CEFALEXINA

CEFALEXINA
HO
O
H2N
H
O
O
CH3
N
N
H
H
H
H2O
S
C16H17N3O4S . H2O
PM: 365,4
Anhidra
PM: 347,4
23325-78-2
15686-71-2
Definición - Cefalexina es el Ácido [6R[6,7(R*)]]-7-[(aminofenilacetil)amino]-3-metil8-oxo-5-tia-1-azabiciclo[4.2.0]oct-2-eno-2carboxílico, monohidrato. Debe contener no menos
de 95,0 por ciento y no más de 103,0 por ciento de
C16H17N3O4S, calculado sobre la sustancia anhidra
y debe cumplir con las siguientes especificaciones.
Caracteres generales - Polvo cristalino blanco
o casi blanco. Poco soluble en agua; prácticamente
insoluble en alcohol, cloroformo y éter.
Sustancia de referencia - Cefalexina SR-FA.
CONSERVACIÓN
En envases de cierre perfecto.
ENSAYOS
Identificación
A - Absorción infrarroja <460>. En fase sólida.
B - Absorción ultravioleta <470>. El espectro
de absorción ultravioleta de una solución de Cefalexina 1 en 50.000 debe presentar máximos y mínimos a las mismas longitudes de onda que una
solución similar de Cefalexina SR-FA. La absortividad, calculada sobre la sustancia anhidra, a la
longitud de onda de máxima absorción, aproximadamente 262 nm, debe estar comprendida entre 95,0
y 104,0 % de la de la Cefalexina SR-FA, considerando la potencia de la Sustancia de Referencia.
C - Aplicar la siguiente técnica cromatográfica.
Fase estacionaria - Emplear una placa para
cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromatografía) recubierta con gel de sílice para cromatografía con indicador de fluorescencia, de 0,25 mm de
espesor.
Fase móvil - Acetato de etilo, agua, acetonitrilo
y ácido acético glacial (42:18:14:14)
Solución muestra - Preparar una solución de
Cefalexina en agua, con la ayuda de ácido clorhídrico 0,1 N, con una concentración de aproximadamente 25 mg por ml.
Solución estándar - Preparar una solución de
Cefalexina SR-FA en agua, con la ayuda de ácido
clorhídrico 0,1 N, con una concentración de aproximadamente 25 mg por ml.
Procedimiento - Aplicar por separado sobre la
placa 5 µl de la Solución muestra y 5 µl de la Solución estándar, dejar secar las aplicaciones y desarrollar los cromatogramas hasta que el frente del
solvente haya recorrido aproximadamente tres cuartas partes de la longitud de la placa. Retirar la placa
de la cámara, marcar el frente del solvente, dejar
secar al aire y examinar bajo luz ultravioleta a
254 nm: el valor de Rf de la mancha principal en el
cromatograma obtenido a partir de la Solución
muestra se debe corresponder con el obtenido con
la Solución estándar.
Determinación de la rotación óptica <170>
Rotación específica: Entre +149° y +158°.
Solución muestra: 5 mg por ml, en Solución reguladora de ftalato neutralizada pH 4,4 (ver Soluciones reguladoras en Soluciones).
Cristalinidad
Colocar partículas de Cefalexina en aceite mineral sobre un portaobjetos de vidrio. Examinar la
mezcla empleando un microscopio óptico con luz
polarizada: las partículas deben presentar birrefringencia y posiciones de extinción cuando se gira la
platina del microscopio.
Determinación del pH <250>
Entre 3,0 y 5,5, determinado sobre una suspensión acuosa de aproximadamente 50 mg por ml.
Determinación de agua <120>
Titulación volumétrica directa.
8,0 %.
Entre 4,0 y
Sustancias relacionadas
Sistema cromatográfico - Proceder según se indica en Valoración, excepto que el caudal debe ser
aproximadamente 1,0 ml por minuto.
Solución A Disolver 1,0 g de 1pentanosulfonato de sodio en una mezcla de 1 litro
de agua y 15 ml de trietilamina.
Ajustar a
pH 2,5 ± 0,1 con ácido fosfórico.
Solución B Disolver 1,0 g de 1pentanosulfonato de sodio en una mezcla de 300 ml
de agua y 15 ml de trietilamina. Ajustar a
pH 2,5 ± 0,1 con ácido fosfórico, agregar 350 ml de
acetonitrilo, 350 ml de metanol y mezclar.
Fase móvil - Emplear mezclas variables de Solución A y Solución B. Hacer los ajustes necesarios
(ver Aptitud del sistema en 100. Cromatografía ).
Programar el cromatógrafo del siguiente modo:
Tiempo Solución A
(minutos)
(%)
Solución B
(%)
Etapa
0-1
1-33,3
100
1000
0
0100
33,3-34,3
0
100
Isocrático
Gradiente
lineal
Isocrático
Diluyente - Disolver 18 g de fosfato monobásico de potasio en 1 litro de agua.
Solución estándar A - Disolver una cantidad
exactamente pesada de Cefalexina SR-FA en Diluyente para obtener una solución de aproximadamente 0,08 mg por ml.
Solución estándar B - Disolver una cantidad
exactamente pesada de Cefalexina SR-FA en Diluyente para obtener una solución de aproximadamente 0,16 mg por ml.
Solución muestra - Pesar exactamente alrededor
de 25 mg de Cefalexina, transferir a un matraz
aforado de 5 ml, disolver en Diluyente, completar a
volumen con Diluyente y mezclar.
Procedimiento - Inyectar por separado en el cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
20 µl) de la Solución estándar A, la Solución estándar B y la Solución muestra, registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos de cefalexina en el cromatograma obtenido a partir de las
Soluciones estándar A y B y de todos los picos,
distintos al de cefalexina, en el cromatograma obtenido a partir de la Solución muestra. Graficar las
respuestas de los picos de cefalexina obtenidos a
partir de las Soluciones estándar A y B en función
de la concentración en mg por ml, calculada sobre
la sustancia anhidra. Hallar la ecuación de la recta
que mejor ajuste entre estos dos puntos y el cero. A
partir de la ecuación de la recta y de las respuestas
de los picos obtenidos con la Solución muestra,
determinar la concentración en mg por ml de cada
sustancia relacionada en el cromatograma de la
Solución muestra. Calcular el porcentaje de cada
sustancia relacionada. No debe contener más de
1,0 % de ninguna sustancia relacionada individual;
y la suma de todas las sustancias relacionadas no
debe ser mayor de 5,0 %.
Límite de dimetilanilina <570>
Cumple con los requisitos.
VALORACIÓN
Sistema cromatográfico - Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 254 nm y una columna de
25 cm  4,6 mm con fase estacionaria constituida
por octadecilsilano químicamente unido a partículas
porosas de sílice de 3 a 10 µm de diámetro, de baja
acidez. El caudal debe ser aproximadamente 1,5 ml
por minuto.
Fase móvil - Agua, acetonitrilo, metanol y
trietilamina (85:10:5:1,5). Disolver 1,0 g de 1pentanosulfonato de sodio, ajustar a pH 3,0 ± 0,1
con ácido fosfórico y desgasificar. Hacer los ajustes necesarios (ver Aptitud del sistema en 100.
Cromatografía).
Solución del estándar interno - Transferir
300 mg de 1-hidroxibenzotriazol a un matraz aforado de 1 litro, disolver en 10 ml de metanol, completar a volumen con Fase móvil y mezclar.
Preparación madre del estándar - Disolver una
cantidad exactamente pesada de Cefalexina SR-FA
en agua para obtener una solución de aproximadamente 1 mg por ml.
Preparación estándar - Transferir 10,0 ml de la
Preparación madre del estándar a un erlenmeyer
de 50 ml con tapón de vidrio, agregar 15,0 ml de
Solución del estándar interno y mezclar.
Preparación muestra - Pesar exactamente alrededor 100 mg de Cefalexina, transferir a un matraz
aforado de 100 ml, disolver en agua, completar a
volumen con agua y mezclar. Transferir 10,0 ml de
esta solución a un erlenmeyer de 50 ml con tapón
de vidrio, agregar 15,0 ml de Solución del estándar
interno y mezclar.
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) Cromatografiar la Preparación estándar y registrar
las respuestas de los picos según se indica en Procedimiento: los tiempos de retención relativos deben ser aproximadamente 0,35 para 1hidroxibenzotriazol y 1,0 para cefalexina; la resolución R entre los picos del estándar interno y de
cefalexina no debe ser menor de 5; la desviación
estándar relativa para inyecciones repetidas no debe
ser mayor de 2,0 %.
Procedimiento - Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
20 µl) de la Preparación estándar y la Preparación
muestra, registrar los cromatogramas y medir las
respuestas de los picos principales. Calcular la
cantidad de C16H17N3O4S en la porción de Cefalexina en ensayo.