PAPEL DEL ÁREA PREÓPTICA MEDIAL /HIPOTÁLAMO ANTERIOR EN LA DISCRIMINACIÓN DE ESTÍMULOS OLFATORIOS SEXUALMENTE RELEVANTES EN LAS RATAS MACHO Orduña Gutiérrez, E.; Mac Gregor J. P., Paredes R. G. Facultad de Psicología Universidad Autónoma de Querétaro; Instituto de Neurobiología-UNAM RESUMEN Se realizó un análisis sobre la preferencia olfatoria de los estímulos sexualmente relevantes en ratas macho para determinar el papel de la experiencia sexual en dicha preferencia. Se evaluaron a dos grupos de ratas macho, a un grupo de ratas sexualmente inexpertos (n=12) y otro grupo de ratas sexualmente expertos (n=17) para posteriormente proceder a las lesión neurotóxica en el área preóptica medial (APM/HA). A cada grupo de ratas macho se le realizaron pruebas de discriminación de olores sexualmente relevantes y de atractividad hacia un incentivo sexualmente relevante, esto con la finalidad de evaluar la importancia de la discriminación por medio de la olfación en ratas macho. INTRODUCCIÓN Las investigaciones de los últimos años sugieren fuertemente que el hipotálamo participa en forma fundamental en diferentes tipos de motivaciones, inicialmente se le ha definido como centro de motivaciones básicas fundamentales como el apetito, la conducta sexual, la conducta agresiva o la conducta relacionada con la regulación de la temperatura. La importancia de la experiencia sexual dentro de las especies animales cobra relevancia ya que mediante esta es como se posibilita la reproducción de las mismas especies, como ya se sabe es por la cópula como se lleva el seguimiento de las especies. Por lo anterior la importancia del área preóptica medial consiste en que si esa área es lesionada inhibe la cópula, y en las ratas machos la lesión de la región preóptica medial disminuye la conducta copulatoria. El estudio sobre la importancia de olores sexualmente relevantes es de gran utilidad para conocer el funcionamiento de los diferentes procesos neurológicos que se llevan a cabo, en especifico del área preóptica medial. Mediante diferentes métodos (estimulando, lesionando, y atractividad hacia un incentivo) se puede identificar el papel que juega el área preóptica medial en la discriminación olfatoria en ratas macho. Una vez que se les realizan las pruebas a los dos grupos de ratas, se procede a la lesión neurotóxica. MATERIALES Y MÉTODOS Para la Prueba de Conducta Sexual, que solo se le realiza al grupo de machos que se necesitan como expertos, se cumplen con 3 pruebas de conducta sexual en donde se requiere que se produzca la eyaculación, y durante las 3 exposiciones se recaba la latencia de monta, el número de montas, la latencia de intromisión, el número de intromisiones, la latencia de eyaculación y el intervalo posteyaculatorio; esta prueba se realiza en una caja de acrílico (42 cm. de ancho, 62 cm. de largo y 29cm. de altura) con una cama aserrín, durante un tiempo máximo de 1 hora. Primero dentro de la caja de acrílico se pone al macho y posteriormente a la hembra ovarectomizada y tratada hormonalmente. Para realizar la Prueba de Discriminación de olores se necesita una caja de acrílico (24 cm. de ancho, 33 cm. de largo y 14 cm. de altura)con aserrín y una (tapa con rejilla) para colocar sobre de ésta el plato para pesar unido al filtro con las diferentes sustancias a utilizar, una vez puesto al sujeto en dicha caja se le presentan dos exposiciones de agua (10µl ) por 2 minutos con un intervalo de un minuto entre cada una, posterior a esto siguen 3 exposiciones del resto de las sustancias (10µl ) por 2 minutos con intervalo de un minuto entre cada una de ellas; ya sea orina de macho experto versus orina de hembra en estro u orina de hembra en estro versus orina de hembra en anestro, y como olores control se utilizó menta versus acetato de amilo. Para la medida exacta de las respectivas sustancias se utilizan puntas de micropipeta y con la micropipetas se desemboca la cantidad indicada en el filtro y se hace la medición de la frecuencia con la que la rata se acerca a oler el estimulo expuesto y el tiempo que pasa olfateándolo, este procedimiento se realiza en un cuarto con luz baja. En la Prueba de Preferencia de lugar condicionado: primeramente se realiza una serie de 3 habituaciones en las cajas de acrílico (50 cm. de ancho, 99 cm. de largo y 16 cm. de altura) durante 10 minutos para que cuando se lleve a cabo la prueba el sujeto no se distraiga en investigar en la caja y realice la prueba correctamente, esta prueba se lleva a cabo en un cuarto donde en la parte superior se encuentra una cámara para monitorear los movimientos de la rata a observar, la caja de acrílico tiene dos subcajas con orificios (15 cm. de ancho, 25 cm. de largo y 25 de altura) a los lados en donde se colocan los estímulos (macho experto vs. hembra en estro) y posteriormente se toman los registros del programa ethovision. RESULTADOS Por cuestiones de tiempo en el presente verano no se alcanzo a realizar las lesiones correspondientes en el área preóptica medial, por lo anterior solo se presentaran graficas con datos de las pruebas de pre-lesión En la Gráfica 1 se observa como tanto el número de montas como el número de intromisiones va en descenso en relación al ascenso de las pruebas, esta prueba es con la finalidad de obtener machos sexualmente expertos. Gráfica 1 prueba1 prueba2 prueba3 25 Y Axis Title 20 15 10 5 0 no montas no intromisiones X Axis Title En la Gráfica 2 se observa que el comportamiento olfativo de ambos grupos de ratas macho presenta una mayor disposición hacia la muestra de orina de hembras en estro. Gráfica 2 Expertos Inexpertos 24 22 20 18 16 Y Axis Title 14 12 10 8 6 4 2 0 -2 Neutro Neutro Macho Macho Macho X Axis Title Estro Estro Estro -- Para la siguiente gráfica queda evidenciada de manera evidente la diferencia entre ambos estímulos, los dos grupos de ratas presentan un mayor interés por la orina de hembra en estro. Gráfica 3 Expertos Inexpertos 16 14 12 Y Axis Title 10 8 6 4 2 0 -- Neutro Neutro Estro Estro Estro Anestro Anestro Anestro -- X Axis Title En esta última gráfica se le muestran a ambos grupos de ratas olores control. Gráfica 4 Expertos Inexpertos 22 20 18 16 Y Axis Title 14 12 10 8 6 4 2 0 -2 -- Neutro Neutro Menta Menta Menta AcetatoAcetato amilo de Acetato amilo de amilo-- X Axis Title CONCLUSIONES Se necesita un mayor intervalo de tiempo para poder realizar de manera completa la investigación, pero de entrada en esta primera etapa del proyecto se puede observar la diferencia entre los dos grupos de ratas con los que se trabajaron. En el grupo de los machos sexualmente expertos la olfación de olores sexualmente relevantes es mas significativa que en el grupo de machos inexpertos REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Baum M. y Keverne E., “Sex difference in attraction thresholds for volatile odors from male and estrous female mouse urine”, Hormones and behavior, 2001 Brennan P. y Keverne E., “Something in the air? New insights into mammalian pheromones”, Current biology, 2004 Pankevich D., Baum M. and Cherry J., “Olfactory sex discrimination persists, whereas the preference for urinary odorants from estrous female disappears in male mice after vomeronasal organ removal”, The journal of neuroscience, 2004 Portillo W. y Paredes R., “Control neural de la conducta masculina”, Centro de Neurobiología UNAM, 1998