PKa1 (AH2) = 5; pKa2 (AH2) = 6; pKa (BH) = 8. E’o (pH 4) (A/AH2) = 0,06 V. a) Determinar el potencial normal del par BH/B a pH 4. b) ¿Es viable la reacción acoplada a pH 7? c) Si la relación [AH2]/[A] = 104, a pH 9, ¿cuál debe ser la relación mínima [B]/[BH] para que la reacción global esté favorecida? Sol. a) E'o (pH 4) = 0,3 V; b) No es viable; c) [B]/[BH] = 0,26 57. El jugo gástrico en el hombre tiene pH 1. Sin embargo el pH interno de las células que segregan dicho jugo es 7. Calcular el G' para el transporte de H+ en contra de dicho gradiente a 37°C. Sol. G' = 35,8 kJ/mol. 58. Calcular el máximo número de iones Na+ que pueden ser fuera de una célula al hidrolizarse una molécula de ATP en Na+ que opera independientemente de la presencia de iones que la concentración externa de Na+ es igual a 140 mM y la interna es de 10 mM. G'=-41,8 kJ/mol para la hidrólisis celulares Tª = 37°C. Sol. 6 iones Na+/ATP hidrolizado. 13 del ATP bajo transportados una bomba de K+, asumiendo concentración condiciones intra- 59. Calcular G' para el transporte de iones K+ hacia el interior de una célula nerviosa asumiendo una concentración de K+ externa de 7 mM e interna de 140 mM. El potencial eléctrico de la membrana de la célula nerviosa es de -60 mV a 37°C. Sol. G' = 2 kJ/mol de K+ 60. La concentración de Cl- en la sangre es 0,10 M y en la orina es de 0,16 M. a) Calcular la energía gastada por el riñón en pasar el Cl- del plasma a la orina, b) ¿Cuántos iones Cl- se pueden transportar por mol de ATP hidrolizado? Sol. a) G' = 1,2 kJ/mol; b) 27 iones Cl-/ATP 61. En la membrana de E. coli se genera un pH de 1 unidad (interior mayor que exterior) y un potencial de -120 mV (interior negativo). Usando esto se cotransportan H+ y β-galactósidos. a) ¿qué energía o fuerza protón motriz hay disponible? b) ¿A qué gradiente de concentración puede E. Coli acumular β-galactósidos? Sol. a) p = -179,5 mV ó G = -17,3 kJ/mol; b) [int]/[ext] = 1043 62. Calcular el pH a través de la membrana interna de la mitocondria que es necesario para dirigir la reacción de una ATPasa en la dirección de la síntesis de ATP en estado estacionario a 27°C y con [ATP] =10-6 M; [ADP] = 10-3 M y [Pi]= 10-2 M. Datos: G'o (síntesis de ATP) = 32,2 kJ/mol; ψ = -145 mV. Sol. pH = 2,305. 63. La sangre contiene 0,1 M de iones Cl-. El cerebro presenta una concentración de 0,04 M para dicho ión. Calcular: a) G' para el transporte de Cl- desde la sangre al cerebro, b) la energía que gasta el cerebro transportando Cl- a la sangre en contra de gradiente. Dato: Tª 37°C Sol. a) G' = -2,3 kJ/mol; b) G' = 2,3 kJ/mol. 64. Neurospora crassa presenta en determinadas condiciones un potencial de membrana igual a 0,3 V (interior negativo). ¿Cuál es el G' para el transporte de Ca2+ hacia dentro del micelio? Asumir que [Ca2+]in/[Ca2+]ext se mantiene constante e igual a 1 por acción de una ATPasa ¿A qué razón de oncentraciones puede entrar un aminoácido cuyo transporte se acople al flujo de Ca2+ hacia el interior? Sol. G' = -57,8 kJ/mol; [aa]int/[aa]ext = 1,2 x 1010 65. La conversión de citrato en el ciclo de Krebs se produce por una reacción de deshidratación/rehidratación siendo el aconitato un intermediario. La aconitasa cataliza la conversión de citrato en aconitato y el aconitato en isocitrato. Una mezcla en equilibrio de citrato, aconitato e isocitrato presenta alrededor de 90, 4 y 6% de los 3 14 ácidos, respectivamente, a) ¿Cuál es la K'eq y el G'o (a 25°C) para el segundo paso aconitato-isocitrato)? b) ¿y para todo el proceso? Sol. a) K'eq = 1,5; G'o = -1 kJ/mol; b) K'eq = 0,066; G'o = 6,7 kJ/mol. 66. Las plantas superiores y los animales almacenan más energía en forma de grasas que de carbohidratos. Los cálculos que se proponen a continuación ayudarán a saber por qué. a) Considerar la glucosa (C6H12O6; p.m. = 180 Da) como fuente de energía y calcular los moles de ATP generados por la oxidación completa de 1 g de glucosa (G'o = -2.842,4 kJ/mol). Asumiendo que el valor de G'o para la hidrólisis de ATP bajo condiciones fisiológicas es -50,2 kJ/mol ¿cuánta energía se puede obtener de 1 g de glucosa? b) Considera la utilización de palmitato (C16H33O2; p.m. = 256 Da) y calcular los moles de ATP generados de la oxidación completa de 1 g de palmitato. La oxidación de palmitato rinde 130 moles de ATP/mol de palmitato. Sol. a) 15,8 kJ/g de glucosa; 0,31 moles ATP/g glucosa b) 0,507 moles ATP/g palmitato. 67. La conversión de glucosa en ácido láctico tiene un G'o de -217,4 kJ/mol. En una célula anaeróbica, esta conversión está acoplada a la síntesis de 2 moles de ATP por mol de glucosa, a) calcular G'o de la reacción global acoplada, b) Calcular la eficiencia de la conversión de energía en una célula anaeróbica. c) Con la misma eficiencia, ¿cuántos moles de ATP por mol de glucosa podría obtener un organismo aerobio en el que la glucosa se oxida completamente a CO2 y H2O (G'o = -2.867,5 kJ/mol)? d) Calcular el G'o para la reacción global acoplada a la síntesis de ATP. G'o (hidrólisis ATP) = -32,2 kJ/mol. Sol. a) G'o = -153 kJ/mol; b) 29,6%; c) 26 moles de ATP ; d) G'o= 2.030,6 kJ/mol. 68. a) Calcular G'o para la oxidación completa del ácido láctico a CO2 y H2O con los datos que se dan. b) ¿Cuántos moles de ATP se producirían en el proceso con un rendimiento del 40%? Glucosa <——> 2 láctico G'o = -217,4 kJ/mol glucosa + 6O2 <---> 6CO2 +6H2O G'o = -2.867,5 kJ/mol G'o (hidrólisis ATP) = -32,2 kJ/mol Sol. a) G'o = -1.325 kJ/mol; b) 16 moles de ATP/mol ac. láctico. 69. a) Escribir la reacción que se da en la respiración de NADH en una bacteria que usa SO4= como aceptor de electrones. b) ¿Cuál es la diferencia de potencial (E'o) que utiliza dicho organismo? E'o (NAD+/NADH) = -0,32 V; E'o (SO42-/SO32-) = +0,48 V c) En condiciones fisiológicas se requieren 62,7 kJ para la síntesis de un mol de ATP. ¿Cuál es el número máximo de moléculas de ATP que se podrían sintetizar por cada par de e- cedidos desde el NADH al SO4=? ¿Y en una bacteria que use O2 como aceptor de e-? 15 E'o(O2/H2O) = 0,82 V Sol. a) NADH + H+ + SO4= <---> NAD+ + SO3= + H2O; b) 0,8 V; c) 2 ATP; d) 3 ATP. 70. Puesto que el transporte de e- está acoplado a la síntesis de ATP, sería posible invertir dicho transporte utilizando la energía liberada en la hidrólisis del ATP. Considerar una bacteria a 25°C que puede transferir e- desde el succinato hasta el NAD+ mediante un flujo invertido de e-: succinato + NAD+ <---> fumarato + NADH + H+ Si la concentración intracelular de Pi es constante e igual a 0,01 M, calcular la razón [ATP]/[ADP] requerida para mantener en estado estacionario la razón [NADH]/[succinato] igual a 0,01. Asumir que las concentraciones de fumarato y NAD+ son iguales. E'o (fumarato/succinato) = 0,03 V; E'o (NAD+/NADH) = -0,32 V G'o (hidrólisis ATP) = -32,6 kJ/mol Sol. [ATP]/[ADP] = 139,3. 71. Calcular el pH a través de la membrana interna de la mitocondria que se requiere a 25°C para dirigir la síntesis de ATP en condiciones estándar. G'o (ATP) = 32,2 kJ/mol. Dato: Aψ = -145 mV. Sol. pH = 3,2 72. Calcular la energía por einstein de fotones de λ igual a a) 400 nm y b) 600 nm. Sol. a) 299 kJ/einstein; b) 199,5 kJ/einstein 73. a) ¿Cuántos moles de ATP podría sintetizar al 100% de eficiencia un organismo fotosintético que captura 1 einstein de luz roja de 700 nm? b) ¿Cuántas moléculas por fotón? c) Calcular la eficiencia real si 1 mol de ATP se forma por la excitación de 2 equivalentes de e- por luz roja. Dato: G'o (síntesis ATP) = +32,2 kJ/mol Sol. a) 5 moles ATP/einstein; b) 5 ATP/fotón; c) 9,4% 74. La hidrólisis de asparragina a aspartato y NH4* tiene un G'o de -14,2 kJ/mol. La hidrólisis del ATP a AMP + PPi tiene un G'o de -33,4 kJ/mol. a) Calcular G'o para la biosíntesis de asn según la reacción: asp + ATP + NH4+ <---> asn + PPi + AMP b) La reacción anterior tiene lugar en 2 pasos: 1) asp + ATP <---> β-aspartiladenilato + PPi 2) β-aspartiladenilato + NH4+ <---> asn + AMP El G'o para la hidrólisis del β-aspartiladenilato es de -41,8 kJ/mol. Calcular el G'o de cada uno de los pasos implicados en la síntesis de asparragina. Sol. a) -19,2 kJ/mol; b) 8,4 kJ/mol y -27,6 kJ/mol. 16 75. Las halobacterias viven en ambientes salinos gracias a que presentan un translocador fotodependiente de protones, la bacteriorrodopsina, que extrae un protón del interior celular cada vez que absorbe un fotón de 568 nm. El gradiente electroquímico de protones generado por dicha proteina es aprovechado por un antiportador Na+-H+, que extrae iones sodio. a) Calcular la eficiencia de la conservación de energía en el transporte de H+ mediado por la bacteriorrodopsina, si la fuerza protónmotriz (p) es de 200 mV (interior negativo). b) Calcular la concentración máxima de Na+ en el medio que puede soportar una halobacteria en dichas condiciones, sabiendo que la concentración intracelular es 50 mM y que el pH interior es 9 y el exterior 7,8. c) En estas bacterias, el paso final de la cadena transportadora de electrones respiratoria consiste en la reducción del oxígeno a H2O en una reacción redox en la que interviene como donador de electrones el citocromo c: 4 cit cred + O2 + 4H+ <---> 4 cit cox + 2H2O Los potenciales estándar a pH 7 de los pares redox implicados en la reacción son: E’o (cit cox + 1e-/cit cred) = 0,25 V E’o (O2 + 4H+ + 4e-/2H2O) = 0,816 V Calcular la eficiencia en la conservación de la energía a pH 9 si se acopla la síntesis de dos moléculas de ATP a la reacción anterior, considerando que las concentraciones de ATP, ADP y Pi son 2 mM, 0,05 mM y 10 mM, respectivamente. G’o (síntesis ATP) = 32,2 kJ/mol-1. Sol. a) 9,15%; b) 0,79 M; c) 48,5% 17