1/4 BIOQUIMICA Y FISIOLOGIA VEGETAL PRACTICA # 7 EL EFECTO DE LAS AUXINAS EN EL CRECIMIENTO DE LAS RAICES DEL TRIGO INTRODUCCION Otro procedimiento para observar el efecto de las concentraciones de indol auxinas en las plantas, que ha sido ampliamente usado también, involucra el crecimiento de las raíces de las plantas en respuesta a la hormona. Las raíces de los Trigos son material experimental muy útil ya que crecen a un ritmo convenientemente rápido y son lo suficientemente pequeñas para permitir la siembra de varias semillas en un espacio limitado. En todas las pruebas de bioensayo las plantas pueden variar ligeramente en su respuesta como individuos. por lo tanto es esencial que se incluyan tantas plantas como sea posible para su exposición a cada concentración de hormona, así se disminuirá la probabilidad de cometer errores debido a las variaciones individuales. Sin embargo, un número excesivo de plantas será casi imposible de manejar. De ahí que se debe escoger un número razonable de plantas por tratamiento, por ejemplo, 20 plantas. Al comparar los resultados de este bioensayo con la prueba del coleoptilo (práctica anterior), se debe recordar que la concentración de auxinas que estimula el crecimiento de los coleoptilos inhibe el desarrollo de las raíces pero, a muy bajas concentraciones, se puede detectar un ligero estímulo del crecimiento de las mismas. OBJETIVOS El alumno distinguirá el efecto de las concentraciones de auxinas tanto en el estímulo del crecimiento como en la inhibición del mismo en los diferentes órganos vegetales. El alumno aprenderá a contrastar los efectos antagonistas de una misma hormona vegetal. 2/4 El alumno aprenderá a proporcionar a la planta el medio ambiente adecuado para su germinación y desarrollo. MATERIALES 200 semillas de Trigo. 5 cajas petri (las desechables son adecuadas). Papel filtro o toallas de papel. 5 pipetas. Probetas. 1 L de solución de IAA (ácido indol acético) 1 mg/L METODO Un día antes de la práctica (24 horas antes) se debe poner a germinar aproximadamente 50 semillas de Trigo sobre toallas de papel o papel filtro en cajas petri. Estas se deben almacenar a 25°C para asegurar un crecimiento radical satisfactorio. Elabore una solución stock de IAA cuya concentración sea de 1 mg/L y prepare un rango de diluciones: 0.1, 0.01, 0.001, y 0.0001 mg/L. Coloque un papel filtro en cada una de las ocho partes de las 4 cajas petri y añada 5 mL de una solución a cada dos partes de las cajas petri, 5 mL de la siguiente solución a las siguientes dos partes de otra caja petri, y así sucesivamente hasta completar las ocho. Prepare también una caja petri control con agua destilada en sus dos partes. De las plántulas de Trigo seleccione 100 plántulas con radículas de longitud uniforme y arregle 10 semillas por parte de caja petri. Si es posible colóquelas equidistantes. Coloque las cajas petri en una caja de zapatos que las oscurezca por 24 horas. Al final de este período se puede medir la raíz principal para cada concentración, o alternativamente, retire las plántulas de la oscuridad y expóngalas a la luz del día normal durante 7 días. Al finalizar dicho período mida la longitud de la raíz. En cualquier caso registre sus resultados en 3/4 términos de la longitud media (promedio) de la raíz y grafíquela contra el logaritmo de la concentración de auxina. Tabla 1. Efecto de la concentración del IAA en el crecimiento promedio de las raicillas. Concentración del 0.1 0.01 0.001 0.0001 0 IAA mg/L Longitud promedio de 20 raíces Elabore otra gráfica que incluya los resultados de la prueba del coleoptilo del trigo y la prueba del crecimiento de las raíces del Trigo. Exprese sus resultados como porcentaje de incremento o disminución de crecimiento comparados con los controles. Grafique éstos contra el logaritmo de la concentración de la auxina en la forma que se muestra a continuación: Tabla 2. Comparación del efecto de las concentraciones de IAA en el crecimiento del coleoptilo de trigo y las raíces de Trigo respectivamente. % Aumento en tamaño 20 15 10 5 Control % Disminución de tamaño 5 10 15 20 Logaritmo de la concentración de auxina Algunas sugerencias para sus discusiones: Aunque las auxinas se caracterizan por su efecto en el crecimiento, la influencia que tienen en el desarrollo de la planta es mucho más extensa. Están involucradas en el control de procesos tales como la iniciación del crecimiento de las raíces, la inhibición de los brotes laterales por el brote terminal (término conocido como dominancia apical de la planta), abscisión de las hojas, tropismos. En conjunto con otras hormonas vegetales controlan 4/4 otros procesos como la actividad cambial. La bibliografía descrita para este curso podrá ampliar aún más esta información.