Reguladores de crecimiento para estimular la germinación en semilla de lechuga y su efecto en el almacenamiento Plant growth regulators to stimulation seed germination of lettuce and its effects in storage Mario Ernesto Vázquez Badillo1, Alma Patricia García Villanueva2 y Víctor Manuel Zamora Villa3 Resumen Los objetivos de esta investigación fueron determinar el efecto y dosis optimas de cuatro fitorreguladores en la germinación de semillas de lechuga, así como el efecto de estos después de un periodo de almacenamiento. Por lo anterior, se utilizaron ácido fúlvico y ácidos giberelicos en presentación comercial de Biozyme PP, Biozyme TS y GBM-044, en dosis baja, media y alta por un periodo de inmersión de diez minutos. Se trabajo con semillas de lechuga, estas se evaluaron antes y después de un periodo de almacenamiento de tres meses a 10 °C. Los parámetros a evaluar fueron el porcentaje de germinación (en sustrato de papel), plántulas normales, longitud de plúmula, longitud de radícula y peso seco de plántula. Los mejores resultados de germinación se presentaron después del periodo de almacenamiento. En semilla de lechuga se tuvieron incrementos en germinación del diez por ciento, siendo el biozyme PP en sus dosis baja y biozyme TS en sus tres dosis los productos de mejor respuesta. El ácido fúlvico también manifestó un efecto estimulante en la germinación de la semilla de lechuga. Palabras Clave: Lechuga, germinación, hormonas, giberelinas, ácido fúlvico, almacenamiento Abstract The investigation was made in order to know the effect of products based on gibberellin (Biozyme TS, Biozyme PP, y GBM-044) and fulvic acid at different doses (high, medium and low) on the seed germination of lettuce. The treatments were also applied to the same seed and stored for three months at 10ºC. The germination percentage, plumule and radicule longitude, and seedling dry weight were the evaluated parameters. For germination, the best effects of the treatments were observed after the storing period. In lettuce seeds, germination was increased ten percent, being Biozyme PP in low doses and Biozyme TS in the three doses, the products with the best performance. Fulvic acid has stimulating effect on seed germination. 1 Maestro investigador del Centro de Capacitación y Desarrollo de Tecnología de Semillas. Depto. Fitomejoramiento. UAAAN. Saltillo, Coah. E-mail: mario59ernesto@hotmail.com. 2 Tesista de la Maestría en Tecnología de Semillas. UAAAN. Saltillo, Coah. 358 Key Words: Lettuce, germination, Hormone, Gibberellins, Fulvic acid, storage Introducción Dadas las condiciones geográficas y topográficas con las que cuenta nuestro país, la producción de hortalizas puede realizarse durante todo el año, generando con ello una gran demanda de mano de obra y además una gran fuente de divisas. Así, la superficie tan extensa destinada a su producción, como la demanda de las mismas requiere de grandes cantidades de semillas de alta calidad fisiológica que permitan asegurar un buen rendimiento. Sin embargo, uno de los problemas primordiales en la calidad de las semillas es el deterioro, el cual es un proceso irreversible (Anderson, 1973), que demerita la calidad fisiológica al presentar un porcentaje bajo de germinación (Miranda, 1984 y Abul Baki y Anderson, 1972), principalmente en aquellas que no tienen un manejo adecuado de postcosecha, lo cual ocasiona que se tenga poca emergencia y por consecuencia un bajo establecimiento de plántulas en campo, generando así una reducción en los rendimientos por unidad de superficie. Una alternativa en el empleo de semilla con deterioro incipiente es el uso de productos hormonales para eficientar el potencial fisiológico de la semilla y así evitar los problemas mencionados anteriormente, en donde los fitorreguladores sintéticos aplicados a semillas han sido utilizados principalmente para romper la latencia de algunas especies ((Weaever,1996), así como activar y/o acelerar el proceso de germinación de las mismas (Bidwell, 1996), estos productos son una buena alternativa para promover la germinación de la semilla (Agwah et al., (1994) en virtud de que se han tenido problemas en la germinación oportuna debido a diversos factores ambientales, de nutrición y de sustancias orgánicas presentes en bajas cantidades. Dentro de las hormonas utilizadas se encuentran las giberelinas, citocininas y auxinas. Las giberelinas se pueden definir como un compuesto que estimula la división o prolongación celular, o ambas cosas al igual que las auxinas. Por su parte las citoquininas promueven la inducción de brotes. Por otro lado el ácido fúlvico estimula la producción y elongación de raíces y el crecimiento de tallos, la estimulación de la germinación, así como la capacidad de retener y poner a disposición de la planta compuestos orgánicos e inorgánicos (Sparks, 2000). Existe una gran cantidad de resultados de investigaciones relacionadas con la calidad de las semillas, pero la utilización de productos químicos que actúan como bioestimulantes han sido poco estudiados en semillas, sobre todo en cultivos hortícolas, es por ello que el presente trabajo pretende determinar el efecto y las dosis optimas de cuatro fitorreguladores en la germinación de semillas de lechuga antes y después de un periodo de almacenamiento. Metodología experimental El presente trabajo de investigación se llevó acabo en el Laboratorio de Ensayos de Semillas del Centro de Capacitación y Desarrollo de Tecnología de Semillas. Se utilizó semilla de Lechuga (Lactuca sativa L.), la cual fue producida durante el ciclo otoño-invierno del año 1999 y donadas por la compañía semillera Petoseed. La semilla previamente fue sometida a pruebas fisiológicas para 359 conocer su calidad inicial antes de iniciar el proceso de evaluación, las cuales se considero de calidad aceptable. Los tratamientos utilizados fueron cuatro productos hormonales, los cuales están formados a base de hormonas de crecimiento que favorecen el desarrollo de la germinación, estos productos se evaluaron a diferentes dosis (baja, media, alta), los cuales sumaron un total de 12 tratamientos más un testigo, con tres repeticiones cada uno, teniendo un total de 39 unidades experimentales. Los cuatro productos a evaluar son el Biozyme TS (50, 100 y 150 cc/1500 ml de agua/100 kg de semilla), Biozyme PP (250, 500 y 1000 gr/50 kg de semilla), ácido fúlvico (50, 100 y 150 cc/500 ml agua/100 kg de semilla) y GBM-044 (300, 600 y 1200 ppm). Cabe señalar que la semilla tratada a base de Biozyme TS, ácido fulvico y GBM-044 fue mediante la inmersión de la semilla en dichas soluciones por un tiempo de diez minutos ya que estos vienen en presentación acuosa a diferencia del Biozyme PP quien viene en presentación de polvo. Posteriormente de que la semilla fue tratada se procedió a secar y realizar la prueba de germinación. La prueba de almacenamiento consistió en almacenar las semillas con los bioestimulantes aplicados (dosis ya descritas) por un periodo de tres meses y a una temperatura de 10 °C, después de este tiempo se realizaron las pruebas fisiológicas. Los parámetros a evaluar fueron la germinación estándar donde se realizaron cuatro repeticiones de 25 semillas sembradas en toallas de papel anchor (hortalizas) y enrolladas para formar “tacos”. Posteriormente se colocaron en la cámara de germinación a una temperatura de 25 °C, registrándose las plántulas anormales, normales y semillas sin germinar, llevándose acabo un solo conteo al termino de los días máximos de tiempo de germinación establecidos por la ISTA (1996). Así mismo, las plántulas utilizadas para determinar la longitud de plúmula y raíz provinieron de la prueba de germinación estándar midiéndose en cm. Para el peso seco de plántulas se utilizaron las plántulas de las pruebas de germinación estándar y longitud de plúmula y se colocaron en bolsas de papel estraza perforadas, se sometieron a un proceso de secado a 65°C por 24 horas, el resultado se expresó en miligramos por planta. El análisis estadístico para los tratamientos evaluados en este experimento se implemento un diseño completamente al azar y se analizo bajo él mismo, realizándose una comparación de medias mediante la prueba de diferencia mínima significativa (DMS) al nivel de 0.05 de probabilidad. Resultados y Discusión Antes del periodo de almacenamiento de la semilla, sólo se observó una alta significancia en la longitud de radícula al tercero y quinto día de evaluación. Por lo anterior, en la comparación de medias realizada a la longitud de radícula al tercer y quinto día de evaluación (Cuadro 1), mostró al Biozyme PP en su dosis media como la longitud mayor (4.96 y 6.01 cm), al igual que al testigo evaluado al tercer día (4.44 cm). Sin embargo, el Biozyme TS en su dosis baja evaluado al tercero y quinto día presentaron las menores longitudes de radícula. Después del período de almacenamiento, la longitud de plúmula al tercer día de evaluación, 360 así como en peso seco de plántula mostraron diferencias significativas; mientras que la longitud de radículas evaluadas al tercer día presentó diferencias altamente significativas. En la longitud de plúmula de la semilla de lechuga evaluada al tercer día, el Biozyme PP en sus dosis baja reportó la mayor longitud (1.70 cm), mientras que en la mayoría de los tratamientos resultaron ser estadísticamente iguales; en cambio, el Biozyme PP en su dosis alta registró la menor longitud con 1.11cm. Estos resultados señalan que los productos evaluados superaron al testigo entre 23 al 29% en la manifestación de la plúmula, lo cual debe de repercutir estos porcentajes en mayor capacidad germinativa, esto se refleja en el Biozyme TS en su dosis alta y Biozyme PP en su dosis baja con porcentajes de germinación de 92.6, seguidas de Biozyme TS y ácido fúlvico en sus dosis bajas con 90.6%, siendo estos estadísticamente iguales, en cambio, el GBM-044 en su dosis media registró el porcentaje de germinación más bajo con 71.3. Con estos resultados se observó que el Biozyme TS en términos medios muestra un 10% mas de germinación en relación al testigo, seguidos del ácido fúlvico (6.7%), Biozyme PP (6.0%) y GBM-044 (5.0%). Lo anterior confirma que al tener mayor porcentaje de germinación con estos tratamientos se puede obtener mayor incremento en la plúmula, trayendo como consecuencia que la aplicación de estos productos sobre la semilla ayuda a promover la germinación evaluada después del periodo de almacenamiento (Figura 1). Germinación (%) 100 80 Biozyme TS 60 Biozyme PP Acido Fulvico 40 GBM-044 Testigo 20 0 Baja Media Alta Dosis Figura 1. Germinación en semilla de lechuga después del periodo de almacenamiento. En la comparación de medias para longitud de radícula evaluada al tercer día (Cuadro 1) se encontró que el GBM-044 en su dosis baja registró la mayor longitud (3.56 cm), seguida de sus dosis media y alta con 3.40 y 3.36 cm, así como del Biozyme TS y el ácido fúlvico en sus dosis bajas (3.43 y 3.34 cm), mientras que el testigo registró las menores longitudes con 2.70 cm. Finalmente el Biozyme PP en su dosis alta mostró la menor longitud con 2.29 cm. En peso seco de plántula (Cuadro2), el Biozyme PP en su dosis media registró los valores 361 más altos con 4.33 mg/plántula, seguida de Biozyme TS en su dosis alta con 3.66 mg/plántula y ácido fúlvico en su dosis media con 3.33 mg/plántula, siendo el Biozyme TS en su dosis media el que tuvo el menor valor de peso seco con 0.66 mg por plántula. Cuadro 1. Comparación de medias de la longitud de radícula en semilla de lechuga, evaluado al tercer y quinto día antes del almacenamiento. Productos Biozyme TS Biozyme PP Ácido fúlvico GBM-044 Testigo Dosis Días 3 3.39 E 4.20 BCD 4.09 CDE 4.04 CDE 4.96 A 4.62 ABC 3.99 CDE 3.73 DE 3.99 CDE 4.96 A 4.89 AB 4.84 AB 4.44 ABCD Baja Media Alta Baja Media Alta Baja Media Alta Baja Media Alta Testigo 5 4.16 E 5.22 BCD 5.07 CD 5.22 BCD 6.01 A 5.32 ABCD 4.92 CD 4.97 CD 4.70 DE 5.43 ABC 5.39 ABCD 5.92 AB 5.05 CD Medias seguidas por la misma letra no son significativamente diferentes (DMS = 0.05%). Cuadro 2. Comparación de medias de peso seco de plántula en semilla de lechuga después del almacenamiento. Productos Dosis Peso seco (mg/planta) Biozyme TS Baja 1.33 CDE Media 0.66 E Alta 3.66 AB Biozyme PP Baja 2.33ABCDE Media 4.33 A Alta 3.00ABCD Ácido fúlvico Baja 1.66 BCDE Media 3.33 ABC Alta 1.66 BCDE GBM-044 Baja 1.33 CDE Media 1.66 BCDE Alta 1.66 BCDE Testigo Testigo 1.00 DE Medias seguidas por la misma letra no son significativamente diferentes (DMS = 0.05%). 362 Por lo anterior se considera que la aplicación de los tratamientos en semilla de lechuga con estos productos favorece en diferentes proporciones el estímulo fisiológico de la semilla en relación al testigo. De acuerdo a los resultados obtenidos y tratamientos evaluados en este estudio, se encontró una gran divergencia entre las dosis, productos y especies, esta divergencia esta dada principalmente por la anatomía y composición química de la semilla, así como al grado de deterioro y genotipo presentado por la misma, en donde se observó que en semillas de lechuga presentaron una respuesta favorable en la germinación y por ende en el desarrollo radicular y de plúmula. Conclusiones Los productos utilizados tuvieron comportamientos diferentes para la especie y parámetros evaluados. El periodo de almacenamiento influyó positivamente en la manifestación de los parámetros evaluados con relación a la semilla no almacenada. El Biozyme TS y Biozyme PP fueron los productos que manifestaron el mejor efecto en los parámetros evaluados. El GBM-044 fue el producto que manifestó el mejor efecto sobre la longitud de radícula antes y después del periodo de almacenamiento. El Biozyme TS en sus tres dosis y el Biozyme PP en su dosis baja estimularon mejor la germinación. Literatura Citada Abdul-Baki, A. A. and J. D. Anderson.1972. Physiological and biochemical deterioration of seeds. In: Koslowsky T.T. (ed). Seed Biology. Vol II. Academic Press, New York. U.S.A. p. 283-316. Agwah-EMR; Shehata-SA; El-Sayed-SF.1994. Effect of some growth regulators on seed production of onion (Allium cepa L.). In: Bulletin of Faculty of Agriculture, University of Cairo., 45: 2, 469482p. Anderson, J. D.1973. Physiological and biochemical differences in deteriorating barley sedes. Crop. Sci.10(1)36-39.U.S.A. Bidwell, R.G. 1996. Reguladores de crecimiento de las plantas en la agricultura. 8 a reimpresión. Ed. Trillas. México. p. 461-463 Sparks Donald L.. 2000. Advances in agronomy. Department of Plant and Soil Sciences. University of Delaware Network, Delaware. Volume 68 Academic Press. International Seed Testing Association (ISTA). 1996. International Rule for Seed Testing. Miranda, F.1984 a. Madurez fisiológica de semillas. VIII curso de postgrado de tecnología de semillas. CIAT Cali, Colombia. p.33 Weaver, R. J. 1996. Reguladores del crecimiento de las plantas de la agricultura. Trillas, México. P. 19-39, 81,113-155. 363