un

Todas las l'uiicioiies que r c a l i ~ a i lii i b seres \¡\os Lieiieii s u l ' u i i d a i ~ i c i i t cc~i l un
número extraordinario de reacriones qnimicss. que se ngriipan de manera fiinrional y
dan lugar a los proccsos l l i n l 6 g i i o i fiicai~gadosde iilailtciicr. ricsarroiiar p c i p c t i i a r a
cada i i i d i r i d i i o .
Todas las i-eaccioiiis qiiíiiiir;i~ q i i i o r i i r r e n en lo\ o r ~ a i i i s i i i \.¡vos
~ ~ s <lepeiiden d i
l a existencia de iiii cata!irx!t!r. Ihi p o r q i i e ella5 st.tii cnt;i!iratln~. b i r i i porque su
reactante.sii p r u d u c l ~ o
a i i i l ~ o br i q i i i r r a i ~
de iiiicatalicadur p a r a producirse o coiihiin i i n e r e s p t i v a n t r i i l e . El f e ~ i ~ i i i ~ ede
i i i ,l a catáli\is presenta carwterístivas t a n especiales en los seres v i w s quc Iiciiios ~ s i g i i a d uc l t6rniiiio de biocatiílisis p a r a dcscril>irlo; su
preseiicia universal eii los prtbcesiis i i ~ o l e r i i l a r e sIiace qiie l a Iiiocalálisis ~ n i i s t i I i i ? a
una categoría ceiilral eii el i s t ? i ~ l ido i l a I>i~it]iiíniica.
1.0s c a t a l i z a ~ l o r r sq u e a r 1 h 1 1en lm w r i 4 vivws son It>sI>iocalalizadores, qiie se
caracterizan p o r presentar u n a estructura molccular complcja y tbncionar con eficicncia y cspcrifirid;id ciciwias. c f ~ r n o
se vio r n c l c : i p i t u l ~:interior.
~
Elfuncioiiaiiiiciitu de los I>iocatUlLadoresdepende n o súlo de su estructura ) de
las propiedades d c r i i a d a s d c ésta. t a i i i l ~ i & ide
i bus iiilcraccioiies ani el rcsto de I i ~ s
coniponeiitcs celulares. intcraccioiics que en ocasioiics son dctc;.iiiiiiaiitcs.
E n e s t e r a l ~ i l i i l o s eI i a l a el r ~ i i i d i o < la
I i rrlrii<.tiii.ii d i lo- I>ii,ratalirn<II~res.
de si!
niwaiiisiii~,.:riieraI de ;icci<iii!.YYI p r i i i r i ~ ~ o pri,piecl:~<ler.
lri
FI c o i i o r i i i ~ i r i ~de
t ~estos
i
aspectos es imprcscindihle p a r a el cst:idio adccriado, n o sólo dcl mctnholisino celular
sino de casi tudab l a i I ' u n c i ~ m edel orraiiibiiio.
Las protciiias cspe~.ializadascri l a ftiiici6i1 catalítica recil>ciiel iioiiibre de e i i d i i i u
Y
sustancias s o ~ i r ciiic u i i ~ c h
a c ! í i ~ i ii c i i ~ ~ i o i i ~ isnt i si ~ ri i i t ~ h .
h q u e d i s t i i ~ ~ au iilr
e rii/,iiiiabde ias ileiiii, pil,teiiiase, precisaineiile que. tina w z
PrO(hi(lo el r e ~ o i i < i r i i i i l ~miiec.ii!aii~~o
di! siistrato: se realiza l a traiisf1>rmaci61ide l a
reconocida, ;
x a , c a n o cocscc:icnc,:r dc difcrcntc.~
intcracciones cntrc 12 p r o teína Cnnmática '.:SI riistrnto, 6stc cvpcrimcnta i r n rcordenamicnto dc sus clcmcntos
constituyentes debido a la mptura y formación de algunos enlaces químicos. La sustaiiciiI
que resulta de la acción de la enzima sobre el sustrato recibe el nombre de producto.
Las reacciones químicas que ocurren en los organismos vivos presentan casi skinpre una energía de activación tan elevada, que en condiciones compatibles con la \.ida
ocurrirían a velocidades casi nulas, con lo cual la vida (al menos en las condicioiies
actuales) sería prácticamente imposible.
Como consecuencia. una de las principales adquisiciones evolutivas de los seres
vivos fue la aparición de proteínas con actividad catalítica, que al disminuir la encrgía
de activación de las reacciones Iiacen posible no sólo que éstas se produzcan a graii
velocidad, sino que se lleven a cabo en condiciones moderadas de temperatura, pH.
etcétera, compatibles con la vida.
Un ejemplo puede ilustrar mucho esta situación, la hidrólisis del enlace peptídici,
es energéticamente favorable (A(?=-2 kcal.moll); sin embargo. la energía de activación para la reacción no catalizada en condiciones normales -solución acuosa neutra y
temperatura ambiente- es tan elevada, que la velocidad de reacción puede demorarse
algunos nieses antes que se puedan detectar los productos. Esto hace que los procedimientos empleados para la hidrólisis de proteínas sean realmente drásticos. Los
bioquímicos pueden hidrolizar de forma química las proteínas mediante una solución
6 M de ácido clorhídrico en un ánipula al vacío a 100 "C durante 24 b; sin einbargo.
algunas enzimas como la quimotripsina o la tripsina catalizan la hidrólisis a 37 "C. en
pH neutro y según la proteína utilizada como sustrato cada molécula de enzima puede
hidrolizar hasta 100 enlaces peptídicos por segundo. Prueba de ello es el proceso
digestivo, pues apenas una hora después de ingerir una comida rica en proteínas, es
posible detectar sus aminoácidos en la sangre.
En muchas ocasiones para la realización de estas transformaciones es suficiente
con la participación de la proteína enzimática, pero en otros casos se requiere el concurso de otros elementos que reciben el nombre de cofactores, que pueden ser iones
inorgánicos o compuestos orgánicos de bajo peso molecular; en este último caso
reciben el nombre de coenzimas. Si bien la proteína enzimática vuelve al estado inicial
al final de la misma reacción, las coenzimas requieren de una reacción posterior. Las
proteínas eiiziniáticas y sus cofactores correspondientes coiistitiiyen los sistemas
biocatalíticos.
Las especificidades de acción y de sustrato están determinadas fundamentalmente
por la parte proteínica del sistenia biocatalítico, como lo demuestra la existencia de
cofactores que actúan con enzimas que difieren en el tipo de reacción que catalizaii y
en el sustrato que transforman; también la sensibilidad a la temperatura, a los cambios
de la concentración de H+y la solubilidad corresponden a la parte proteínica y no a los
cofactores; sin einbargo, los cofactores influyen de forma importante en la eficiencia y
las propiedades cinéticas de los sistemas biocatalíticos.
Mecanismo básico de acción de las enzimas
Fig. 15.1. El coinplcjo rnriciia sustrato.
Durante l a ieucciúci catalizadv por
una cnzimii. ésta forma u n coniplejo intermediario con el suslrato.
La u n i ó n d e la enzima con el
suslrato es muy rspecíficii y constituye un paso obligado para la
formación de los productos.
Aun cuando cada enzima al catalizar una reacción lo hace de una fornia particular,
existen algunos hechos que son de tipo general y que se manifiestan en todas les
enzimas.
Todas las reacciones enziináticas se realizan al menos en 2 etapas, una primera en
la cual se produce la unión física entre la enzima (E) y el sustrato (S), que da origeii al
complejo enzima-sustrato (ES) y se forma de manera reversible, o sea, puede descomponerse nuevamente dando origen al sustrato y a la enzima libre. No debe confundirse
el complejo enzima-sustrato con el complejo activado que fue estudiado en el capítulo
anterior (Fig. 15.1).
Una vez formado el complejo enzima-sustrato éste puede realizar la transformación del sustrato, dando origen al producto (P) y a la enzima libre que está en condiciones de volver a iniciar el proceso.
A la etapa iiuiiiero 1le Ilaiiiaiiioa e h p a de uiiióii, 1 a la uuuiero 2 dc traiisl0riiia-
y&,. La actividad de las eiiziuias puede ser uiodificada j aiectar la etapa 1, la 2 o
Esta es una representación simplificada. pues es posihle suponer la existencia
de otros complejos intermediarios sohre todo cuando en la reacción intervienen
cofactoreso más de un sustrato.
El punlo erucial de este i~iecauisiiiobásico es la existeiicia del coiiiplcjo
enainia-sustra~~,<lue
fue pr11l)uesh1n1rprimera vez por Hcr~i:veii1905) a partir de cse
moniento se Iian reuuido uua serie iinportaiite de indicios acerca de SU presencia:
1. Las propiedades físicas de l a ciiziiiias, como su solubilidad y estabilidad al calor,
cambian frecuenteiiieiite con la foriilacióii del coiiiple,joeiiziina-sustrato.
2.I.a~características especirosci,picas de iniirlias en~iriiasy sustralos caiiihiaii con [a
formación del comple,jo ES, dc la misma forma quc cl cspcctro de absorción dc la
heinuglobiiia cambia al unirse con el oxigeiio. Otras técnicas espectroscópicas
como la resonancia magnética niiclear y la resonancia magnética electrónica son
también muy inti~rmativasacerca de Ias interaccimes ES.
3. Los complejos ES algunas vcccs han podido ser aislados en forma pura. Para una
eniima qiiecataliza la reaczih
a veceses posible aislar un coiiiplc,joEA. hi la eiiziiiia tiene afinidad suficiente por
A y se incuba cn ausencia de U.
1. La formación del coniplejo ES muestra un clewdo grado de especificidad, por
cjeniplolaD-serinano es sustrato de la triptófauo sintetasa, que utiliza L-seriua; el
isúineru D ui siquiera se une a la euziuia; esto supoue que el lugw de uiiión del
sustrato tiene uua forma muy definida.
5. Algunos complejos ES se Iian visualizados directan~eiitepor iiiicroscopia electi.6s
de 6cidos nucleicos y sus eniimas
niia y por difracción de rayos X. I r ~cl~mplejos
polimerasas sc observan dc mancra fácil en microfotografías clcctrónicas.
La comprobación de la existencia del complejo enzima-sustrato orientó la búsquedade lascaracterísticas de las enzimas que permiten su formación: los resultados se
exponen a coiitinuaci.júii.
Centro activo
La existencia del coinple,jo euzinia-sustrato y la caracteríbtica de que la niayuría
delossustratos preseutau un taiiiaíio varias reces menor que la estructura de la enzima.
implican que la eiiziiiia sólo entra rii cimkictocon el siistrato en tina pequefia zona
específicadc su voluminosa estructura: esto se contirma con alyiios experimentos en
~ ~ ~ u a l e s s e r l i i i i i i i a lvarios
i a ~ i aiiiiiin~ci~los
de las eiizinias sin alterar su fuiicióii.
Las proteínas cnrimiticas prcscntau 2 regiones o sitios importantes.uno de cllos
r w O I I ~ ye liga al sustrato (sitiode reconncimirntnl y el otro cataliza la reaccih (sitin
Qfalítico) toda vez que el sustrato se ha unido. Estos 2 sitios están adyacentes uno al
Otro en la forma activa de la enzima y. en ocasiunes. el sitio catalitico es parte del de
rwonocimiento, estas2 regiones en conjunto recihen e1 nombre de centro activo.
Aunque las eiiziinas difieren inuclio en estructura. especificidad y modo de catiílisis. se puede establecer un número de genevalizaciones con respecto a la estructura <ic
los centras activos (Fig. 15.2):
l . El centro activo representa una porción pequeña del volumen total de la eii7iiiia:
tiiiichos de los residuos dc aiiii~ioaciclosde la enzima no entran en contacto con cl
siistrato.
2. El centro activo de unti enzima tiene un conjunto de grupos químicos ordenados
espacialmente de foriiia precisa, esto hace que el sustrato quede unido al ccniro
activo de forma tan íntima que casi ning~inaotra molécula puede unirse.
3. El centro activo es una entidad ti-idiniensiond, éste se presenta generalmente coino
una cavidad constituida según los repliegues que la cadena polipeptidica forma al
establecer su estruct~iraterciaria.
4. Los aminoácidos de las 2 regiones del centi-o activo no iiccesariaiiientc esti11
adyacentes unos a otros en la cadena polipeptídica lineal; el acercamiento se produce como consccuencia del plegamiento de la cadena.
5. El centro activo csiá situado superficialniente en la enzima. permite el acceso de
las moléculas del sustrato con relativa facilidad.
6. Los grupos que intervienen en la formación del cenlro activo realizan diferentes
foiicioiies.
En la estructura del centro activo sc pueden distinguir varios componentes cada
uno de los cuales contribuye a la función general pero de foriiia diferente:
1 . Eje peptídico. Formado por la paste monótona de la estructura polipeptídica. cuyo.;
pliegues y repliegues contribuyen d e manera importante a dar la forma
tridiniensional del centro activo.
2. Gi-upos de arnbientacióii. Son cadenas laterales de ailiinoácidos que se encuentran
en el centro activo y que son de naturaleza apolar, contribuyen a que éste preseiitc
características que no permitan la cntrada del agua; esla característica provoca
cambio en las propiedades catalíticas de otros grupos y además, permite qlic Se
refuerce11las interacciones débiles entre la enzima y el sustrato.
.piientes de hidrógrnf>qiir se rqtahlrcen entre griipnc polares de la- cadenas
laterale< de !nr sminnaridnr ~ e r i o atrenoina. tirwinn ~trGtrra.coi?gr!ipoi polares del sustrato.
.Knlacrs wlinnr o ihirr.; <i;r piicdrn foi-rnxrc ciiii-c2i1qio5 <iic pi-rscntnn cargas
eléclriws de la cailcii~laica! di: lub siiiiiiukidub 2ipirticü. gluljiiiico. Iii&liiia,
s carga ~ p u c s t acn 21 sustrato.
arginina y lisina, con g m p ~ dc
.Tuci-/*~\dcl'aii i l c i K . a k o rui.;.~ahic~lduaic?,que bc cdai~!ccciiciiirc quposdei
C C I I I I Y I ~ Cdel
~~
s iM
i s Il i?~ l ~ ~ ~w! iI~~<.wlimii
ie
iiiti? crwa iiiior de<tli.<is?iio lieiirii
caractcrístic;is quc lcs pcrmitan otro tipo dc intcraccion.
Debido a quc d agua lime uiiü cuiisíaiilc didhii-ica iiiu- cler ada.la auiciiciadc
agua eii el cciitro actito iiacc quc csias iiilei.accioiics, que de por sisoii d&iles,
seeii algo iii& Suert~5q t ~ cu
e !m auibieute p o l : ~ ~
Los puciitcs dc Iiidrúgciiu sou taiiibii.ii uii iactur iiuporlaiilc cii ia uriculaciúii
del hudi-alu cii u iiiiisiia a: cc;;li.ii acíi,o. ~uesclloslicii~iicai-Llcr dii-cccioiiül
qoc no poscin Ins dcmas i;;tiraccioncs.
EsLa3 oriiip;~iic;il~~
l(ejc pcptidiu;. q u p w de aiii!>iciitacióii\ grupos de uiiióiii
.
i~ni(iii
son <lelerniinar!!r~rii 121 e!q,a ik ti ni ti!^ de la riwiina c<mel s u s t r ~ l o1<;slii
está rIrleriiiiii;id.i ~ I 2WI?<-!orcspriiiiipairs. ia c i ~ i i i ~ i l e i i i r i i t a r i ~ lespacial
acl
o
est6rirs qiir se ~ % + I I ~ ? ? Y -??ir?!x ?%+w!l?x%n di! wn!rr> iitlvi! ,' 12 ?rtr!ir!!!r,!
dcl snstrato: así como la comp!erncntaridnd química cntrc los "rupos clcl centro
activo ). los dcl sustrato.
4. C;i-iipmcatalíliu~.
Al igual que los aiilwi~wrrh o i i cadeiias lalc~.alesiIe
~~iiiiiorírid~~s
que participan en la estnictnra dcl crntrn activo; pero son los que están impliradoq
¡Ir li~ril1;l1iircCf:i cii I:i 1i.:iiisfiiriii,iriiiii del sii~lr:ifo:lo\ que ciiiiipl<~ii
c<iiiiii:r!or
! ~ la scrina,
frccucncia cstn f;;nciCn son c! i x i d n x l dc In kistidinn y cl h i d r o ~ l de
taiiibiCii !iau sido dciiiosirados cl grupo sulfiliidrilo (Sil! dc la cisicíiia y c! cnrboxiio
del asp6rtien.o <le¡gliitániic,,.
Estusson los grupus que ii~iri-virnrnrii la segunda ebapade la rt.acciuii u etapa <le
tnnsf'nrmnción; sin cmhnrgo: no .;e p n x k o!~idarqric ~ila primera ctnpn no se renlizó
satisfactoriamente. la ceginda etapa <eserá tnmhién afrctada. pner no puede haher
una adecuada traiisforniación si la uiiióii ha sido dcficicutc.
~ I c e i i t r i i a c l i v ~ ~ e s i i i i a r s l i ~ i i r i i i i n ~ i i i i ~ i i iIasfiiri-rasqt~e
ica.Si
iiianliirir~~
la~li.iictura del ceiilro a d i w soii fuiidaiiieiilaliiiei~LeIiiltirac~ioiirsd&bilrs.rii uii coi!iiiiilo de
moléculas de una iiiisuia cir~iuiacxihlii-áii cciiti-os a c l i ~ oque
r preseiilcii difci-ente
eSladt1sioiiit1rii1arit~i1a1es
ii~teiriiiiv~rtil,Irs.
(Iridr a~liidlosqiie iaciliiaii iiiiirlio Iw
unión al sudrato hasta los que caqi no prrmitcn la entrada dcl irirtrato. paiando por
todos los estados inicrmcdios ima:inablcs.
Formación del complejo enzima-sustrato
Se han po~tiilado2 hip6truis para eupiiinr la furmación del compkjo enzimaStlsIWlt~.las l l a n ~ i : #de
\ la llavv y la c r r r d i ~ w;N
. corno la (Ir ailapIaci(in inducicla.
La uiii<iiidei susirato coii la eiiziiiia puede iiiiplicar ~iiaiiteiier,juntas2 iiioltciilas quc prisriit;iii un:i c>tr;ictui.;i iuiiiplci;ic:ilnri;i ~lesdce! piiiilu d r 5ihl:i cqxicinl o
V h i c n . o amhi~.;.rii iin eomplvjt, qiw sr estnhiliza por iin n í m e r o variado de
int~raccioncsrlCl>ilcs.(.oiun cstc tipo dc ;iw~>l;iiiiieiiti,i-criici-<laal iluc w ~1>ruiIucc
e n t ~ i i n llave!.
a
rii cerradtira: para descrihiresta iinión se dice qoeie prodiice por un
meanismo así llamado lorkand key. Para que este mecanismo se produzca el centro
" C h debe poscer una estructura tridiniciisional coiupleiueiitaria al sustrato aun eii
auseiicia dc fslc.
Sin embargo, en algunas enzimas la estructura complementaria del centro activo
sólo existe cuando está unido el sustrato; la unión de éste induce un carnhio
conformacional en la enzima, hace que los residuos catalíticos adopten la posición
adecuada, lo cual significa que a medida que el sustrato penetra en el centro activo éste
adquiere su forma funcional óptima. Las moléculas que se unen al sitio de recoiiociniiento de la enzima, pero no inducen ese cambio conformacional, no son sustratos de
la enzima; de esta forma una enzima puede diferenciar un sustrato de un no sustrato por
2 factores, priniero, si la sustancia puede unirse a la enzima y segundo, si puede provocar el cambio conformacional pertinente. Cuando las 2 condiciones se c~irnplctise dice
que el mecanismo de unión es por adaptación inducida.
La glucoquinasa es un ejemplo interesante de este tipo de mecanismo; esta etizima cataliza la transferencia de un grupo fosfato del ATP a la glucosa y a l g ~ ~ n otra?
as
hexosas. Alg~inosestudios de cristalografía de rayos X han demostrado que estriicturalinente la enzima está formada por 2 lóbulos; la unión de la glucosa induce un
cambio conforrnacional grande que aproxima los 2 lóbulos y crea un sitio catalítico
funcional (Fig. 15.3). Sólo la glucosa y otras moléculas de estructura muy similar
pueden inducir el cambio conformacional que asegura que la enzima fosforile a susiretos
correctos. Algunas sustancias como el glicerol, la ribosa y aun el agua pueden unirse a
la enzima en el sitio de reconocimiento, pero ninguna de ellas induce el cambio
conformacional requerido y por tanto no son sustratos de la enzima.
Fig. 15.3.
Adaptación inducida en la
glucoquinasii. La enzima está formada por una sola cadena
polipsptidica que adopta una estructura tridiinensiunal formada
pur 2 lóbulos que drlirniian una
profunda depresión donde está
lncalirado el centro activo, al unirse
c o n el sustiato ae prnduce la
tiansconi0imaci6n de la enzima
que provoca u n acercamiento r w
tre los 2 lóbulos. por lo quc el
siistratu queda atrapado como se
mucstra cn a). En h) apiirecen los
grupos del centro activo que fiw
man puentes de hidrógeno con la
glucosa. Obsérvese que estos grupos pertenecen a los aniiiioicidoa
que no ocupaii posiciones c o n s c ~
cutiviis en la cadena polipcptídicu.
h)
Asp 205
AsN 204
Gli 229
OH
Glu 290
AsN 231
Estudios de la formación del complejo enzima-sustrato en numerosas enzimas Iian
puesto de inanitiesto que algunas de ellas funcionan según el mecanismo llave-cerradora.
en tanto, otras lo hacen por adaptación inducida.
Mecanismos de la catálisis
El asombroso incremento de la velocidad de las reacciones que logran las enri~nas
escapa a las explicaciones clásicas de este fenómeno en el mundo inanimado. Ha \id<)
necesario un estudio minucioso de la forma en que actúan e n r i n i ~ específicas.
s
ademic
de modelaciones experimentales y trabajos de investigación teórica para teiiei iiila
explicación aproximada de porqué las enzimas tienen la capacidad de incrementar dc
f«rma tan notable la velocidad de las reacciones; se han identificado numerosos facto-
influir en la acriiin de los mtalira<lores,pero en este iiioiiieiito sólo se
rs4ue
mencio,,&n aquéllos que están más relacionados con el funcionamiento de las cnzimas.
los w a d u s efectos de aproxiiiiacióii. iiinio\ ilidad ) orieiitacibii.
~ ~ ~ n d o e l s i i s t i . a t o s e aen
l ~el
j acentroactivo.lt~Iiarede una manera fnrzada con
cierto grado de distorGm (Ic la estructura. que puede pruiocür la aproxiiiia~ii>ii
de
gnipos reacti~osdel sustralo) fa\orecer el desarrollo delareaccibn; a l e efecto esaúu
ni& evidente en las reacciones ion 2 sustratoh. los cuales al asociarse a ~ h r la
e superfi,+dela ennma quedan mny prnximos v de esta forma se facilita la reacción.
[,as estriictiiras químicas son dinámicas: los grupos químicos poseen mnvimientosde rotación alre<ledorde los enlaces siiiiples: esta iiioviIi(lad piiede dificultar las
pues se reqkiiere qiie 111sgrupos se iiiaiiteiigaii fijos i i i tina posiciú~ial
,,lenos durante un período brcvc. Al unirsc al centro actil-o, la ciiziiiia limita considerablemente la movilidad de los grupos del sustrato. esta inmnvilidad momentánea es
un factor favorable para el desarrdlo de la rrarciún.
Por último, las sustancias para reaccionar no sólo ncccsitan aproximarse, tambicn
se requiere qiie ese accrcamicnto sr realice con tina dctcrminada orientación para qiie
se favorezca la foriiiacióii de los enlaces que dcterniiiiaii el dcrarrollo de la reacción. La
to
que &te quede
íntiina relación que se estal>leceentre la enziiiia y el s u ~ t r ~asegura
situaduco~ilaorieuhcibii ui;W favorüblc para la rcaccióu: de nuevo este erecto es aún
másevideiite en las r ~ a c c i o n c~m
s 2 sustratos.
Algunos análisis teóricos 5- estudios cspcrimcntalcs han demostrado que cada
uno de estos efectos por sí no pueden explicar los iiicreiiieiitt~sde velocidad ohservados en las reacciones enzimáticas, aun cuando al actuar de manera simultánea se
potencializan unos a (~tros.
leniendo en rnenta los efRctns estridiadns anteriormente Ins incrementos de la
velocidad de la r e a c r i h , qiie logran las ei17,iiiias.son iiiiicho inayores que los esperadosdeacuerdocon los mecanismos anteriores. Iiiia Iiipótrsis [>ara sii expli~acióiifiie
enunciada inicialmente por Liniii Paiilingen 1948 y desarrollada más tarde por otros
investigadores; según ellos la enzima en realidad nose une al sustrato propiamente
dicho, sino al estado de transición o comple,joactivado de la reacción. provocando un
aumento en la concentraeióii de éste con lo cual. como fue estudiado en el capitulo 14.
se incrementa la velocidad de la reacción.
Esta situación puedelograrseal menos de2formas. hien la enzima se une directam n t e al estado de transición con una elevada afinidad, o durante el proceso de unión
lae&iaobLigadsustratoüadquii.irla utruclura del estado de trusicióii. al crear en
éste tensiones estéricas que lo obligan a adoptar esta estructura; aunque durautc un
tiempo se pensó que la scgunda npción era la rnrrecta, invertigarioner porteriores
apoyan más la primera alternatiu.
Esta hipótesis ha recibido evidencias experimentales con el uso de sustancias,
cuyas estmctuns semejan la del estado de transición de a t y n a s reacciones a las cuales
les ha denominado análogos del estado de transicinn. La similitiid estnictnral que
estos análogos tienen con el sustmto natural de la enzima hace qiie piiedan unirse
rápido y con elevada &~n¡dad a IaeiuUiia, w r o sus diferencias les iiiipideiiS r lransformados por la enzima; por tanto, cstos análogos del estado de transición actúan conlo
eficientes inhihidnres competitivos de la enzima. Para el estndio de los inhihidores
enziniáticos debe consultarse el capítulo 16.
.lomando mmo ejemplo la reacción de la ft~marasapneden ilnstrarse Ins conceptns
queSeaiahandeenriniiar; &a enzima mtaliía la hidrntanón reversihledel ácidotiimárim
Y forma ácido 1,-n~álico.eoiila pai7ici~~aiión
de un rarl>aiiiÓn conioestado de transiciún.
.
L
Fumico
Eaiildo de
transición
L-niálico
Modiñcaciones del centro sctivo
1 s ~ 4 r i i c t 1 1 r¡:el
a w i i t r ~acliio<:
,
diiiAiuica i i ~ i i ~ i l ; i ~ ~ l c idiii-i <~,~
! I I~
Y Kl ~c. W . < ~ V
transconformación. par= lo cual conlo :p sc Iin estudiado, no prccica la ruptiii.~dc
eiil~ccbcu\alentcs. d o de iiitcraccioiies dí-bilcs; si11ciiibai-go. debido a eslas niiiu;is
YB
exihlc~~
nunwrostm agenies I ~ I I Vp!w~lw
ciii.iic~rr¡~iicas
esiructuraieh ~ i rCi ~ I I ~ I aciiw~
provocar tranwm?orniacio!>cr inar dristiras, qiieimplicarian alterncioncsy,por t x t o ,
afcctarinn ln función dc 13enzima.
. .
! t t < v ! \ X P ~ ~ Y ! ! ! ? . w ~ I x Y ~ ~ ! ~ riif~iifimrkt
e\!?w!tird t r i d i ~ n e n h i d&b!l
y!!4
niir: al ai.i!ixr s d ~ r Itis
e ennmas priivncarlaii la distor<iiiri (!VI i r n t r o activo. t:~vvvi?o
cc h: visto dcpcndr de In ertrnctura terci::ri:! dc Ins enzimns; es por ello quc todo.; lo?
agcntcs dcsnnturnlizantcr afectan la acti~idadcnzim:itica. Esta cnracterísti~ih.? dckr!:!innclo ?l ninplin tiso d r npentr? dmiiat!irnli7nnte~nnr? ikteiicr rr:!crionei rn~i"!:í!ir::?
e,, rl iai><Wtt~,~!%,,
Por ntra parte. Ins agentes rnmn la cnncrntrarion de innes hi<irn!ym imrdida
romo pH), afectan rl grado de diwri;ici<in 'Ir !o<griipw i o n i i a h l r ~rlr la< r v h w
2atcralcc rlc !os aminoácidos. pucdcn nltcrar la distribución de cargas (.I&ctric:'.i Ic1
k
c w t m ;~c!ivo"p w t;mo u w d i k ~ l;,r aciividac! de las r n h w v : taml?iGn p ~ w :!!fvw
cl rctndo dc ionización del sristrato y traer coniccncnci:is sizlilarcs sohrc !a :,?ir>Ci+?d
<!r In rcnrrión.
1.:) prew!cl:i rii 1:i vil!!ciiiri de aii;il<igm del .ustr;i!t~-sustancias rel:;.i:::::::!:!s
estruciuralineiiir cuii el suslralo de la eiizini~.pero que no son subceptiblcs de ser
.. .
!~~ail.f,~',~,~~~,,.~~~~r~~la-~~ll?,!~.,ca,i<~,~>!~
!tila !G!~<I¡<l'!
<¡el?! a c ! ~ e!l;ia!i*?!!'.?
~ ~ ~ ! &!~ ~ ~
eitas ~ustanciarllegan a nnirce al centro activo y ln mantienen ocupada. Po? nti'a par!P
ia existencia de compuestos quiinicos. capaces de reaccionar específicaniente con
g q x x del ccntro activo y m ~ d i f i c n r l opndicrLi
~
afcctar la acción dc !as cnzimas. Ti1
ocasiones la iuodi:icación que dctcriiiiiiado grupo produce en la enziina pi-oiow la
aIwlici~'mpea~iuai~ei~le
de la a c l i ~ i ~ l catalílic~
ad
de la p r o t e h i ~ I I L ~ I I I G ~ ~ V111Aqiw
. h;~
hccho que cste tipo dc sustancia sc Ic denoniinc sustratos suicidas.
De todo lo anterior sc puedc afirniar quc la a c t i ~ i d a dcatalítica prcscntc e11uua
prcparacióu ciiziriiática dcpendcrá dc la conccntracióii de centros actkos útiles, (is u ,
el uúincro de centros activos por unidad de ioluiiicii unidos al sustrato o <luc11u
presentaii oiiiguna alterociúii que l a iinpida unirse.
Especificidad de las enzimas
Dwdcel puiilu d c \ ibhestruclutd iasei>~iiii~bdiCiereii
del redu de la!, prsilclilu~
por la cxislciicia del centro d i \ o. por cllu. laa propicdiidcs purticulares dc lar e i i ~ i n l a ~
sn!i aq!~bl!as <:ti? driivaii del e n t r o actiso.
Teniendo en cncnta las cnractcrísticas estructurnlcs y funcionales del ccntro :irtiuo se iiiliwe que a un centro x U v o delenninado sóh, podrá unirse un siistrnto (oun
número rnny limitado dc ellos quc prcscnten una cstruchiramuy similar), a s t a prollicdad del ccntro acti\o, j por tanto de las enziniaa, ae le íIcnuiniiit cspccificid;id dc
siisti-ato.
L~ especificidad de sustrato puede ser absoluta, cuando sólo existe un sustrato
capa=
de ocupar el centro activo de la enzima; o relativo, si se trata de un grupo de
sus^^ Aun enesteúltimo casose observa quelauniónde sustratos diferentes no se
produce con igual fortaleza, lo cual manifesta que la enzima presenta una afinidad
d i s m a porcada unode los sustratos, y en la mayoría de los casos se destaca uno de
ellos como el más afín. Como ya fue estudiado. las 2 hipótesis de formación del
complejo enzima-sustrato permiten explicar de manera adecuada la especificidad de
sustrato de las enzimas.
Una w z que se Ii:i prndiicido la 11nii)11del sustrat(~al c c n t n ~activo. sí110 alguno de
los enlaces dcl sustrato qiic<laráal alrmcc de los griipGs cat;iliticos de la c n h i ~de
;
,@forma laenzima podrá realizar una transforniaciún deese sustrato, aunque este sea
suseeptihle de varias transformaciones. a esta propiedad del centro activo v por tanto
de la enzima se le d a el iioiiibrc de cspccilicidad de accibri.
Por e,jeiii()irP.el &cilill gllltiillli~r)pllecle e\perinlrntar una reilccióll de
o
a.d~sc;~rhoxil;icih!pii~dili'irácido;~:iiiiiii<ihiitíi.ico. t;iinlii6n iina <Iesai~iiiiaci¿~ii
m a r n i n a c i ó n para originar ácido a-cetoglutáiico; para cada reacción hace falta una
euzinia específica. tudas cuii la iiiisiiia esr>ecilicidau de susirato (icido glutiiiiico).
pero con diferente especificidad de acciún. Casi siempre las enzimas que tienen una
elevada especificidad de acción y de siistrato resultan ser enzimas claves en el metabolismo celular.
Considerando que la unión enzima-sustrato es muy específica y que una vez
formado el complejo es una de las transforniaciones posibles la que se lleva a cabo,
podemos derivar una característica general del funcionamiento de los biocatalizadores.
En todas las reacciones biocatalizadas se obtiene siempre el número niáximo de inoléculasdel producto a partir del sustrato, sin que en las reacciones qiarwzcan produclos
seeiiii~larioscoino c i Frcciiciite e11 icarcioiw iio i:%talii-xlacpor cniinin.; fqta rr~iilaric ~ w c ~ :rlei
i l i ~ ~ - i i ~ c dc
ipi<;
dad de 111spri~ccw\lhi,!li~cic~~~~
: ~ ~ o I c c n i c,\
; ~<>i
i -coi;ienidc
~
niánima eficiencia.
Centro activo de la quimotripsina y la tripsina
La estructura y nwcsnismc dc acción dc i:i quiniotripsina] la tripsina se conoccn
detdodaiiicirte. miibas cii~iiiiasac aiiitcti~aiicii el piiicrces cii foriiia de prccuisoi-es
inactivos (ziiiiógciios)Ilaiiiados qui;iiotripsiiiúgeiio ) trip~iiiúgciio,rcspectii aiiiciitc.
La activacih del quirniilripsiniiyrni, tirnr Iiirnr en rl inlrstinii <Irl@u donde se
furnia la quiiiiotripsiiia quc fuiicioiia al igual que la tri~~aiiia,
Iiidi.oliraiido ciilaccs
peptiuicos de las pruteíiias iiireridas coiiiu parte del proceso direstiro. Dos i-iipluras protcolíticas irrcyersiblcs actii an :a ciizinia, una elimina la scrina 11 y la
arginina 15 del quimotripsinógcno y otra, la trcoriiria 1.17(fig. 15.4). Esta actil-aciúncn eliiitc~tiiiuiieiie la \ciiia,ja de pre\eiiii. ~ l u la
c eodiiia pueda degradar el lqjidu
pdnireático qiie la prodriie.
La qriimotripsina no hidroliza todos los enlaces peptídieos, más hien es selectiva
Para aquAlus di~iidepwticipa el grupocarl~oxili~
de fenilalaiiiiia. tirosiiia o triptiifaiio
mig. 15.5). La tripsiiia por el coiili-ario es capccifica para los ciilasm. doiide el grul>o
mrhoviln lo aportan la liiina o la arginina.
El iiiwmiisiiio de accióii de la quiiiiotripsiiia fue deteriiuuado a partir de su estructura tridimensional estudiada por rristalografía de rayos X:la enzima coiitienr 3 radcpulipeptídicas A.B y C coi1 13.131 y 97 aiiiiuuácidos cada una. unidas por enlaces
dkuliuros.
En Iamolécula se dcstaciin 1 apcctos estructurales importantes,el centro actiio j
una hendidura o "holsón" creada por las cadenas Interalcs de varios aiiiiiio5cidns
hidrofóhicos: esta hendidura hirlrofóhica sirve de sitin de iinión para reiidiios de
aminofcidos específicos del surtrato. La conform:idÓn de este "holsón" permite n los
resid1los alineado? en él pnrtiripar en interarcinnes hirlrofnhicas ron las cadenas Iate-
Fig. 15.4. Activación dcl quimotripsinóycno.
El pi,,crcas segrega el quitnolrip~
hinúgeno hacia el duodeno. dond e ocurre s u transformacióii en
qi~iinotripsina.Esta activación sc
produce por la separuciún de los
aminoácidos que ocupan las p m cioiies 14, 15 y 147. de esta manera la nioléculu quedi, formada por
3 cadenas polipepridicas unidas
por puentes dirulfuros.
Fig. 15.5. Especificidad dc la quiniotripsina. Lii quirnotripsina ticnc una acciún selectiva sohir. I h
cnliices peprídicos dondc participa cl grupo carbuxilo d e la fcnilalanina a), iiro4nii b) y
triptófano c). La estructura ciclicii, preientc en la cadena R de estos aminoácidos. se i i c o i i m
da en u n profundo ''bolsóti' quc rodea el centro catalitico de la enzima.
rales de fenilalanina, tirosina y triptófano. En estas interacciones no pueden participar
cadenas laterales con cargas eléctricas. ni grupos apolares pequeños.
Los residuos apolares de las proteínas globulares están escondidos hacia el intcrior; cuando esas proteínas están en SLI estado nativo los enlaces peptídicos que unen
aminoácidos apolares no son accesibles a la hidrólisis por la quimotripsina. En condiciones normales el ácido clorhídrico del estómago desnaturaliza las proteínas ingeridas, y las proteasas de este órgano degradan parcialmente las proteínas antes de quedar
expuestas al pH neutro del intestino para su posterior digestión por la quimotripsinn.
~a actividad catalítica de la quimotripsina depende de 3 residuos de aminoicidos:
histidina 57. aspártico 102 y serina 195; estos aminoácidos están distantes unos de
en la estructura primaria de la proteína, pero en la molécula activa el plegamiento
es tal que las 3 cadenas laterales están muy cercas y en posición correcta para catalizar
la hidólisis del enlace peptídico en la proteína que se une a la enzima. Cuando el
quimouipsinógeno se activa, la conformación del polipéptido se altera y distribuye
estos 3 residuos en la organización correcta.
La reacción de hidrólisis comprende varias etapas, entre ellas la formación de un
complejo covalente entre la enzima y el sustrato. Primero, se produce la ruptura del
enlace peptidico y el grupo carboxilo se transfiere al grupo - 0 H de la serina 195
&(SER,195)-OH + R,-NH- CO-R,p-
E-(SER,195)-O-CO-RI
+ R,-NH, ;
segundo, este intermediario acilenzima es hidrolizado
El aspártico 102 y la histidina 57 facilitan la reacción de acilación porque, primero, promueven la separación de un protón de la serina 195 y después lo aíiaden al grupo
amino del péptido producto. De una forma similar el aspártico 102 y la histidina 57
facilitan la hidrólisis del intermediario acilenziina (Fig. 15.6).
Estos pasos catalizados por la enzima -transferencia de un protón desde la enzima
al sustrato, formación de un intermediario covalente acil-serina y la hidrólisis del
acil-enzima- reducen drásticamente la energía de activación total de la reacción de
proteólisis.
Una comparación entre la quimotripsina y la tripsina resulta muy útil para enfatizar en la naturaleza de la especificidad de las reacciones catalizadas por enrimas;
a)
AsplO2
d)
His57
Aspl02
His57
Ser195
%,oH-N
o
)'
Aspl02
Ser195
O'
Asp102
His57
H-N
\-y
N
Ser195
N
O'
His57
h
Ser195
1
F . 15. 6. Mccaniscno d e a c c i h de la
quimotiipsinii. En el ccntro activo
de Iii quiinotripsinu se crea un c o ~
rrirnicnto de cargas que p r o m u e ~
ueci la triinifcrcncia de u n piotúci
entre la enzima y el siistriitu. con
formación de i ~ i i iniernierliario
ucil-enzima; este movimiento dc
electroiies sucede entre 3
amiiioIcidos que forman el centro
activo y, como en otros casos ya
estudiados, no se encuentran localizadoh de forma consecutiva en la
estructura primaria de la enriiiia.
Esta ruta disminiiye d e manera
~oiiaideriiblela eneigia de activaciún d e la rencción. q u e puede
entanccs ocurrir en condiciones
moderadas de temperatura y pH.
aproximadamente el 40 % de los aminoácidos de estas 2 moléculas son los niisrnos, en
particular la secuencia alrededor del residuo clave de serina
La estructura tridimensional y el mecanismo de la catálisis son,tamhién muy
similares, lo cual sugiere que ambos han surgidode formaevolutiva de un polipéptido
ancestral común; la principal diferencia está en las cadenas latedes de los aminoácidos
que se encuentran en el sitio de unión del sustrato. Los aminoácidos con carga negativa que ocupan esta área en la molécula de tripsina facilitan la unión de cadenas
laterales de aminoácidos con carga positiva (arginina, lisina) en vez de los hidrofóbicos.
Clasiñcaaón y nomenclatura de ias enzimas
De lo estudiado hasta el momento se deduce que hay 2 propiedades fundamentales de las enzimas y todas ellas derivan de las características del centro activo: gran
eficiencia catalítica y elevada especificidad; esta última en sus 2 aspectos es la que
sirvede fundamento a la clasificación y nomenclatura de las enzimas.
Se toma como fundamento la especificidad de acción, con lo cual se establecen 6
grupos principales, teniendo en cuenta la reacción global que ellas catalizan; estos
gmpos o clases principales se dividen en subclases y subsubclases,según otras características del tipo de reacción como son los grupos involncrados, los cofactores neccsarios, etcétera.
Los grupos principales y su definición son:
1. Oxidorreductasas. Son aquellas enzimas que catalizan las reacciones de oxidorreducción, o sea, la transferencia de electrones o sus equivalentes entre un donante y
un aceptor.
2. Transferaias. Catalizan la transferencia de un grnpo químico entre un donante y un
aceptor; se excluyen aquéllas que transfieren electrones o sus equivalentes, pues
pertenecen a la clase anterior, y aquéllas en que el aceptor del grupo es el agua, pues
pertenecen a la clase siguiente.
3. Hidrolasas. Catalizan la ruptura de enlaces químicos con la participación de las
moléculas del agua.
4. Liasas. Catalizan reacciones en las cuales se produce la adición o sustracción de
grupos químicos a dobles enlaces.
5. Isnmerasas. Catalizan la interconversión de 2 isómeros.
6. Ligasas. Catalizan la unión covalente de 2 sustratos mediante la energía de hidrólisis
de nucleósidos trifosfatados, generalmente el ATP.
Nomenclatura
Existen 2 tipos de nomenclatura: la sistemática y la recomendada. La sistemática
utiliza los grnpos principales, describe la reacción y sólo se utiliza en revistas y textos
científicos donde se requiere de un elevado grado de precisión; para su uso existe un
código de 4 números donde el primero representa la clase, el segundo la subclase, el
tercero lasubsubclase y el cuarto el número deordendela enzima, que apareceen una
relación publicada por la Comisión de Enzinias (EC) de la Unión Internacional de
*ioquúnica y Biología Molecular, donde los autores deben consultar cada vez que
vana emplearla.
recomendada viene a ser una forma abreviada de la sistemática, su uso es
rom,j,,sobre todo en textospara estudiantes; en ambos casos se tiene en cuenta tanto
laepeeificidad de acción como la de sustrato y el nombre de la enzima termina en el
&joasa; ejemplo, para la reacción:
--
LACTATO
+
-
NAD*
PIRUVATO
+
NADH + H
EL uso de la nomenclatura sistemática nos llevaría al nombre siguiente
lactato:NAD-oxidorreductasa,o sea, que prácticamente describe la reacción.
Lanomenclatura recomendada tiene en cuenta la especificidad de sustrato, en este
para el lactato, y la especificidadde acción, se trata de una deshidrogenación, por
tantoel nombrede la enzima sería lactato deshidrogenasa. Para poder utilizar la nomenclatura recomendada, que se utiliza en este libro, es necesario conocer algunos
subgmpos de enzimas como:
1. Enirelas oxidorreductasas.
- Deshidrogenasas. Sustraen átomos de hidrógeno (casi siempre 2) de los sustratos
y los transfieren a una molécula aceptora que no es el oxígeno.
+ FAD
yH.
+H-C 11
COOH
COOH
COOH
I
1
HO-C-H
l
+ NAD
H-C-H
l
C=O
l
+ NADH+H
CH
I
COOH
-
+ FADH
C-H
~OOH
COOH
En el primer caso se trata de la succínico deshidrogenasa, en el segundo de la
málico deshidrogenasa.
Oxidasas. Oxidan los sustratos mediante el oxígeno como aeeptor de electrones.
COOH
COOH
H,+N-C-H
I
R
Arninoácidu
+ H'O
e
l
C=O
+ NH,
e?
FA D
1
R
Cctoácido
H,O,
01
Esta reacción la cataliza la aminoácido oxidasa.
Airioníaco
- Hidrosilasas. Catalizan la introducción dc funciones hidrosilo en sus sustratos
utilizando oxígeno rnolecular corno donante.
m-(--
I
H
I
+ ATF
'
L
n r ' - !c - ~
1 1 - C 011
FI-C
OH
11~-C- O H
H - C
OH
H-('-
H-(
i)H
l
l
OH
l
l
-
+ AnP
La priiiiera i.eacci611es c a h l i ~ a d apor la fructoquinaaa la srguii<lapor 1"
glicericoqninasa.
El resto de las traiisferasasreciben tioiiihresderivados del grupo que transfiereti
de
(transaniinasasde grupos arniiio. traiisiiietiiazasde iiietiim traiiscarlii~xila;i~
carhnxilns,ctcétcra).
3. ~1grupo de las bidrolasas es el más simple para nombrar, pues basta con hacer
te&nar el nombre del sustrato en el sufijoasa.
Esta enzima se denomina arginasa.
4. Las liasasson las más dificiles de nombrar,ejemplo las hidratasas, que adicionan
agua a los dobles enlaces.
COOH
I
H-C
COOH
I
HO-C-H
II
+ H20
C-H
I
l
A
7H-C-H
I
COOH
COOH
Furnánco
L- málica
Esta enzima se nombra fumanco hidratasa o simplemente fumarasa, aunque este
Último nombre no es correcto. Cuando actúan en reacciones biosintéticas reciben
el nombre de sintetasas.
HI
COOH
CH3-C,
e0
SCoA
Acetil-COA
+
I
y2
COOH
Oxalacético
Se nombra como citricosintetasa.
,
H,O HSCoA
U
H -C-CWH
I
HO-C-COOH
1
H-C-COOH
1
H
Cítrico
5 . Las isomerasas reciben diferentes nombres según los tipos de isómcros quc intcr.
\,ieiieii en la rrucciúii. Cumo regla se reserva el nombre de isornerasas para I;~\
<tii~iiii;~r
que interronvirrteii i~i,nirri,sde F1inri611.
La enzima cs la fosfohexosa isomerasa.
Las que intcrconsicrtcn isómcros dc posición sc dcsignan miltasas.
I n cstc caso sc llama fosfoglncomutasa.
[,as que interconvierteii epimeros se d c n o ~ ~ i i ~epiiiicrasus.
ian
HO-CHI
HO-CH,
En este caso sera la galactosafosfato epimerasa.
6. A las ligasas se les conoce rii general coiiio sintetasas y para nombrarlas generalmcntc sc utiliza el nombre del producto en vcz dcl sustrato, la acctil-COAsintctasa
cataliza la reacción siguiente:
CH,-T
#o
'OH
Acido acéticc
+ HS-CoA
+
Cociiriiiia A
ATP
+ CH,-C,
/,O
SCoA
AcetilbCaA
+
A M P + P-P
+ HO
Hace unos años la Comisión de Enziinas recomendb utilizar el término ligasas
pero como ata recomendación aún
Pestasenzimas y el de sintetasaspara las liwa~,
nosebageneralizado,en este texto se seguirá la denominación anterior.
Siempre se debe recordar que las enzimas son proteínas cuya funciún es la de
reacciones, por tanto, dehe existir una correspondenciaentre el nombre de la
e&a y la reacción que ellas catalhan, pues conociendo la reaccibn se puede deducir
el nombre,y a partir del nomhre puede inferirse la reacciún.
No obstante, existen algunas enzimas que recibieron nombres triviales por sus
descubridores y que la prictica ha consagrado como el caso de la pepsina, tripsina,
quimohipsina,etcétera.
Resumen
Las reacciones químicas que ocurren en los seres vivos son catalizadas por
pmt&as espeeífieas denominadas enzimas, éstas se caracterizan por presentar un
elevado poder cataiítico y una gran especiñcidad.
Aun criando cada enzima tiene su forma particular de actuar, en todas ellas se
p d e distingair un mecanismo general de acción en 2 etapas: la primera es la
& 6 n de la enzima con el sustrato y la segunda la transformación de éste. Este
M
onipone la existencia de un complejo enzima-sustrato cuya formación
ha sido comprobada por numerosos medios.
En todas las enzimas exkkn 2 sitios importantes que son el de reconocimiento
y el cataiítico, que juntos constituyen el centro acíivo de la enzima. La estructura
del centro acüvo está determinada por el eje wvalente de la cadena polipeptídica
que le da la forma, los grupos de ambientaaón, los grupos de unión y los grupos
cataütiam En launión enzima-sustratointervienen diferentestipos de interaeclones
wmolas hidmf6bicas, saünas, puentes de hidrógeno y hienas de Van der Waals; el
ambiente apolar del centm acíivo facilita el establecimiento de estas interacciones.
Las características estructurales y funcionales del centm activo son las que
conüem la especificidad y eficiencia cataütica a las e w h a s . La espeeiñadad de
Sostratoeoasisteen la propiedad que tienen las enzimas de actuar sobre un número
muy redncido de susúntas, generalmente uno, en tanto la especiñcidad de acción
determina que la enzima cataliza sólo una de las posibles transformaciones del
wstrato.
Moehos agentes físicosy químicas pueden alterar la estructura del centro acíiVO Y con ello el fuoeionamiento de la enzima, los agentes desnahvalizantes de
Pmteinas, las elevadas temperaturas, los cambios de pH y sustancias químicas
son algunos de estos agentes.
La unión enzima-sustrato puede pmduche por 2 mecanismos fundamentales
de m e r d o con el tipo de enzima, bien por el tipo Uave-cerradura o por Guste
hduddo.
La Mpsina y la quimotripsina son enzimas cuyos mecanismos de acción ilustran de manera adeeuada el funcionamientode las enzimas.
La espeeiñcidad de las enzimas sirve de base a su dasiñcaci6n y nomendatuA partir de la especificidad de acción se disünguen 6 grupos de enzimas:
~xidorreduetasas,transferasas, bidrolasas, liasas, isomerasas y ligasas. La nomendabuahduye tanto la espeeiñcidad de sustrato como la de acción. ~xisfene m í m s
que tienen nombres triviales como la pepsina, tripsina, etcétera que aunque no
*basados
en estos criterios se uoluao de manera cotidiana
Ejercicios
1. ¿Qué función desempeña en la formación del centro activo el plegamiento de la
cadena polipeptídica que da lugar a la formación de la estructura terciaria de la
proteína enzimática?
2. ¿Qué importancia tiene el hecho de que en el centro activo exista un ambiente
apolar?
3. ¿Pudiera inactivarse una enzima modificando grupos del centro activo que no
intervienen de forma directa en la catálisis?
4. ¿Por qué para la catálisis enzimática es necesario la formación del complejo enzima-sustrato? Discuta al menos 2 posibilidades.
5. ¿Por qué podemos afirmar que las enzimas funcionan de acuerdo con el principio
de la máxima eficiencia?
6. ¿Qué ventaja representa que el complejo ES se forme por un mecanismo de adaptación inducida y no por el mecanismo de llave y cerradura?
7. En el centro activo de una enzima existen 3 aminoácidos claves queson aspártico,
histidina y glutámico. ;Pudiera esto explicar por qué esta enzima es tan sensiblea
los cambios de pH?
8. Clasifiquey nombre las enzimas que catalizan las reacciones siguientes:
a) GlucosaóP + H_O
b) Alanina
Etilamina
c) Etanol + A
e) Ácido málico
Glucosa
+
+ Fosfato
CO,,
Acetaldehido + AH?.
+B
---f
f) Glutámico + ARNt + ATP
Ácido oxalacético
+
BH,
GlutamilARNt + AMP + PP.