INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGÍA CIENCIA Y TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS II PRÁCTICA No. 1 DETERMINACIÓN DE AW Y DE LAS CONDICIONES DE EQUILIBRIO PARA EL ALMACENAMIENTO DE GRANOS 1. OBJETIVOS El alumno: 1.1. Determinará los puntos de equilibrio de sorción del agua por medio de la relación con el contenido de agua del grano y por ende las actividades acuosas por medio de la técnica gravimétrica estática. 1.2. Caracterizará la isoterma de adsorción de granos de cereales. 1.3. Aplicará los modelos de las isotermas de sorción mediante las ecuaciones BET, GAB, Henderson y Caurie. 2. INTRODUCCIÓN El agua es el principal componente en la mayoría de los alimentos (la gran parte sobre 70%) y cada uno tiene su contenido de agua característico. Todos los alimentos, incluyendo los deshidratados, contienen cierta cantidad de agua. En la cantidad apropiada, localización y orientación, el agua ejerce una gran influencia en la estructura, apariencia y sabor de los alimentos, así como en su susceptibilidad a la putrefacción. El agua es un factor determinante en la inhibición o la propagación de las diferentes reacciones químicas, enzimáticas y microbiológicas que pueden aumentar o disminuir la calidad nutritiva y sensorial de los alimentos. En los tejidos animal y vegetal el agua no está uniformemente distribuida debido a los complejos hidratados que se establecen con proteínas, hidratos de 1 MANUAL DE PRÁCTICAS DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS II carbono, lípidos y otros constituyentes. En general, el contenido de humedad de un alimento se refiere a toda el agua en forma global, sin considerar que en la mayoría de los productos existen zonas o regiones microscópicas que debido a una alta acumulación de lípidos no permiten su presencia y la obligan a distribuirse en forma heterogénea. El citoplasma de las células presenta un alto porcentaje de proteína capaces de retener más agua que los organelos que carecen de macromoléculas hidrófilas semejantes; para tener un sistema estable, los diferentes componentes de los alimentos deben encontrarse en equilibrio entre sí respecto al potencial químico, la presión osmótica y la presión de vapor de agua que desarrollen. En consecuencia en estas condiciones una fracción del agua no se congela, permanece líquida y requiere de temperaturas más bajas, por ejemplo – 40 ˚C, para que solidifique. En cereales, este tipo de agua constituye de un 5 a 6% del contenido total de agua. Su determinación se puede efectuar mediante el análisis térmicodiferencial, por resonancia magnética nuclear, etc., pero cada método da una cantidad diferente. Por otra parte, el agua capilar está menos unida a los componentes de los alimentos; es la que se encuentra en mayor cantidad, se evapora y congela fácilmente, forma disoluciones y es la responsable de las reacciones de deterioro. Corresponde a un 13-14% en los cereales. Es denominada “libre” incorrectamente, ya que no existen en los alimentos agua 100% libre, pues esto sólo es concebible si hablamos de agua pura. Aún una mínima cantidad de soluto en agua, fomentará interacciones químicoelectrostáticas, que atarán en cierta manera a las moléculas de agua de la disolución, de manera que la presión de vapor de esa disolución ya no será 100% igual a la del agua pura. La relación de concentraciones entre la congelable y no congelable se incremente en la medida en que el producto tenga más agua; en los deshidratados, dicha relación se reduce considerablemente. Debido a que la cantidad de cada una de ellas varía con el tipo de alimentos, no se puede generalizar. Por todo lo anterior, para medir la fracción congelable, se acuñó el término “actividad acuosa”, que se viene empleando desde 1953 y que representa el grado de interacción del agua con los demás constituyentes, o la porción que está disponible en un producto para sustentar las reacciones de deterioro. Debido a que el grado de atamiento del agua de un alimento, dará como resultado una disminución en la presión de vapor con respecto al agua pura, la actividad acuosa se expresa matemáticamente como la relación entre dichas tipos de presiones. Varios son los métodos de conservación de alimentos que el hombre ha utilizado desde la antigüedad que se basan precisamente en la reducción de la actividad de agua, que dan como resultado la inhibición de la actividad de los PRACTICA 1 2 MANUAL DE PRÁCTICAS DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS II microorganismos patógenos o deterioradores potenciales de los alimentarios, así como de las reacciones químicas y enzimático-deteriorativas que se ven retardadas en su velocidad a niveles bajos de Aw. El agua disponible alrededor de la superficie y presente en forma de vapor en los espacios intersticiales entre los granos almacenados favorece el crecimiento de mohos, insectos y palomillas. Esta agua se indica mejor por la humedad relativa en equilibrio (HRE) o por la actividad acuosa (Aw). Los mohos no se pueden desarrollar cuando la HR está por debajo del 68%; un límite superior seguro en cereales es 65% para un almacenamiento largo y en oleaginosas, 60%, por el contenido lipídico. Sin embargo, la mayoría de los insectos que atacan a granos almacenados pueden desarrollarse a valores de HR menores de 60%. La actividad acuosa es una propiedad intrínseca y se relaciona con el contenido de humedad por medio de las curvas o isotermas de adsorción y desorción por esta razón, es muy importante no confundir la actividad acuosa con el contenido de agua, ya que la relación no es lineal. Una isoterma de humedad describe la relación entre el contenido de humedad del alimento y la HRE a una temperatura específica en un intervalo de contenidos de humedad. Un material orgánico hidratado y almacenado a una temperatura constante en una cámara cerrada; al cabo de algún tiempo, su presión de vapor correspondiente provocará que haya transferencia de moléculas de agua y la cámara adquirirá una humedad relativa constante que estará en equilibrio con el contenido de agua del material; es decir, no hay movimiento de humedad en ningún sentido. Las isotermas de los cereales, leguminosas y otros granos con bajo contenido de lípidos presentan casi una curva recta, a diferencia de las isotermas de humedad de las oleaginosas, cuya relación es más complicada. Las HRE para un almacenamiento seguro de los granos y otros alimentos, se calculan a partir de estas isotermas de humedad. 3. INVESTIGACIÓN PRELIMINAR 3.1. Explique la importancia de la determinación de la actividad acuosa en los alimentos y en especial en los cereales. 3.2. Mencione cuáles son específicamente los microorganismos, insectos y palomillas que atacan a los cereales durante su almacenamiento y las condiciones óptimas de temperatura y humedad relativa a las que se desarrollan y reproducen. 3.3. ¿Cuál es el fundamento químico de la determinación de la Aw por el método gravimétrico estático? PRACTICA 1 3 MANUAL DE PRÁCTICAS DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS II 3.4. Explique otros métodos experimentales para la determinación de la Aw y de la HRE 3.5. ¿Qué es el fenómeno de histéresis? 3.6. Explique la aplicación almacenamiento de granos. de las ¿ A qué se debe? isotermas de sorción en el 4. MATERIALES Y EQUIPO Granos de arroz, maíz o trigo Frascos de boca ancha de 500 mL Sulfato de potasio Charolitas de aluminio de 5 cm de diámetro Cloruro de sodio Balanza analítica Cloruro de magnesio Desecador Nitrato de magnesio Pinzas para crisol Agua destilada Espátulas 5. DESARROLLO EXPERIMENTAL 5.1. Se preparan 100 mL de las disoluciones sobresaturadas salinas y vierten a sendos frascos (camaras), correspondientes a las siguientes actividades de agua. K2SO4 NaCl KCl Mg(NO3 )2 MgCl2 0.976 0.755 0.840 0.500 0.320 5.2. Se pesan 3 g de cualquiera de los cereales en las charolitas y se distribuyen homogéneamente. 5.3. Se cuelgan las charolitas dentro de cada frasco y se cierran los frascos perfectamente bien (ver figura). 5.4. Se pesan las muestras cada 24 h hasta que no haya variación, o bien, que la variación entre dos pesadas consecutivas sea menor a 1 mg/g de muestra. PRACTICA 1 4 MANUAL DE PRÁCTICAS DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS II 6. ANÁLISIS DE RESULTADOS 6.1. Reportar en un cuadro la actividad acuosa de cada recipiente y los pesos de las muestras. 6.2. Calcúlese la HRE de las muestras (W e , base seca) de cada muestra. 6.3. Represéntese la isoterma de sorción del producto, utilizando el análisis de regresión simple. Calcúlese el coeficiente de correlación y de determinación. 6.4. Modelice la isoterma de sorción mediante las ecuaciones BET, GAB, Henderson y Caurie, estableciendo el valor de los parámetros de cada modalidad. 6.5. Dar las conclusiones con respecto a las mejores condiciones de almacenamiento del grano. 7. BIBLIOGRAFÍA Brooker, D. H., Bakker – Arkema., F. W. y Hall, C. W. 1992. Drying and storage of grains and oilseeds, Reinhold, NY, USA . Caddick, L. Enero 2005. 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