DETECCIÓN DE DOS PARÁSITOS PROTOZOARIOS EN CUATRO TIPOS DE AGUA DENTRO DE CIUDAD UNIVERSITARIA Jaqueline J. Noguez1, Ana C. Espinosa2, Marisa Mazari3 Tutor: Marisa Mazari Hiriart RESULTADOS: AGUA RESIDUAL 1.00E+07 log quiste- ooquistes/L; UFC/100ml En PUMAGUA se evalúan diversos parámetros del agua para uso, consumo humano (NOM-127-SSA1-1994 modificada en 2000), agua residual y tratada (NOM-003-SEMARNAT-1996), para que su calidad cumpla con las normas establecidas. Sin embargo, solo se toman en cuenta bacterias pero no virus, ni parásitos. La OMS estima que un 24% de las enfermedades que ocurren en el mundo están asociadas con factores ambientales, entre ellos el agua de calidad insegura y condiciones higiénicas desfavorables. Los protozoarios patógenos son altamente transmitidos por agua, siendo Giardia lamblia y Cryptosporidium parvum los mas importantes. Los (oo)quistes son formas infectantes capaces de sobrevivir en ambientes acuáticos y resistir procesos de tratamientos de agua. Estudiar la presencia de estos organismos contribuye al conocimiento de la epidemiología que afecta a la población humana. G. lamblia C,parvum 1.00E+05 1.00E+04 Cryptosporidium Giardia 1.00E+03 Coliformes fecales 1.00E+02 Enterococos fecales 1.00E+01 1.00E+00 CS CL FS TEMPORADA Fig.3 G. lamblia (10-12mm) y C.parvum (4-6mm) en inmunofluorescencia Fig. 6 Frecuencia de los microorganismos en agua residual y variación por temporada. OBJETIVOS: •Determinar la presencia y cuantificar Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia en agua de uso, residual, tratada y almacenada. •Comprobar su eficiencia como indicadores de calidad del agua. •Analizar la calidad biológica por medio de bacterias indicadoras (Coliformes fecales –determinadas en la norma, y Enterococos fecales), presentes en agua. AGUA TRATADA 1.00E+06 log quiste-ooquistes/L;UFC/100ml FUNDAMENTOS: En Ciudad Universitaria no se tienen antecedentes de análisis para determinar la presencia de protozoarios de importancia para la salud pública y ya que no existe relación directa con bacterias indicadoras es importante realizar este estudio para conocer las condiciones de los 4 tipos de agua y tener mayor información que respalde los tratamientos aplicados. Proponiendo que los (oo)quistes se consideren indicadores de calidad del agua. 1.00E+06 10-12mm 1.00E+05 1.00E+04 Cryptosporidium 1.00E+03 Giardia 1.00E+02 Coliformes fecales Enterococos fecales 1.00E+01 1.00E+00 CS CL FS TEMPORADA Fig.4 Giardia lamblia (10-12mm) en inmunofluorescencia Fig 7. Frecuencia de los microorganismos en agua tratada y variación por temporada. AGUA TRATADA ALMACENADA log quistes-ooquistes/L; UFC/100 ml MÉTODOS: Se muestrearon los siguientes sitios: Tabla 1. Sitios de muestreo. 4-6mm 1.00E+06 1.00E+05 1.00E+04 Cryptosporidium 1.00E+03 Giardia 1.00E+02 Coliformes fecales 1.00E+01 Enterococos fecales 1.00E+00 CS CL FS TEMPORADAS Fig 5. Cryptosporidium parvum (4-6 mm) en inmunofluorescencia Fig. 8 Frecuencia de los microorganismos en agua tratada y variación por temporada. Agua Residual y Tratada 1.00E+07 log (oo)quiste/L; UFC/100ml 1.00E+06 1.00E+05 RESIDUAL C.parvum TRATADA C.parvum 1.00E+04 RESIDUAL G. lamblia TRATADA G.lamblia 1.00E+03 RESIDUAL Coliformes fecales TRATADA Coliformes fecales 1.00E+02 RESIDUAL Enterococos fecales TRATADA Enterocos fecales 1.00E+01 1.00E+00 CS CL FS TEMPORADAS Fig. 9 Variación entre agua residual y tratada de parásitos y bacterias. Fig 1. Método de análisis para bacterias. Fig 2. Método de análisis para protozoários. Tabla 2. Diagrama de flujo de metodología analítica para detección de protozoarios Detección de (oo)quistes de G. lamblia y C.parvum por inmunofluorescencia Bloqueo con BSA 500 ml 1:30hr Tº ambiente Ioduro de propidio con 500 ml PBS 37º C Buffer de lavado 500 ml Buffer de lavado x3 Resuspender la pastilla con PBS Centrifugar durante 2 min a 5000 RPM, quitar sobrenadante (repetir después de cada paso) 2do anticuerpo con 500 ml PBS 1:30hr a 37ºC 1er anticuerpo con 500ml de PBS: toda la noche-4ºC Buffer de lavado 500ml Glicerol como medio de montaje. CONCLUSIONES: No se encontró presencia de parásitos en agua subterránea. Aunque eventualmente fueron detectadas Enterococos fecales antes de cloración. La mayor frecuencia de microorganismos analizados se presenta en la temporada CS. G. lamblia fue mas frecuente C. parvum en los diferentes tipos de agua y temporadas. El tratamiento de agua residual muestra una tendencia de disminución de los microorganismos. Las frecuencias de los (oo)quistes son elevadas en agua residual, tratada y almacenada. Los parásitos protozoarios son indicadores adecuados para evaluar la calidad de agua que brindan información complementaria a la de los indicadores tradicionales.