ESCUELA INDUSTRIAL SUPERIOR Anexa a la FIQ Asignatura: QuÃ−mica Orgánica Tema: Determinación de células epiteliales Curso: 5º Q “A” Objetivo del Trabajo Practico: Observar células animales en el microscopio y sus principales estructuras, asÃ− como iniciarse en las técnicas de preparación de muestras. Elementos: • Microscopio: El microscopio es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. El tipo más común y el primero que se inventó es el microscopio óptico. Se trata de un instrumento óptico que contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. • Portaobjeto: El portaobjetos es una lámina rectangular de vidrio muy delgada, donde se colocan objetos de mÃ−nimo tamaño o preparaciones de baja escala, las cuales van a ser observadas en el microscopio. • Mechero: Un mechero o quemador Bunsen es un instrumento utilizado en laboratorios cientÃ−ficos para calentar o esterilizar muestras o reactivos quÃ−micos. Toma de muestra: Para una adecuada toma de muestra, es importante una correcta limpieza del portaobjeto, el cual debe quedar lo mas limpio posible. Para lograr esto se lo debe someter a un lavado con detergente frotándolo con un cepillo y luego secaremos el portaobjeto acercándolo 20 - 30cm. aprox. a la llama del mechero. Se utilizarán dos portaobjetos, uno de ellos (previamente esterilizado) se lo roza con el interior de nuestra boca y extraemos las células epiteliales encontradas allÃ−. Epitelio: es el tejido formado por una o varias capas de células unidas entre sÃ− que puestas recubren todas las superficies libres del organismo, y constituyen el revestimiento interno de las cavidades, órganos, huecos, conductos del cuerpo y la piel y que también forman las mucosas y las glándulas. Los epitelios también forman el parénquima de muchos órganos, como el hÃ−gado. Luego fijamos la muestra, porque a 60º C las proteÃ−nas se desnaturalizan. Esto se logra pasándolo suavemente por el mechero. Posteriormente se la colorea con azul de metileno (1 minuto) o cristal violeta (2 minutos). Después de este periodo de tiempo de coloración se lava la muestra con agua eliminando los restos de reactivo colorante. Secamos la muestra coloreada y observamos en microscopio, para esto hay que tener en cuenta los siguientes pasos: 1 • Regular el condensador, de la forma más distante posible. • Colocar el objetivo de menor aumento disponible (en el laboratorio contamos con un aumento de 4x) • Trasladar la platina con el “Macrométrico” hasta hallar su tope de acercamiento a los binoculares. • Observar por los binoculares y luego bajar nuevamente con el Macrométrico de manera suave y de manera simultanea mover la platina en “X” y en “Y” hasta que la muestra se encuentre dentro del campo de observación. • A partir de que la imagen empieza a aparecer la imagen, mover con el Micrométrico hasta lograr una nitidez deseada. • Luego de este proceso solo modificaremos la posición del objetivo (4x - 10x - 40x - 100x) y del condensador. • En el objetivo de 100x de aumento se coloca un aceite especial para una mejor visualización. Resultados obtenidos: • 4x: • 10x: • 40x: • 100x: Conclusión: Los diferentes aumentos nos permiten ver las células epiteliales de distintas maneras, a medida que los vamos aumentando podemos observar una mejora en la calidad de la definición de la imagen. Cuando llegamos al aumento 100x vemos la célula animal de manera óptima y podemos distinguir sus estructuras. Aumento 100x: 2