Últimas investigaciones sobre pérdidas producidas por Leucosis Bovina en animales asintomáticos. Dr. Rodrigo Puentes Área de Inmunología – Dpto. Ciencias Microbiológicas Facultad de Veterinaria – UdelaR Uruguay - 2014 Leucosis bovina enzoótica Enfermedad infecciosa crónica causada por un Retrovirus Produce una infección irreversible del animal Enfermedad linfoproliferativa Presentación de la enfermedad – asintomáticos, Linfocitosis persistente y/o linfosarcoma Tiene mayor impacto en la producción lechera Herramientas de diagnóstico disponibles No existen vacunas Principales formas de transmisión de la Leucosis bovina Horizontal – Es la mas importante (85%). Principalmente vía iatrogénia, insectos hematófagos, contacto con sangre. Vertical (hasta un 15 %), ocurre ya sea vía transplacentaria o vía células presentes en calostro hacia la progenie. http://www.cals.cl/info_1.html Patogenia de la infección EXPOSICIÓN NO INFECCIÓN INFECCIÓN SEROCONVERSIÓN ASINTOMÁTICO 60% LINFOCITOSIS PERSISTENTE 30-35% LINFOSARCOMA 0,1-10% (Fenner y col., 1992; Chamizo, 2005) Diagnóstico de la enfermedad Sintomatología clínica y hemograma Técnicas serológicas – Principalmente IDGA y ELISA Técnicas moleculares – Nested PCR, Real time PCR Situación de la Leucosis bovina en el mundo 2003 – 12 países libres de Leucosis bovina en Europa 2011 – 8 países mas libres de Leucosis en Europa 2011 – Nueva Zelanda libre de Leucosis Polonia, Portugal e Italia – Libre en muchas regiones Australia Occidental – libre en ganado de leche Situación en Uruguay 45% 9% 20% 11% 46.6% 14% 72% 57% 77% Objetivo 3: Investigaciones sobre pérdidas producidas por animales seropositivos a Leucosis bovina Brenner et al., 1989 – Vacas seropositivas tienen menor sobrevida, disminución de la producción láctea (3.5%) y periodos secos mas largos. Wu et al., 1989 – Leucosis bovina aumenta la edad al primer parto. Jacobs et al., 1995 – En Canadá la eliminación (refugo) de vacas con ≥ 3 lactancias fue 27% mayor en animales seropositivos a Leucosis que en seronegativos. Ott et al., 2003 – 285 millones de dólares de pérdidas asociadas a baja producción de leche en productores de USA. Erskine et al., 2012 – Asociación negativa entre vacas infectadas con Leucosis y la producción de leche. Erskine et al., 2012 – La proporción de vacas con ≥ 3 lactancias disminuyó en establecimientos donde la prevalencia de Leucosis aumentó. Objetivo 3: Investigaciones sobre pérdidas producidas por animales seropositivos a Leucosis bovina Huber et al., 1981 – Leucosis no afecta la producción láctea. Jacobs et al., 1991 – No encontraron diferencias significativas en la producción láctea entre vacas seropositivas y seronegativas (2079 vacas de 61 establecimientos). Carli et al., 1991 – no encontraron diferencias significativas en la edad al primer parto. Heald et al., 1992 – No existe asociación entre Leucosis y producción de leche. Kale et al., 2007 –No encontraron diferencias significativas entre vacas seropositivas y seronegativas a Leucosis en cuanto a los parámetros productivos y reproductivos analizados. Objetivo 3: Investigaciones sobre pérdidas producidas por animales seropositivos a Leucosis bovina Pollari et al., 1992 – Mayor producción láctea en promedio en vacas seropositivas (400 animales estudiados). Wu et al., 1989 – Producción láctea fue significativamente mayor en vacas seropositivas a Leucosis bovina (189 vacas). Carli et al., 1991 – Producción láctea y días en lactación fue mayor en vacas seropositivas al virus. Efecto sobre el sistema inmune en animales seropositivos a Leucosis bovina Actividad de polimorfonucleares en animales con Leucosis bovina Las células estudiadas de los animales con Leucosis tuvieron menor actividad frente a E. coli comparadas con animales seronegativos. Souza et al., 2011 Objetivo 3: Efecto sobre el sistema inmune en animales seropositivos a Leucosis bovina Linfocitos B y T en animales con Leucosis bovina El virus cambia el porcentaje relativo de los linfocitos B y T en sangre periférica. Libera et al., 2012 Objetivo 3: Cambios de la respuesta inmune en la progresión de la Leucosis bovina Th2 Th1 El virus modula la respuesta inmune aumentando la respuesta Th2 en animales con Linfocitosis persistente. Kabeya et al., 2001 Objetivo 3: Respuesta a la vacunación contra E. coli en animales asintomáticos con Leucosis bovina P = .90 P = .0072 P = .057 Vacas de leche infectadas con BLV tuvieron una menor respuesta de anticuerpos contra J5 E. coli, (bacterina) comparando con vacas no infectadas. Erskine et al., 2011 Objetivo 3: Conclusiones sobre el efecto del VLB sobre las funciones del sistema inmune Resultados de múltiples estudios indican que la infección con Leucosis afecta negativamente la función del sistema inmune en bovinos, lo que disminuye la respuesta a la vacunación e infecciones oportunistas (Bartlett et al., 2014). Objetivo 3: Leucosis bovina en ganado de carne y leche y su relación con la edad de los animales Edad (P < .0001) Estados Unidos Leche = 23 a 46% Carne = 10% Japón Leche = 40,9% Carne = 28,7% Murakami et al., 2013 Existe una asociación directa entre al edad y la positividad a Leucosis bovina. La prevalencia es mayor en ganado de leche. Erskine et al., 2012 Objetivo 3: Impacto de Leucosis bovina en la producción de leche en los Estados Unidos 95/Kg/vaca/año de leche se pierde en EEUU por cada 10% de aumento de la prevalencia de Leucosis bovina en los tambos infectados con el virus (USDA NAHMS). US$ 285 millones de pérdidas anuales produce Leucosis bovina a los productores de los Estados Unidos Bartlett et al., 2014 Objetivo 3: Refugo de vacas con Leucosis bovina n = 3.849 vacas Productores = 112 A = negativas B = Positiva + C = Positiva + + D = Positiva + + + Vacas con mayores títulos de anticuerpos contra Leucosis bovina tuvieron un 40% mas de probabilidad de ser refugada. Bartlett et al., 2013 Leucosis bovina enzoótica en campo de recría de ganado lechero (2011 - 2013) -Seroprevalencia inicial y final -Transmisión en el tiempo -Impacto en la ganancia de peso -Impacto en parámetros reproductivos (manifestación de celo, número de servicios, tasa de concepción y porcentaje de preñez) en 2 periodos. Objetivos 1 y 2: Seroprevalencia inicial y final del estudio y tasa de transmisión • Tasa de transmisión anual fue de 39,8% con un intervalo de confianza entre 30,5% y 49%. Objetivos 1 y 2: Incidencia de seropositivos al VLB por sangrías % 30 “Cuarentena” Caravaneo Vacunaciones Tuberculina Desparasitación Descorne % Nuevos Positivos 25 Gestación Egreso 20 15 Revacunaciones Sang. Brucelosis 10 Sincronización Detección Celo IA Diagnóstico Gestación Vacunación Sincronización Detección Celo IA Diagnóstico Gestación Vacunación 3 SANGRÍA 4 SANGRÍA 5 0 1 SANGRÍA 2 SANGRÍA 5 SANGRÍA Objetivos 1 y 2: Comparación entre la edad de los animales y la serología al VLB % 100 90 80 70 69 60 (52/75) 76 (126/166) 50 90 (9/10) Seronegativos 40 Seropositivos 30 20 10 31 (23/75) 24 (40/166) 0 DL 2 dientes 10 (1/10) ≥ 4 dientes p= 0,28 Objetivo 3: Ganancia de peso vs serología al VLB Parámetros Media Desvío Seronegativos Estandar Error Estándar n Media Desvío Seropositivos Estandar Error Estándar n PV1 (Set 2011) PV3 (Set 2012) Ganancia de Peso 185,73 350,03 164,29 30,61 45,82 34,34 3,63 5,43 4,08 71 71 71 197,79 358,25 160,46 43,54 50,92 32,44 3,15 3,68 2,35 191 191 191 • El promedio de ganancia de peso en el grupo de animales seronegativos fue de 164,3 kg y la de los seropositivos fue de 160,5 kg (p=0,58). Corregido por P.V. inicial: 163,6 y 160,7 kg respectivamente. El virus no afectó la ganancia de peso de los animales en el período. Objetivo 3: Manifestación de celo en animales positivos a Leucosis. % 100 90 90 87 80 70 60 50 55/61 40 165/190 30 20 10 10 6/61 13 25/190 0 Seronegativas No Manifestación de celo Seropositivas Manifestacion de celo p >0,05 Objetivo 3: Número de Servicios por animal: La presencia de anticuerpos contra Leucosis no influye en el número de servicios requeridos por animal (p=0,60). Del análisis de las vaquillonas inseminadas en ambos períodos reproductivos, se pudo determinar que: No existe asociación entre la preñez y la serología a Leucosis entre negativas y positivas (p=0,38). Tasa de Concepción General según período reproductivo: Período Reproductivo Vaquillonas Vacías Vaquillonas Preñadas Junio-Julio 35/180 (19,44%) 145/180 (80,56%) Noviembre-Diciembre 17/71 (23,94%) 54/71 (76,06%) p = 0,42 Objetivo 3: Tasa de concepción por período reproductivo Tasa de Concepción 100 93,33a 90 80 77,5a 81,43a 66,67b 70 60 Negativas 50 Positivas 40 31/40 114/140 28/30 52/78 30 20 10 0 Jun-Jul Nov-Dic Período Reproductivo p = 0,005 Las vacas seropositivas tuvieron un 26% menos de concepción en el periodo Nov-Dic. Objetivo 3: Asociación de Leucosis bovina con enfermedades que afectan la reproducción en vacas lecheras (2010-2014) - IBR - BVD - Leptospira Leucosis Bovina - Brucelosis - Neospora - Clamidiosis - Neosporosis 114/140 28/30 Objetivo 3: Resultados preliminares (n=238) 100 100 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 98,4 99,5 86,6 81 80 78,8 66 63,7 54,5 52,5 47,5 45,5 36,3 34 20 21,2 19 13,4 1,60,5 0 0 POS NEG CLAM POS NEG NEO POS NEG LEPTO BLV POS POS NEG BRUC POS NEG IBR POS NEG BVD BLV NEG Puentes et al., 2014 Objetivo 3: Medidas de manejo y control para disminuir la transmisión de Leucosis bovina Sprecher et al., 1991 – Disminución de la prevalencia de Leucosis bovina de 44% a 17% en 2 años sin eliminación de positivos, aplicando las siguientes medidas: CAMBIO DE AGUJAS CAMBIO DE GUANTES PARA EXAMEN REPRODUCTIVO DESINFECCIÓN DE PINZA PARA CARAVANEO DESCORNE POR CAUTERIZACIÓN Prevalencia de Leucosis en un establecimiento lechero SUSTITUTO LÁCTEO Prevalencia TRATAMIENTO DEL CALOSTRO 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Tiempo en meses Objetivo 3: Medidas de manejo y control para disminuir la transmisión de Leucosis bovina Erskine et al., 2012 – La cantidad de examenes reproductivos (tactos) por vaca está positivamente asociado a la prevalencia de Leucosis (p = 0.03). Por lo tanto, el cambio o desinfección de guantes en tactos rectales y en inseminación artificial, puede minimizar la transmisión del virus. Por otro lado, el uso exclusivo de inseminación artificial (IA) está asociado con la disminución de la prevalencia de Leucosis, en comparación con la combinación de IA y toros positivos. Varios estudios demuestran que el control de las moscas también es un factor de riesgo importante para la transmisión de Leucosis. Monitoreo en suero o leche mediante kits de ELISA comerciales Segregación del rodeo positivo, mantenenimiento de rodeos cerrados y eliminación de positivos son medidas que han demostrado ser eficaces para disminuir la prevalencia de Leucosis bovina (Bartlett et al., 2014) Objetivo 3: Control mediante selección genética (BoLA-DRB3.2) Juliarena et al., 2013 – 23% (27/119) de vacas con el alelo del gen BoLADRB3.2 que confiere resistencia a la infección tuvieron una alta carga viral. La selección genética puede ser mas difícil que una simple selección de vacas con el gen DRB3.2. Objetivo 3: Consideraciones finales Medidas de manejo deben ser implementadas con el fin de disminuir la prevalencia a tal punto que se justifiquen la aplicación de programas de control económicamente rentables (detección-segregación o detección-eliminación de positivos) (Bartlett et al., 2014). Identificar las principales vías de transmisión en cada establecimiento, para un mejor programa de control de la enfermedad (Bartlett et al., 2014). La prueba de ELISA en leche es una buena estrategia para un programa de monitoreo y control de la Leucosis bovina Las principales pérdidas asociadas a la infección subclinica están relacionadas a la producción de leche y a la longevidad de la vaca. Es posible mantener un establecimiento negativo a Leucosis bovina aunque la mayoría de los establecimientos del Departamento tengan animales positivos al virus (Bartllet et al., 2014). A medida que más países mantienen o intentan erradicar el virus de la Leucosis bovina, el mercado de exportación de productos lácteos para los países positivos podría disminuir e intensificarse las demandas para análisis serológicos.