Formulario para presentación de Cursos del Programa de Posgrados NOMBRE DEL CURSO: …Herramientas de la Biología celular y su investigación en Salud Animal.…………………………………..……… utilidad en la Indicar si este Curso, o parte del mismo, se ofrece al Programa de Educación Continua: _NO_ NOMBRE DEL/LOS COORDINADOR/ES: Aldo Calliari, Silvia Llambí, Ana Meikle. …………………………………………………………………………………………….……………… Nombre de los Docentes invitados: Nacionales…......................…………………………………………………………………………..… Regionales…………………………………………………………………………….……............…… Internacionales ............................................................................................................................. FECHA DE INICIO…1 de agosto..… CARGA HORARIA: 60 hs totales CUPO: FECHA DE FINALIZACIÓN…29 de agosto....… PROPUESTA DE CRÉDITOS..4. No X Sí Cantidad …9……………… DINÁMICA Y EVALUACIÓN DEL CURSO: X Clases prácticas: Laboratorio: Seminario individual: Seminario grupal: Otros: Examen parcial Examen final Clases teóricas: X X Talleres: X Evaluación continua ___________________________________________________________________________________________ TRANSMISIÓN POR VIDEOCONFERENCIA (Por el momento limitada a Reg. Norte- Salto, EEMAC-Paysandú, y Montevideo) Lugar de transmisión ___________________________ Lugar de recepción ___________________________ El docente responsable realizará las gestiones necesarias en Facultad (UPEI-UGESA) y en los otros puntos de transmisión- recepción de la videoconferencia. 1 PROPUESTA DE 3 MIEMBROS PARA INTEGRAR EL TRIBUNAL EXAMINADOR (2 como Mínimo docentes de Posgrado) 1…Aldo Calliari………………………………… 2…Silvia Llambí………………………………… 3…Ana Meikle………………………………… 4…………………………………… 5…………………………………… ________________________________________________________________ FORMULARIO MODIFICADO POR RESOLUCIÓN DEL CAMD DEL 19 de marzo de 2014 2 Herramientas de la Biología celular y su utilidad en la investigación en Salud Animal. Justificación de la Propuesta: La Biología Celular es una disciplina con desarrollo académico importante en aquellas instituciones que imparten enseñanza o llevan adelante actividades de Investigación y Desarrollo en el área biomédica. En la Facultad de Veterinaria la Biología Molecular y Celular tiene un desarrollo apenas incipiente. Esto implica por ejemplo, que existan pocos recursos humanos formados en el área y por tanto poco acceso a sus aproximaciones metodológicas para su ulterior aplicación tanto a la investigación científicas como a otras temáticas. Atento a lo anterior, se propone el desarrollo de un curso teórico-práctico, dirigido a estudiantes de Posgrado (maestría y doctorado), con el objetivo de poder aportarles herramientas conceptuales y prácticas que puedan serles útiles para el diseño y desarrollo de sus tesis en las áreas de la fisiología o salud animal. Objetivos: introducir al estudiante en los conceptos y destrezas básicas en el uso de algunas herramientas de rutina en Biología Celular y con potencial aplicabilidad al estudio de la fisiología y salud animal. La presente versión del curso se enfoca en un conjunto pequeño de herramientas y aplicaciones, las cuales se irán rotando en versiones sucesivas del curso. Metodología: curso teorico-práctico organizado en diferentes módulos temáticos independientes. Cada estudiante deberá cursar los 4 módulos en los que consiste el curso. Carga horaria: 16 hs teóricas y 42 hs prácticas/estudiante. Total: 4 semanas (1 módulo por semana). Cupo: 9 estudiantes. Evaluación: la evaluación será mediante una prueba escrita e individual al final del curso. Docentes Responsables: Aldo Calliari, DMV, PhD; Silvia Llambí, DMV, PhD; Ana Meikle, DMV, PhD. Fecha tentativa: 1 al 29 de agosto de 2014. Módulo 1. Cultivo de células eucariotas. (A. Calliari) Contenido Teorico: (2 hs) - Cultivos primarios y líneas celulares. Diferencias y usos. - Medios de cultivo, suplementos y sustratos de adhesión. Contenido Práctico: (10 hs) - Cultivo de células de línea fibroblástica o epitelial (NIH-3t3, HEK 293T, VERO). Plaqueo, mantenimiento, repique y criopreservación. Modulo 2. Separación e identificación de proteínas por western blot. (A. Calliari) Contenido Teórico (1 h): - Principios Generales. Utilidades. Protocolos básicos. Contenido Práctico:(10 hs): - Obtención de extractos proteicos. Electroforesis y Detección de proteínas específicas por western blot. - Análisis de imagenes y cuantificación. Módulo 3. Introducción a la citogenética en animales domésticos (Silvia Llambí; Colaboradores: Rody Artigas y María Montenegro). Contenido teórico (2 hs): - Generalidades, clasificación y principales anomalías cromosómicas en animales domésticos (numéricas, estructurales). Contenido Teórico - práctico Nº1 (4 hs): - Condiciones de toma y remisión de muestras para estudios cromosómicos, preparación de medio de cultivo, siembra de muestras. Contenido Teórico - práctico Nº2 (12 hs): - Procesamiento de cultivo linfocitario, Procesamiento de cultivos en monocapa (cultivo primario vs Línea celular). Preparación de láminas. Bandeo cromosómico G Observación y digitalización de imágenes. Confección de un cariotipo. Reconocimiento cromosómico en diferentes especies domésticas. Observación y reconocimiento de alteraciones cromosómicas en animales domésticos. Módulo 4. Identificación de Transcriptos específicos y proteínas en tejidos animales: valor diagnóstico y predictivo (A. Meikle; Colaboradores: M. Carriquiry, P. Pessina, V. de Brun, I. Sartore). Contenido teórico (3 hs): - Principios generales del PCR en tiempo real. Utilidades. Protocolos básicos. - Principios generales del Inmunohistoquímica. Utilidades. Protocolos básicos. Contenido teórico-practico (4 hs): - Determinación de transcriptos en tejido tiroideo sano y carcinoma tiroides en caninos. - Determinación de la expresión génica en útero y oviductos en animales bajo restricción alimenticia. Contenido practico (10 hs): - Extracción de ARN - Técnica de PCR-tiempo real - Interpretación de datos - Inmunohistoquímica: demostración de la técnica e interpretación de resultados Módulo 1. Cultivo de células eucariotas. Del 4 al 8 de agosto. Docente Responsable del Módulo: Aldo Calliari (Área Biofísica – Depto BMC). Lunes 4 Teórico : (9 a 10:30) Libre - Cultivos primarios y Teóricos: Salón de Post líneas celulares. Grados Diferencias y usos. (Teórico) - Medios de cultivo, suplementos y sustratos de adhesion.(Teorico) Prácticos: Laboratorio de Virología (Depto Práctico: (11:00 a Microbiología). 12:30). Cultivo de células de línea. Descongelado y plaqueo de NIH3T3 y HEK 293. Martes 5 Miércoles 6 Práctico: (9:00 a 11:00) Libre - Observación microscópica de ambos cultivos. - Repique celular (ambos cultivos). - Colección de muestras para bioquímica de proteínas (modulo 2). Jueves 7 Viernes 8 Libre Módulo 2. Separación e identificación de proteínas por Western Blot. Del 11 al 15 de agosto. Docente Responsable del Módulo: Aldo Calliari (Área Biofísica – Depto BMC). Lunes 11 Teóricos; Salón de Post Teórico (9 a 10:30). Grados . - Principios Generales. Utilidades. Protocolos básicos. Práctico (11:00 a Prácticos: Laboratorio 12:30). de BQ/BF, Depto Obtención de BMC. extractos proteicos. - Cuantificación y preparación de la muestra. Martes 12 Práctico (9:00 a 12:30). - Preparación de geles y soluciones. Electroforesis y transferencia. Monitoreo (rojo ponceau). - Bloqueo e incubacion con anticuerpos primarios. Miércoles 13 Incubación con Libre. anticuerpos secundarios. - Revelado (quimio luminiscencia)- Cuantificación de la señal (bandas). Jueves 14 Viernes 15 Libre. Módulo 3. Introducción a la citogenética en animales domésticos. Del 18 al 22 de agosto. Docente Responsable del Módulo: Silvia Llambí (Área Genética-FVET) Docentes Colaboradores en teóricos-prácticos: Rody Artigas y María Montenegro (Área Genética-FVET) Lunes 18 Teóricos: Salón de Post Teórico (9 a 11:30hs). Grados . Generalidades, clasificación y Teórico-Práctico: Salón principales anomalías de Postgrados cromosómicas en animales domésticos Prácticos: Laboratorio (numéricas, del Área Genética estructurales). Martes 19 Miércoles 20 Jueves 21 Viernes 22 Teórico-Práctico (de 9 a 10 hs en Salón de Posgrados y 10 a 13 en Lab. Área Genética). Teórico-Práctico (de 9 a 10 hs en Salón de Posgrados y 10 a 13 en Lab. Área Genética). Teórico-Práctico Teórico-Práctico (de 9 a 10 hs en Salón de Posgrados y 10 a 13 en Lab. Área Genética). Teórico-Práctico Teórico-Práctico (de 9 a 10 hs en Salón de Posgrados y 10 a 13 en Lab. Área Genética). Introducción al tema - Condiciones de toma y remisión de muestras para estudios cromosómicos, preparación de medio de cultivo, siembra de muestras. Introducción al tema - Procesamiento de cultivo linfocitario, Procesamiento de cultivos en monocapa (cultivo primario vs Línea celular). - Confección de un cariotipo. Introducción al tema Preparación de láminas. Bandeo cromosómico G Observación y digitalización de imágenes. Reconocimiento cromosómico en diferentes especies domésticas. Introducción al tema - Observación y reconocimiento de alteraciones cromosómicas en animales domésticos. Módulo 4. Identificación de transcriptos específicos y proteínas en tejidos animales: valor diagnóstico y predictivo. Del 25 al 29 de agosto. Docente Responsable del Módulo: Ana Meikle (Laboratorio de Técnicas Nucleares – FVET). Docentes Colaboradores en teóricos-prácticos: M. Carriquiry, P. Pessina, V. de Brun, I. Sartore (Laboratorio de Técnicas Nucleares – FVET). Lunes 25 Teóricos; Salón de Post Feriado Grados . Prácticos: Laboratorio de Técnicas Nucleares Martes 26 Miércoles 27 Jueves 28 Viernes 29 Teóricos (de 9 a 10:30hs). - Principios generales del PCR en tiempo real. Utilidades. Protocolos básicos. - Principios generales de la Inmunohistoquímica. Utilidades. Protocolos básicos. 11-12:30 hs Teórico - Prácticos (de 9 a 10:30 hs). - Determinación de transcriptos en tejido tiroideo sano y carcinoma tiroides en caninos. 11-12:30hs Determinación de la expresión génica en útero y oviductos en animales bajo restricción alimenticia. Práctico (de 9 a 15 hs). - Extracción de ARN - Técnica de PCRtiempo real - Interpretación de datos Práctico (de 8 a 16hs). - Inmunohistoquímica: demostración de la técnica e interpretación de resultados.