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UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO INDICE INTRODUCCIÓN………………………………………………………………… 3 OBJETIVOS……………………………………………………………………… 6 CAPITULO I………………………………………………………………………. 7 1.1 7 El antes del ADN y su utilización primaria………………………….. CAPITULO II……………………………………………………………………… 18 2.1 ADN FORENSE O GENÉTICA FORENCE………………………………. 18 2.2 GENETICA……………………………………………………………………. 18 2.3 DEFINICIÓN DE GENETICA FORENSE…………………………………... 18 2.4 Bases Genéticas…………………………………………………………….. 21 2.5 Análisis de ADN……………………………………………………………… 23 2.6 OBTENCIÓN DE LAS MUESTRAS DE ADN……………………………. 24 2.7 LIMITACIONES DE LA PRUEBA DEL ADN……………………………… 25 CAPITULO III....……………………………………………………………………. 27 3. ADN FORENSE EN TELA DE JUCIO…………………………………….. 27 3.1 ADN mitocondrial……………………………………………………………. 28 3.1.1 Utilización el ADN mitocondrial………………………………………. 28 a) Pruebas de Maternidad………………………………………………… 29 b) Estudios de Hermandad……………………………………………….. 29 c) Estudios Genealógicos………………………………………………… 29 d) Un Caso Forense……………………………………………………….. 29 3.2 ANÁLISIS DEL POLIMORFISMO………………………………………….. 30 3.2.1 GENETICA FORENSE…………………………………………………… 31 a) Los grupos sanguíneos al ADN……………………………………… 31 b) Poder identificativo de los ADNs forenses…………………………. 31 c) Prueba de ADN Forense………………………………………………... 31 d) Propósito de la prueba forense de ADN……………………………... 31 3.3 ADN NO CODIFICANTE E INTIMIDAD PERSONAL……………………....... 32 ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 1 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO 4. CRIMINALISTAS……………………………………………………………….. 34 4.1 Investigadores de la Escena del Crimen………………………………….. 34 4.2 Muestras forenses y su recogida con vistas al análisis de ADN…….. 35 CAPITULO IV……………………………………………………………………….. 43 CONCLUSIONES…………………………………………………………………... 43 CAPITULO V………………………………………………………………………… 44 ANEXOS……………………………………………………………………………… 44 CAPITULO VI………………………………………………………………………… 45 BIBLIOGRAFÍA:……………………………………………………………………… 45 ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 2 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO INTRODUCCIÓN Actualmente la genética juega un papel muy importante tanto dentro de la medicina como del derecho. Antes de entrar de lleno al tema, debemos saber que es la genética y la genética forense. La genética viene del termino “Gen” que proviene del griego y significa raza, generación. Es una rama de las ciencias biológicas cuyo objeto de estudio son los patrones de herencia. La genética forense es la parte de la genética aplicada a la medicina legal y al derecho. La genética forense nos va a ayudar en la investigación criminal y en la investigación de la paternidad. La base de la genética es el ADN (ácido desoxirribonucleico), que se encuentra en las células, específicamente en el núcleo, por lo que las células sin núcleo no sirven en este caso. Los genes se forman de segmentos de ADN, la molécula que codifica la información genética en las células. El ADN controla la estructura, función y el comportamiento de las células y puede crear copias de sí mismo. Químicamente, el ADN es un largo polímero de unidades simples llamadas nucleótidos con un armazón hecho de azúcares y grupos de fosfato unidos alternativamente entre sí mediante enlaces de tipo éster. Unida covalentemente a cada azúcar se encuentra una base nitrogenada (adenina, guanina, citosina o timina). La disposición secuencial de estas bases a lo largo de la cadena es la que codifica la información. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 3 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO Esta información se interpreta utilizando el código genético, que especifica la secuencia de los aminoácidos de las proteínas. El código se interpreta copiando los tramos de ADN en un ácido nucleico emparentado: el ARN (acido ribonucleico). El código genético es la regla de correspondencia entre la serie de nucleótidos en que se basan los ácidos nucleicos y las series de aminoácidos en que se basan las proteínas. Es como el diccionario que permite traducir la información genética a estructura de proteína. ADN uno de los descubrimientos más importantes en la biología en el siglo XX fue la naturaleza química y la estructura tridimensional del material genético, ADN. En 1953, James Watson y Francis Crick propusieron el modelo de la doble hélice con las bases dirigidas hacia el centro, perpendiculares al eje de la molécula (como los peldaños de una escalera caracol) y las unidades azúcar-fosfato a lo largo de los lados de la hélice (como las barandas de una escalera caracol). El ADN es un ácido nucleico que tiene tres tipos de componentes: Un Azúcar: Es un glúcido que contiene cinco átomos de carbono. En el ADN el azúcar es la desoxirribosa. Un Fosfato y Bases nitrogenadas. El ADN es un polímero lineal con cuatro diferentes bases nitrogenadas, dos purinas, Adenina (A) y Guanina (G) y dos, pirimidinas, Citosina (C) y Timina (T) en una secuencia precisa. Esta secuencia codifica la información genética. En el ADN cada secuencia de tres bases, llamado triplete, codifica un aminoácido. Una serie de tripletes establecen el orden específico según el cual los aminoácidos se disponen en la cadena. Un gen es una secuencia de tripletes, que contiene el código de un polipéptido. El polipéptido puede ser una proteína completa y en otros casos carios poli péptidos deben unirse para formar la proteína. Sabemos que el ADN se localiza en los cromosomas, pero no linealmente y si la doble hélice se estirara a lo largo del ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 4 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO cromosoma, algunos de los cromosomas mayores tendrían más de un metro de longitud. El apareamiento de las bases nitrogenadas en el ADN es de Adenina con Timina (A-T) y Citosina con Guanina (C-G). Por consiguiente, si una cadena se deletrea AGTCCA, la cadena complementaria debe ser TCAGGT. Es teóricamente posible un número casi infinito de variaciones en la disposición de las bases a lo largo de una cadena de nucleótido. En cualquier posición existen cuatro posibilidades; por consiguiente, hay 4X4X4= 64 posibles combinaciones de tripletes de bases, o codones. La función del ADN consiste en dirigir la producción de polipéptidos, cuyas moléculas están formadas por aminoácidos dispuestos según una secuencia específica y unidos por medio de enlaces peptídicos. Las propiedades de un polipéptido dependen de la ordenación de los aminoácidos dentro de su molécula. Como solo existen 20 aminoácidos y 64 posibles códones, la mayoría de los aminoácidos son especificados por más de un codón ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 5 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO OBJETIVOS OBJETIVOS GENERALES Realizar identificación humana a través del análisis del material hereditario (ADN), en la Genética forense como unas ciencias de criminalísticas OBJETIVOS ESPECIFICOS Conocer las bases teórico en que se fundamenta el estudio del material hereditario (ADN) con fines de identificación humana. Conocer como se realiza la colecta, levantamiento, embalaje y preservación de material biológico, en el lugar de los hechos o del hallazgo, para su estudio por Genética forense. Conocer como se presenta la evidencia biológica, que fue analizada por Genética forense, en el nuevo sistema procesal penal. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 6 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO CAPITULO I 1.1 El antes del ADN y su utilización primaria El descubrimiento de la molécula de ADN, ha influido tanto en la historia de la humanidad que es factible referirse a un momento pre-ADN y un momento postADN. Ha sido una magnífica herramienta que incidió tanto en el ámbito científico (descubrimientos de causas de enfermedades y sus posibles curas), como social (en la resolución de controversias judiciales y calidad de vida de las personas). Inicia con los experimentos del monje austriaco Gregor Mendel alrededor del año 1865. A este respecto, se aporta: “Durante muchos años, esta ausencia de una teoría que explicara certeramente los fenómenos de la herencia, fue un obstáculo evidente para los incipientes naturalistas europeos. Desde 1865, Gregor Mendel –un monje austriaco nacido en Heizendorff, Moravia en 1822- sintetizó más de diez años de trabajo experimental en conceptos agrupados en un par de leyes, a partir de las cuales se podían fundar las bases del estudio científico de la herencia.” Sin embargo, el gran descubrimiento de Mendel no fue aceptado en un primer momento cuando realizó sus experimentos con plantas y por ende, no fue reconocido el gran valor y la envergadura de los cambios que esto acarrearía. Los datos que develaron aquellos experimentos son la base de lo que aún en estos días se utiliza con respecto al ADN y la herencia genética. Estos son el origen de los estudios y conocimientos actuales sobre el fenotipo y genotipo, realizados para todas especies de seres vivos estudiados. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 7 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO En palabras de los autores Yunis, se resume el aporte de G. Mendel de la siguiente manera: “Definió la mecánica de la herencia por medio de sus famosos experimentos de los guisantes. Predijo, como tantas veces ha ocurrido en la ciencia, elementos que solo la investigación posterior demostraría. Proclamó que los caracteres (genes) que controlan las características son dos: uno materno y otro paterno; ello quiere decir que señaló el carácter diploide representado por dos pares de cromosomas, y demostró la dominancia y la recesividad de los caracteres; los primeros se transmiten enteros y los segundos quedan latentes en el proceso.” el redescubrimiento de la teoría de Mendel: “Formalmente, se dice que la genética nace con el “redescubrimiento” de la obra de Mendel –que de manera independiente- iniciaron en 1900, Hufo de Vries en Holanda, Carl Correns en Alemania y Erick Tschemark de Austria. Estos científicos basaron sus propios trabajos en la “piedra angular” de la obra de Mendel.” Con todos estos acontecimientos, el ADN llega a la vida impactando y falseando las bases de muchas concepciones aletargadas en el tiempo. Incluso alimenta ambiciones científicas como lo son la decodificación y el estudio del genoma humano. “El descubrimiento en 1980 de los polimorfismos de ADN en el genoma humano y la demostración de que este rico acervo de variabilidad está ampliamente distribuido en las poblaciones humanas, permitió que los científicos forenses reconocieran el enorme potencial que ofrece el ADN para identificar criminales a partir de las muestras biológicas dejadas en la escena del crimen. Así, poco tiempo después, los tribunales de países como Inglaterra y EE.UU. admitieron las evidencias de ADN en litigaciones criminales y civiles (Chakraborty y Kidd 1991), lo que a su vez favoreció que su utilización se extendiera rápidamente a todo el mundo.” ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 8 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO 1.2 CONCEPTO, ESTRUCTURA Y CLASIFICACIÓN DEL ADN Concepto: El ácido desoxirribonucleico (ADN), es necesario hacer referencia a los cromosomas y a los ácidos nucleicos celulares, ya que, los primeros están formados por moléculas de ADN y los segundos son los componentes de ésta molécula. Los cromosomas y por ende el ADN, se encuentran ubicados en el núcleo de la célula, el cual está en el interior del citoplasma y su forma es más o menos redondeada. El núcleo funciona como una torre de control que dirige y ordena todo lo que ocurre dentro de la célula; es “su cerebro”. Es importante porque, como se dijo anteriormente, en su interior alberga el material genético que contiene toda la información necesaria para que la célula funcione, como planos con instrucciones en los que están escritas las características y la forma de actuar de cada célula. Esta información dirige la actividad de la célula y asegura la reproducción y el paso de sus propias características a sus descendientes. El núcleo está rodeado por una cubierta que lo separa del citoplasma, la membrana nuclear. Los cromosomas están dentro del núcleo de las células y son estructuras formadas por ácido desoxirribonucleico (ADN) y proteínas. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 9 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO FIGURA 1 El ADN y los cromosomas Los cromosomas son elementos que existen en el interior del núcleo de las células, desempeñan un papel importante en la división celular y en la transmisión de caracteres hereditarios. Fueron observados por primera vez en 1848 por Wolhem Hormeister. A principios del siglo XX, a raíz del redescubrimiento de los trabajos de Mendel y de la descripción microscópica de los procesos de división celular, se localizaron en ellos los genes dando inicio, desde ese momento, a la conocida teoría cromosómica de la herencia. Los cromosomas solo son visibles al microscopio óptico durante la meiosis y mitosis; es especialmente en la ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 10 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO metafase7 y anafase8 cuando se hacen aparentes mediante el procedimiento de teñirlos con colorantes. Se caracterizan por ser un cuerpo filiforme, en él se haya un adelgazamiento variable llamado centrómero que divide al cromosoma en dos brazos de longitud desigual. Este centrómero también le sirve para dirigir los movimientos de los cromosomas durante la división celular, puesto que es por medio de este que se unen al huso acromático. FIGURA 2 El cromosoma Esta es la estructura básica del cromosoma, se nota claramente el centrómero que da origen a los dos brazos del cromosoma los cuales pueden ser de diferente longitud ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 11 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO El filamento cromosómico está formado fundamentalmente por ácido desoxirribonucleico (ADN) y en relación con la entrada en actividad de algunos genes, ciertas zonas del cromosoma pueden presentar cantidades variables de ácido ribonucleico (ARN) que a veces forma masas individuales en el núcleo celular. Los cromosomas pueden ser divididos en segmentos, los cuales son llamados genes que tienen un lugar de ubicación llamado locus. Los genes se presentan en pares que se denominan alelos. Si estos alelos son iguales el organismo será homocigoto con respecto a la información que éste contenga. Si son alelos diferentes el organismo reportará ser heterocigoto para esa característica la cual será manifestada fenotípicamente dependiendo si ésta es dominante o recesiva. Al respecto se expone: Los genes pueden existir en dos formas alternativas, las cuales se llaman alelos. Se dice que un organismo es cuando los alelos son diferentes y homocigoto cuando los alelos son iguales. Un organismo hereda un alelo de la madre y otro del padre. Los alelos pueden ser dominantes o recesivos. Generalmente, en un heterocigoto solo el alelo dominante es la versión funcional del gen, es decir, es la única que puede expresarse para formar un producto genético funcional. El alelo recesivo contiene una mutación que destruye la información biológica que lleva el gen.” Los organismos, según el número de cromosomas de que se conformen son: diploides o haploides. Los primeros se caracterizan por tener una doble copia de cada cromosoma es decir, existen en par. Y los segundos tienen una sola copia tal es el caso de las bacterias y los virus. La mayoría de los organismos que existen son diploides lo cual crea un gran tesoro evolutivo por el hecho de que si la información genética está en pares puede ser mejor perpetuada. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 12 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO En los organismos diploides cada mitad es aportada por uno de los progenitores, lo cual asegura que el acervo genético de cada nuevo ser será de 50% de cada uno de ellos. La especie humana, por ejemplo, está formada por 46 cromosomas de los cuales 22 de ellos tienen parejas porque comparten la misma información genética. Los 2 cromosomas restantes son los determinantes del sexo: XX femenino y XY masculino. Todas las especies animales y vegetales tienen un número constante y determinado de cromosomas que constituyen su cariotipo.10 La determinación de la especie dependerá del número de cromosomas que la conformen los cuales permanecen invariables a través del tiempo. Así, la especie humana se encuentra formada por 23 pares de cromosomas. FIGURA 3 Cariotipo humano femenino ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 13 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO Muestra 23 pares de cromosomas organizados en 8 grupos según el tamaño y la forma. La mitad de los cromosomas proceden del padre y la otra mitad de la madre. Las diferencias entre individuos reflejan la recombinación genética de estos juegos de cromosomas al pasar de una generación a otra. Es importante destacar que cada especie tiene un “mapa” característico de la estructura del ADN, denominada genoma, el cual es la totalidad de la información genética presente en un organismo. Cada ser vivo posee un genoma diferente conformado por números de componentes químicos los cuales determinarán su especie. Los ácidos nucleicos, por su parte, también se encuentran en el núcleo de las células conformando los cromosomas, son los archivos de información genética. Estos ácidos se dividen en dos tipos: a) ácidos ribonucleico (ARN) y b) ácido desoxirribonucléico (ADN). Ambos ácidos, se encuentran formados por una pentosa, ácido fosfórico y bases púricas (adenina12, guanina13) y pirimídicas (timina,14 citosina15 y uracilo16). La diferencia básica de ambos ácidos es la pentosa y una de las bases piramídicas por la que se conforman, así el ADN está compuesto por la desoxirribosa y la timina y el ARN por la ribosa y el uracilo respectivamente. Lo anterior ha sido expuesto de la siguiente manera: “…El ARN al igual que el ADN es un poli nucleótido; pero con los diferencias fundamentales con respecto a la estructura primaria del A.D.N. La primera diferencia es que el azúcar es una ribosa y no una desoxirribosa. La segunda diferencia es que, en vez de la timina, contiene otra pirimidina llamada uracilo.” ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 14 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO FIGURA 4 Estructura del cromosoma Muestra la estructura helicoidal del ADN y la unión de la Guanina con la Citosina y de la Timina con la adenina En razón de lo anteriormente expuesto, el ADN es uno de los ácidos que conforman los cromosomas que se encuentran en los núcleos de las células de los organismos vivos. Y a su vez éste está formado por ácidos nucleicos los cuales son: pentosa, ácido fosfórico y bases púricas (adenina, guanina) y la timina. El ADN es la molécula esencial de la vida, ya que en ella está contenida toda la información genética de un organismo viviente. Es la que se ha encargado ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 15 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO de la preservación de las especies a través de los tiempos, incluso de la evolución misma ya que la información genética es transmitida inclusive con sus mutaciones. Esto se debe a que una de las características fundamentales de la molécula de ADN es su constancia, ella sufre muy pocas mutaciones lo que se traduce en baja variabilidad. Gracias a esta constancia, se garantiza que todas las células resultantes de la división celular reciban una copia exacta de la misma molécula. Estructura: Desde su aparición en la historia del ser humano, la molécula de ADN ha sufrido cambios en su concepción, no así en su estructura. Las bases ocupan una posición central y presentan complementariedad, de modo que la adenina se empareja con la timina y la guanina con la citosina. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 16 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO Clasificación El ADN hasta ahora estudiado es el nuclear, es decir el que se encuentra en el núcleo de la célula. Pero es de gran importancia mencionar que también existe ADN mitocondrial el cual, como su nombre lo indica, se encuentra en las mitocondrias19 de las células. El ADN puede ser clasificado como ADN codificante y no codificante. El primero, se caracteriza por formar parte de los genes, y cada uno de los cuales originará una secuencia determinada de aminoácidos. Solo el 80% del ADN contenido en el núcleo celular es codificante. El segundo, se emplea en la identificación humana y se denomina satélite por su fácil separación. Sobre este respecto se ha escrito: a) ADN codificante: es el ADN que contiene la información genética en los genes, este se encuentra en los nucleótidos de una forma ordenada y el cual así mismo organiza los aminoácidos para las funciones respectivas del organismo. b) El ADN no codificante, por el hecho de no contener la información genética de un individuo es muy utilizado en la práctica forense, ya que refleja las características fenotípicas de determinado sujeto tales como el sexo, el color de ojos, cabello, facciones, etc. Tal y como lo explican las autoras citadas supra, este tipo de ADN: ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 17 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO CAPITULO II 2.1 ADN FORENSE O GENÉTICA FORENCE Esencialmente, una armada de expertos científicos, los científicos forenses se especializan en todo, desde odontología hasta insectos. Es su experiencia científica y su juicio profesional, lo que ayuda a conformar el cuerpo de la evidencia. 2.2 GENETICA Estudio del material biológico que los organismo transmiten de generación en generación. Ciencia moderna. Término inventado por William Bateson en 1905.(1) 2.3 DEFINICIÓN DE GENETICA FORENSE Rama de la genética humana aplicada a la solución de problemas sociales y legales, cuyos objetivos son: (1) a) Identificación genotípica de los individuos, que se basa en la estructura genética individual única y no repetida de cada persona. b) Investigar las relaciones biológicas entre dos o mas individuos, lo cual se conoce como ¨Heredobiologia¨. ¿Qué es Ciencia Forense? Es la aplicación de prácticas científicas dentro del proceso legal. Algunas de las claves que los criminalistas encuentran no pueden ser vistas a simple vista; algunas son hasta más pequeñas. Esencialmente esto se traduce en investigadores altamente especializados o criminalistas, que localizan evidencias que sólo proporcionan prueba concluyente al ser sometidas a pruebas en laboratorios. Parte de la evidencia que hallan a menudo no puede ser vista a simple vista, a veces es hasta más pequeña. La ciencia forense ahora usa de manera rutinaria ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 18 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO ADN en delitos seriamente complejos, solucionando muertes a partir de estos bloques estructurales de la vida. Mientras los criminales han desarrollado maneras cada vez más ingeniosas de quebrantar la ley, nuestras fuerzas policiales han tenido que idear maneras más efectivas para someterlos a la justicia. Incluso cuando pareciera que un criminal desapareció sin dejar rastro, los detectives se percataron hace ya un buen rato que esto simplemente no es cierto. Con cada contacto que establecemos con un lugar, objeto o incluso otra persona, se deja una presencia física. Todos sabemos que las huellas dactilares y las fundas de una bala pueden delatar a un ladrón, pero ¿sabías que las fibras, los cabellos extraviados e incluso hasta el sucio de tus zapatos pueden implicarte en una investigación criminal. De hecho, casi todo lo que se encuentra en la escena de un crimen puede ser sometido a prueba y usado como evidencia para probar o refutar la presencia de un sospechoso (2) ADN podría decirse que es la genética forense la especialidad que ha incorporado los estudios que sirven de instrumento útil a la identificación de las personas, cadáveres y restos óseos, así como ha sido vital importancia para la administración de justicia, no solo en procesos civiles que requieren de pruebas de filiaciones de paternidad, sino también se han visto beneficiado los procesos penales y particularmente los hechos delictivos que dejan vestigios biológicos: del autor sobre la victima, en el escenario del crimen, en los instrumentos del delito, o de la victima en el cuerpo del victimario. El ADN ha sido la mayor revolución en materia de criminalística que a superado los limites que tenían otras técnicas de identificación, por razones de gran importancia como lo es que, el ADN de cada una persona a partir de indicios biológicos diminuto, obteniendo información de transcurrido mucho tiempo desde el momento en que fueron depósitos, aun conservando características identificaciones incluso muchos años después de su análisis. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 19 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO Han sido los análisis de la identificación de polimorfismo del ADN no codificante. Que son aquellos relativos únicos y exclusivamente a fines identificatorios, los que ofrecen gran precisión, al lado de la técnica replicante del ADN de la muestra no disponible, la reacción en cadena de la polimerasa, los que permite que aunque esta sea mínima en resto de saliva o cabellos, pueden ser analizados por no comportar agotamiento o destrucción de la muestra biológica, ha convertido en derecho universal el acceso a ellas. El ADN es un nuevo mecanismo de identificación que esta teniendo gran incidencia en el proceso y en la investigación de numerosos supuestos delictivos: esta ha sido una revolución respecto a la técnica que tradicionalmente se venia utilizando como huellas dactilares. Es mas confisible y de amplia utilización debido a que el test genético se puede dar en cualquier parte del cuerpo, por pequeña que sea, y además porque ofrece mucha mas información de la persona meramente identificatoria, es por este ultimo que a sido calificada por esencial queriendo decir que ofrece información sobre la esencia de la persona frente a la identificación clásica la cual ha sido denominado periférica. Cada individuo es poseedor de un código genético exclusivo, de tal forma que es irrepetible y que hoy en día, a través de la técnica molecular genética es posible individualizar este código es muestras mínimas. El echo es que cada persona le corresponda un ADN propio y distinto de las demás personas, la cual se encuentra esencialmente en el núcleo de todas la células, la cual es posible individualizar en todas y cada una de las partes de su cuerpo por mínima que sea, esto es lo que ha sentado las bases de un nuevo sistema identificatorio ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 20 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO 2.4 Bases Genéticas. El ADN es un polinucleótido constituido por dos cadenas antiparalelas de unidades de desoxirribonucleótidos unidos covalentemente, dispuestos de una forma complementaria y adoptando una estructura enrollada de doble hélice dextrógira. Las bases que forma los nucleótidos son la adenina (A), guanina (G), citosina (C) y timina (T). Su estructura fue descubierta por James WATSON y Francis CRICK en 1953, lo cual permitió afrontar su estudio de forma directa, evitando los dificultosos y complejos caminos indirectos que se habían utilizado hasta entonces. Basándonos en la función del ADN podemos dividirlo en dos grandes grupos: A. ADN CODIFICANTE Es el encargado de almacenar la información genética en los genes, que son los diferentes sectores de ADN con un orden concreto en la disposición de los nucleótidos que determina la secuencia de aminoácidos de las proteínas que codifican y el grado de expresión del gen en cada tejido y en cada tiempo. Esta función del ADN se corresponde con la idea generalizada que se tiene sobre el mismo. (8) B. ADN NO CODIFICANTE. No obstante, existe otra parte del ADN cuya función específica es desconocida en la actualidad, aunque se sabe que no guarda información genética y que juega un importante papel en la estructura y en la función de los cromosomas y, sobre todo, actuando como puntos calientes de recombinación. (8) La identificación médico-legal a través del análisis del ADN se realiza sobre regiones no codificantes del genoma, es decir, aquellas que no contienen información alguna sobre las características fenotípicas de las personas. Es decir, que por medio del análisis forense del ADN no se puede saber sin un individuo es rubio, alto, gordo,... ni conocer si va a sufrir alguna enfermedad o si tiene ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 21 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO tendencia a padecer determinados tipos de patologías, ya que el ADN no codificante no contiene esa información. Es cierto que si disponemos un archivo con material biológico (sangre o saliva) la muestra podría destinarse a otro tipo de análisis, diferente a la identificación médico-legal, pero también es cierto que las muestras archivadas en esas bases de datos, al margen de las garantías que el sistema de cada país disponga para evitar el mal uso, no podrán ser utilizadas en otros estudios clínicos por la cantidad de material (que es mínima, suficiente para el estudio forense, pero difícilmente para un análisis clínico) y por las condiciones y características del mismo, ya que este se guardan en forma de manchas secas, con lo cual la calidad del ADN se verá afectada. Las características generales del ADN no codificante lo hacen especialmente útil para su aplicación a la identificación en Medicina Forense. Como se puede deducir de su trascendente función, el ADN esencial está formado por secuencias altamente conservadas con muy pocas variaciones interindividuales e intergeneracionales, ya que de lo contrario se podrían ver afectadas funciones básicas para la vida de las personas. Los mínimos cambios que tienen lugar, cuando son viables, aumentan el polimorfismo de proteínas y enzimas, aunque también pueden tener efectos negativos. Por el contrario, el ADN no codificante presenta una gran variabilidad de unos individuos a otros, ya que estas secuencia no son conservadoras al no afectar sus cambios a la fisiología del individuo. Las variaciones debidas a cambios de bases sencillos, procesos de inserción-delección o de intercambio de ADN (recombinación) durante la formación de las células germinales (meiosis), hacen que se modifiquen el número de repeticiones o el orden de las bases de un determinado fragmento repetitivo, pudiendo producirse en un locus sencillo o e múltiples loci, siendo este el origen de la variación que hace que no haya dos personas, a excepción de los gemelos univitelinos, que tengan la misma secuencia del ADN. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 22 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO La repercusión práctica de lo anterior es la existencia de diferentes alelos, es decir la posibilidad de que encontremos entre la población varias formas de presentarse un determinado carácter o fragmento de ADN no codificante. No obstante, existe otra parte del ADN cuya función específica es desconocida en la actualidad, aunque se sabe que no guarda información genética y que juega un importante papel en la estructura y en la función de los cromosomas y, sobre todo, actuando como puntos calientes de recombinación. Este ADN puede ser de dos tipos: ADN espaciador, el cual está formado por una secuencia sencilla de bases que se dispone entre regiones codificantes del genoma; y ADN repetitivo, que lo forma una secuencia que, al contrario que el espaciador, se dispone por todo el genoma debido a la existencia de múltiples copias. A su vez este ADN repetitivo se divide según las características de la secuencia en "Secuencias repetidas en tándem", en las que existe una secuencia común relativamente corta que se repite en tándem de manera continua (una tras otra) en un fragmento de ADN ---- ATCGG ATCGG ATCGG ATCGG ATCGG ---- y "Secuencias repetidas intercaladas", tratándose de una secuencia larga de bases que aparece repetida, pero no a continuación del primer grupo de secuencia repetitivo, sino en un lugar diferente y distante del genoma: (8) 2.5 Análisis de ADN El trabajo en el laboratorio de ADN es algo misterioso o mágico, rodeado de complejas reacciones químicas y de sofisticada tecnología, donde a partir del análisis de mínimos restos biológicos se obtiene el perfil genético o el DNI biológico que establece la identidad de un individuo. Si bien es cierto que los ensayos o análisis de ADN requieren una formación y cualificación adecuadas del personal y el uso de equipos cada vez más automatizados e informatizados, no podemos considerarlo como la fase más importante en el estudio criminalístico. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 23 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO La Genética forense consiste en el análisis del polimorfismo o variabilidad genética humana aplicada a los problemas judiciales. Estos pueden ser: Investigación de la paternidad: Impugnación por parte del supuesto padre o reclamación por parte de la madre y/o del hijo. Criminalística: Asesinato y delitos sexuales (violación). Se analizan restos orgánicos humanos (sangre, pelo, saliva, esperma, piel). Identificación: Restos cadavéricos (por ejemplo, los restos del zar Nicolás II de Rusia y su familia) o personas desaparecidas (como sucedió en Argentina con los niños desaparecidos durante la dictadura militar (7) 2.6 OBTENCIÓN DE LAS MUESTRAS DE ADN La obtención de ADN en el ámbito penal suele tener al menos dos escenarios y dos momentos distintos dentro del proceso. Por un lado se trata de obtener el ADN dubitado (la prueba) de la escena del delito o del cuerpo de la victima y, por otro, la obtención del ADN de referencia de las personas implicadas en el proceso con las que realizar el análisis genético comparativo. Dada la sensibilidad de las técnicas actuales de análisis genético en muestras forenses (cuyo limite de sensibilidad esta cercano a detectar el contenido de ADN de unas docenas de células) el tipo y el número de posibles muestras e indicios biológicos susceptibles de ser identificados por ADN (sangre, semen, saliva, pelos, tejidos, restos celulares en objetos tocados) se ha ido incrementando en los últimos años. Cada vez se hace más necesario el desarrollo de protocolos de investigación que aseguren el rápido aislamiento de la escena (evitando posibles contaminaciones o transferencia de indicios) para una adecuada recogida y documentación de los indicios biológicos por personal especializado que aseguren la correcta conservación y la custodia de las muestras desde su recogida. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 24 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO La posibilidad de poder demostrar de forma documentada la cadena de custodia de las muestras es una garantía más para la admisibilidad de la prueba del ADN durante el acto de la vista oral. La facilidad con que en la actualidad puede obtenerse una muestra biológica de referencia para acceder al perfil genético de un individuo ha modificado también el tipo de intervención corporal necesaria (a veces innecesaria) para la obtención de las muestras de referencia de los imputados. En este punto es necesario resaltar los últimos cambios legislativos, llevados a cabo en nuestro país, con respecto a la obligatoriedad a someterse a la toma de muestras, que sin duda abren las puertas a la toma contra el consentimiento de los sospechosos si existen acreditadas razones según resolución motivada por un juez de acuerdo a los principios de proporcionalidad. La jurisprudencia en este punto nos ofrecerá una respuesta acerca de la posibilidad de interpretar esta reforma legal del artículo 363 de la Ley de Enjuiciamiento Criminal como una puerta abierta en determinadas situaciones a la toma de muestras para el análisis de ADN sin necesidad del consentimiento informado (sin conocimiento del afectado) y la posible colisión de esta práctica con la presunción de inocencia y otros derechos fundamentales 2.7 LIMITACIONES DE LA PRUEBA DEL ADN Las técnicas de identificación genética como cualquier otra actividad humana no están exentas de limitaciones o erro- res cuya incidencia habrá que ponderar de forma particular en cada proceso. Los estudios de validación realizados sobre las mismas muestras forenses entre diversos grupos de estandarización de genética forense (GEP-ISEFG, GEDNAP, ENFSI...) han desvelado que se trata de una tecnología que ofrece una alta reproducibilidad y fiabilidad, pero también se han puesto de manifiesto la existencia de determinadas excepciones a las leyes genéticas (mutación, ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 25 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO inestabilidad somática...) que es necesario tener en cuenta para una correcta interpretación de algunos casos. Se detecta además en este tipo de ejercicios inter laboratorio un bajo índice de resultados discrepantes (errores) debidos a cuestiones metodológicas, a errores de custodia y a errores de trascripción de distinta influencia en la interpretación final del supuesto práctico y cuya influencia en la pericia es difícil de diagnosticar. Una de las limitaciones de los análisis de ADN es la contaminación biológica humana. La preservación del indicio biológico de la contaminación de ADN exógeno desde su recogida y durante el análisis en el laboratorio cobra una vital importancia cuando se trabaja con sistemas de análisis tan sensibles y en especial cuando se trabaja con indicios biológicos con bajo con tenido en ADN. Los laboratorios forenses se ven por tanto obligados a analizar de forma sistemática una serie de controles negativos para monitorizar la posible influencia de la contaminación durante el análisis de cada muestra pericial. Determinados indicios biológicos invisibles al ojo humano en los que ni siquiera es posible determinar su naturaleza biológica (tipo de fluido o tipo de células) hoy son susceptibles de ser analiza- das mediante ADN. Hay que tener en cuenta, por tanto, que una proporción de las muestras de la escena que se analizan en los laboratorios de genética forense sean indicios procedentes de "transferencias pasivas" no relacionadas con la investigación (depositados con anterioridad o posterioridad a los hechos). Los perfiles de ADN de este tipo de indicios cuya naturaleza biológica suele ser desconocida y que no pueden ser excluidos como el producto de una transferencia pasiva o debidos a una pequeña contaminación por manipulación de la muestra, han de ser interpretados con mucha prudencia y en muchas ocasiones no podrán ser utilizadas con fines exculpatorios. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 26 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO CAPITULO III 3. ADN FORENSE EN TELA DE JUCIO ¿Cuántas veces hemos visto en las series de televisión cómo identifican al asesino gracias a una prueba de ADN de algún cabello que dejó por accidente? Pues parece que la prueba de ADN mitocondrial, una técnica forense muy empleada en nuestros días, no es tan confiable como se presume. Un análisis ha encontrado que la mitocondria celular puede variar mucho entre diferentes tejidos de un mismo individuo, lo que hace engañosa a la comparación de muestras. La comparación de ADN mitocondrial es parte de los análisis policiales forenses desde mediados de los 90s. Como hay tantas mitocondrias en cada célula, copias legibles de sus genomas pueden hallarse aunque el genoma nuclear esté dañado, ya que ambas se encuentran en compartimentos diferentes. Por esta razón, este proceso es muy útil en muestras viejas o altamente degradadas. De ahí tantas historias en las que un criminal es atrapado años después gracias a un análisis de ADN. La fiabilidad de esta técnica forense se basa en el supuesto de que el ADN mitocondrial no varía mucho en los tejidos de cada individuo. Es decir, en teoría, el ADN mitocondrial de un sujeto es prácticamente el mismo, sin importar qué célula se examine: un cabello, un pedazo de piel, algún fluido corporal. Sin embargo, la reciente investigación halló que cada persona podría tener una combinación de varios genotipos mitocondriales. Su estudio encontró que una variante de ADN fue encontrada en el 7% de la mitocondria muscular, pero en un 90% en la de riñón. Hasta ahora, el hecho de ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 27 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO que algunos tejidos tuvieran mayor actividad mitocondrial se había atribuido al número de éstas, no a que fueran diferentes entre sí. Partiendo de que no todas las células tienen la misma mitocondria, se tendría que reconsiderar qué partes del ADN son conservadas, y ver si éstas pueden ser utilizadas como una huella genética personal. Sin duda, este descubrimiento significaría un revés duro para la técnica de comparación de ADN más conocida en el mundo, ya que le restaría su utilidad como prueba confirmatoria. Se viene un dolor de cabeza muy fuerte para las ciencias forenses. 3.1 ADN mitocondrial Existen dos tipos de ADN en la célula, el ADN nuclear y el ADN mitocondrial. En el núcleo de cualquier célula humana (nucleada), se pueden encontrar cientos de copias de ADN mitocondrial y solo dos copias de ADN nuclear. El análisis de ADN mitocondrial es a menudo el método preferido usado por los científicos forenses. Dado que los mitocondrias son estructuralmente fuertes y protegen el ADN en su interior, el ADN mitocondrial se puede extraer de restos antiguos, incluyendo cabello, huesos y dientes. Se pasa de una generación a otra por el linaje materno. No hay cambio en el ADN mitocondrial de madre a hijo. El ADN mitocondrial permite obtener perfiles de ADN en evidencias que tal vez no son adecuadas para otro tipo de análisis. Una muestra de ADN antigua puede ya no contener material nuclear, lo que puede impedir el convencional análisis de ADN nuclear. El ADN mitocondrial, por otro lado, es extremadamente duro y abundante y a menudo presentará un tipo de muestra más viable que un ADN nuclear. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 28 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO El ADN mitocondrial también es muy útil para evidencias degradadas o mal conservadas. A veces este tipo de muestras degradadas no permiten obtener un resultado a través de las técnicas de análisis estándar. (5) 3.1.1 Utilización el ADN mitocondrial a) Pruebas de Maternidad El ADN mitocondrial se pasa de madre a hijos. Por tanto, es posible confirmar la maternidad analizando el ADN mitocondrial. (5) b) Estudios de Hermandad Todo los parientes maternos tienen el mismo ADN mitocondrial. Los hermanos tienen exactamente el mismo ADN mitocondrial que su madre. Una prueba de ADN mitocondrial puede probar si dos individuos comparten la misma madre. (5) c) Estudios Genealógicos Dado que el ADN mitocondrial se encuentra en restos viejos o antiguos, los perfiles del ADN mitocondrial permiten retroceder en el tiempo hasta miles de años. (5) d) Un Caso Forense El ADN mitocondrial se puede extraer de cabello, huesos y dientes. Los restos antiguos y no identificados se pueden comparar a lo s perfiles del ADN mitocondriales de supuestos parientes maternales disponibles. Esto se demostró ser especialmente útil en casos con muestras de ADN comprometidas como las encontradas en desastres masivos, investigaciones de personas desaparecidas o casos que tienen un número limitado de muestras de calidad cuestionable. (5) ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 29 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO 3.2 ANÁLISIS DEL POLIMORFISMO El polimorfismo molecular consiste la variación que se presenta en individuos de una misma especie, bien sea al nivel genético o al nivel de las proteínas. Un sinónimo corriente para este concepto es el de alelismo. a) Polimorfismo en regiones codificantes o exones: El polimorfismo genético se puede presentar en regiones codificantes, lo cual da lugar a mutaciones generalmente visibles en la proteína correspondiente. . b) Polimorfismo en regiones no codificantes: Cuando el polimorfismo genético se presenta en regiones no codificantes, éste puede invisible al nivel del fenotipo, dando lugar a las mutaciones silenciosas que son la mayoría. Esto no es sorprendente si consideramos que el genoma tiene una proporción de más del 97% que no es transcrito a proteínas c) Medicina legal: El resultado práctico del polimorfismo genético individual, ha permitido, como es lógico, afinar enormemente la identificación forense tanto como los estudios de filiación paterna. La huella molecular tiende a reemplazar, de esta manera, a la clásica huella digital. Análisis de polimorfismos de ADN mediante PCR (reacción en cadena de la polimerasa): Es una técnica muy usada en criminalística porque se puede realizar a partir de cantidades muy pequeñas de ADN de la muestra (restos de sangre, semen, etc.) o por la propia degradación del ADN (restos cadavéricos). ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 30 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO 3.2.1 GENETICA FORENSE a) Los grupos sanguíneos al ADN La Genética forense es una especialidad de la Genética que incluye un conjunto de conocimientos de Genética necesarios para resolver ciertos problemas jurídicos. Los tipos de pericia más solicitados al laboratorio de Genética forense por los tribunales son casos de investigación biológica de la paternidad, pericias de criminalística biológica (estudio de vestigios biológicos de interés criminal como manchas de sangre, esperma, pelos, etc.) y, finalmente problemas de identificación. b) Poder identificativo de los ADNs forenses Sin embargo un conjunto de muestras de la escena del delito en las que por diversas razones técnicas solo es posible realizar un análisis de ADN mitocondrial. c) Prueba de ADN Forense Las muestras forenses son descritas generalmente como muestras “no estándar”, por ejemplo: Sangre y manchas de sangre (Ej. sangre seca en la ropa interior, la alfombra, la cama, los vendajes, etc.) Líquido seminal o vaginal y manchas secas (Ej. encontrado en las ropas interiores, la cama, la ropa, etc.) Pelo con las raíces intactas Sobres y estampillas lamidos, tazas que fueron usadas (2) d) Propósito de la prueba forense de ADN: Examinación de la evidencia El perfil de ADN de la evidencia para determinar el origen del ADN. Testimonio experto (después de la examinar la evidencia) Los expertos interpretan los resultados de la prueba de ADN. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 31 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO Detección del semen y prueba de infidelidad Para casos criminales o para fines privados donde un individuo puede dudar de la fidelidad de su esposo(a). Verificación de la muestra del laboratorio Se verifica el perfil de ADN de un paciente, la muestra de un laboratorio (Ej. laboratorio de la patología) y se efectúa la comparación para evitar errores. Niños(as) y personas desaparecidas Comparación del ADN de muestra conocida con el ADN de muestra desconocida. 3.3 ADN NO CODIFICANTE E INTIMIDAD PERSONAL Ya sabemos desde 2001 que el numero total de los genes humanos ronda alrededor de 30.000 genes, lo que supone una porción muy pequeña (alrededor del 2%) de todo el genoma humano. Tanto las regiones cortas de ADN repetitivo nuclear (muy abundantes en todo el genoma) como las regiones del ADN mitocondrial que se utilizan en el campo forense se localizan en regiones de ADN no codificante y por tanto de su estudio no obtendremos información alguna acerca de características físicas o fenotípicas del individuo (tales como la predisposición individual a padecer enfermedades de base genética). La única información que nos proporciona el estudio de estas regiones es un código anónimo diferenciador que denominamos perfil genético y que en último término es una colección de fragmentos de ADN ordenados de acuerdo a su tamaño que son característicos de cada individuo. De hecho, la información aportada por estas regiones carece de valor hasta que es comparada con otro perfil anónimo de una muestra de referencia para establecer la identidad o la no identidad genética entre las muestras comparadas o su grado de parentesco genético. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 32 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO Podemos decir, por tanto, que el perfil genético que se obtiene del estudio de estas regiones variables de ADN no codificante es como el código de barras que se utiliza para clasificar los productos en un supermercado que nada nos dice de las características del producto pero nos sirve para identificarlo Teniendo en cuenta estas características del ADN no codificante es lógico pensar que los problemas legales y/o éticos derivados de la propia obtención de la muestra y de la obtención y utilización de los perfiles de ADN con fines de identificación no deben diferir mucho de los que se plantean en el tratamiento de la reseña dactilar en el sentido de que ambas metodologías permiten identificar individuos mediante un análisis comparativo de códigos con capacidad de individualizar sin aportar ninguna información adicional. Sin embargo, hay importantes diferencias entre estas dos técnicas de identificación humana desde el punto de vista de la posible afectación del derecho a la intimidad personal. En primer lugar es necesario considerar una diferencia fundamental y es que mientras que de una huella dactilar no se pueden obtener más datos que los puramente identificativos, de la muestra biológica obtenida para un análisis de ADN con fines forenses también se podrían estudiar otras regiones codificantes, es decir se podría estudiar un número cada aproximadamente 30.000 vez más amplio de los genes que conforman el genoma humano, lo que podría revelar una información genética de gran trascendencia para el individuo. Es este aspecto, es decir la posibilidad de acceder a todo el genoma de un individuo a partir, por ejemplo, de una simple toma de saliva, uno de los elementos fundamentales que diferencian la huella dactilar de la huella genética pero no el único La Prueba de ADN Mitocondrial es una poderosa tecnología que recibió bastante reconocimiento en la última década. El Centro de Prueba de Identidad de ADN en Bio-Synthesis, Inc. (BSI) está actualmente secuenciando muestras de ADN ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 33 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO mitocondrial para la confirmación del linaje materno e investigaciones criminales. Para más información sobre el análisis del ADN mitocondrial contáctenos ahora 3.3.1 Aplicaciones forenses de la PCR La técnica de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se utiliza también en la determinación del sexo a partir de muestras de ADN, amplificando específicos de los cromosomas sexuales X o Y (por ejemplo, el gen de la amelogenina). El análisis del ADN mitocondrial (ADNmt) es especialmente útil en aquellos casos en los que solamente se disponga de restos óseos muy antiguos y deteriorados. Como el ADNmt se transmite sólo por vía materna, puede ser utilizado cuando se trate de investigar en la reconstrucción de linajes. 4. CRIMINALISTAS Los criminalistas, es decir las personas que se encargan de reunir, analizar e interpretar la evidencia forense, trabajan en el lado más duro de los crímenes no resueltos. La profesión está conformada por una variedad de diferentes disciplinas y especialidades. (2) 4.1 Investigadores de la Escena del Crimen Aunque es el personaje de ficción a la orden del día, el trabajo de un Investigador de la Escena del Crimen es de todo, menos glamouroso. Ellos son responsables de acopiar evidencia como fibras, huellas dactilares, cabello u otras partículas del lugar del crimen. Una buena parte de su trabajo es asegurarse de que la evidencia esté a salvo y sea transportada sin contratiempos al laboratorio. Los Investigadores de la Escena del Crimen no siempre son oficiales de policía, muchos son especialistas en investigaciones profesionales. Pero sea quien sea el que realice la tarea, su trabajo es asegurarse de que la escena del crimen esté documentada y fotografiada en mínimo detalle. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO (2) Página 34 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO Los Investigadores de la Escena del Crimen demandan tan poca actividad como sea posible en el lugar del delito; esto evita que cualquier evidencia o claves potenciales sean destruidas o alteradas. 4.2 Muestras forenses y su recogida con vistas al análisis de ADN Muestras de sangre. Los componentes celulares mayoritarios en el tejido sanguíneo son los eritrocitos (también llamados glóbulos rojos o hematíes) y los leucocitos (glóbulos blancos). Los primeros son células maduras especializadas en el transporte de oxígeno por medio de la hemoglobina. Su citoplasma está ocupado totalmente por esta proteína de transporte y por ello son células que han perdido el núcleo y los orgánulos celulares. No presentan núcleo y por tanto no contienen ADN nuclear. Sin embargo, la sangre resulta ser una adecuada fuente de ADN por encontrarse en ella, aunque en menor número, otras células nucleadas, los leucocitos. De este tipo celular es de dónde lograremos extraer el ADN de las muestras de sangre. La cantidad estimada de ADN en sangre completa es de 30-60 μgr/mL. Recogida La sangre se puede encontrar en diferentes estados: líquida o en forma de mancha. El aspecto de las manchas de sangre varía con la antigüedad y el soporte sobre el que se encuentran. Como norma general, cuanto más antigua es una mancha de sangre más oscuro es su color, pero siempre son las condiciones ambientales (microclima), las que determinan el aspecto de la mancha. Las condiciones de envío de las muestras de sangre varían según el estado en que se encuentre: ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 35 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO Muestras de semen: El esperma total recién emitido es un líquido filante, cremoso, de color opalino que tiende a amarillo verdoso cuando pasa el tiempo y de olor típico. Consta de dos elementos distintos: las células que proceden de los tubos seminíferos del testículo y el plasma seminal que procede del epidídimo, próstata, vesículas seminales. En este tipo de fluido el componente celular más abundante es el espermatozoide y el plasma seminal sirve como soporte, vehículo y medio nutricio y de estabilización al espermatozoide. El eyaculado normal es de 2 a 6 mL, conteniendo unos 100 millones de células por mililitro. El espermatozoide es una célula que posee un flagelo para poder moverse a través del aparato genital interno femenino y alcanzar el óvulo. Por tanto, la función del espermatozoide es producir la fecundación del óvulo para perpetuar la especie. Para formar un nuevo ser, es necesario que se transmita toda la información genética que poseen los seres progenitores. Los espermatozoides contienen un gran núcleo cargado del ADN poseedor de dicha información, por lo que son un tipo celular idóneo para el estudio de polimorfismos genéticos. La cantidad de ADN estimada en semen es de 480 μgr/mL, como vemos mucho mayor que la cantidad de ADN en sangre. A diferencia del resto de las células de nuestro organismo, cada espermatozoide (y en su caso los óvulos) presenta una sola copia de ADN (haploidismo), mientras que el resto de células son diploides pues presentan dos copias (la heredada del padre y la heredada de la madre). ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 36 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO Recogida La importancia de las manchas de esperma en el campo de la Biología Forense resulta evidente por ser pruebas indiciarias fundamentales en los delitos contra la libertad sexual. Son después de las manchas de sangre el indicio biológico que con más frecuencia se envía para su estudio a los laboratorios de analítica forense. La búsqueda sobre la víctima y el agresor son fundamentales en este caso, debiendo tomarse muestras en el canal vaginal, recto y faringe de la víctima (según el tipo de agresión) así como realizar una inspección de las ropas de víctima y agresor, especialmente de la ropa interior. Las muestras de esperma que llegan al Laboratorio de Biología Forense son de varios tipos: Muestras de saliva: La secreción salival del hombre varía entre 1 y 1,5 litros diarios. Tiene una función lubricante y facilitadora de la masticación y la deglución; asimismo posee una función enzimática desdoblando los glúcidos (amilasa). Durante la noche casi deja de segregarse. La saliva en sí, no es un fluido que contenga componente celular y por ello carece por sí misma de ADN; pero se encuentra en un medio lleno de células epiteliales (epitelio bucal). Estas células se desprenden continuamente y llegan a formar parte de la saliva. Así, un chicle puede contener células del epitelio bucal que son nucleadas y por tanto contienen ADN; en un filtro de cigarrillo nos podemos encontrar células adheridas a él que se han desprendido del epitelio labial. Recogida Las muestras de saliva suelen presentarse en su mayoría en forma de manchas. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 37 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO Se asientan normalmente sobre filtros de cigarrillo, chicles, cepillos de dientes, sobres y sellos. Para su recogida es fundamental la manipulación con pinzas evitando en todo momento el contacto directo con las manos. Otras veces, la saliva asienta sobre vasos y latas de bebida; en este caso se ha de recoger la muestra pasando por la zona donde presumiblemente se apoyaron los labios un hisopo impregnado en suero salino, como si de una muestra de sangre se tratase. También es frecuente el análisis en pasamontañas, medias o mascarillas utilizadas en atracos y robos con la finalidad de ocultar el rostro, recortándose, en estos casos, la zona que aproximadamente coincide con la boca para proceder a su estudio. En muestras como sobres y sellos es frecuente que sea necesario otro tipo de estudio y que dichas muestras tengan que ser analizadas en varios departamentos (análisis lofoscópico para el estudio de huellas o análisis documentos cópico para el estudio de las zonas escritas del sobre). Por ello es imprescindible en este tipo de muestras señalar claramente el tipo de estudios que se requiere. En caso de varias muestras se deberán enviar separadas; por ejemplo, los filtros que hay en un cenicero se deben mandar uno a uno, en sobres separados, y prescindiendo de los restos de ceniza que puedan quedar en el cenicero. Hoy en día es cada vez más frecuente el uso de saliva recogida en un hisopo como muestra biológica indubitada (de referencia) pues, en contraposición con la extracción de sangre, resulta un método no invasivo, no doloroso y ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 38 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO además se evita el peligro de vertido o rotura de los tubos de sangre líquida tradicionales. Para su recogida se ha de frotar el hisopo limpio de algodón contra la cara interna de las mejillas con el fin de arrastrar el mayor número de células del epitelio bucal. Muestras de pelos: El pelo es una formación queratinizante derivada de la epidermis. Está formado por un extremo libre y por una raíz que termina en un ensanchamiento (bulbo) implantado en la dermis. La estructura íntima del pelo está formada por tres capas concéntricas: La cutícula es una envoltura formada por un número variable de capas de células dependiendo del grosor del pelo. La corteza está formada por células corticales que contienen macro fibrilla de queratina y gránulos de melanina. Esta capa constituye la mayor parte del pelo y contribuye principalmente a establecer las propiedades mecánicas de éste. La médula representa la parte central y puede ser continua, discontinua o inexistente. Está formada por una trama de queratina esponjosa en la que se sustentan laminillas de material amorfo que llenan los espacios vacíos. Los pelos son estructuras que muestran diferente composición según la zona que estudiemos. Se trata de un tejido vivo que se va queratinizando a medida que crece. La parte más alejada del cuero cabelludo está formada por células que tienen ocupado su citoplasma totalmente por una proteína estructural llamada queratina que da su forma al pelo. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 39 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO Por tanto, en esta zona distal, las células carecen de núcleo y de ADN. Sin embargo, en la zona proximal (bulbo o raíz), el pelo presenta células nucleadas totalmente activas que contienen ADN. Es imprescindible que los pelos encontrados en la escena del crimen presenten bulbo si lo que queremos es realizar un estudio de ADN nuclear. El pelo telogénico puede haber sido arrancado, pero lo normal es que se caiga espontáneamente. Presenta bulbo en forma de palillo de tambor y no suele aparecer la cubierta epitelial. Finalmente, el pelo catagénico presenta un estadío intermedio entre el primero y el segundo. Es difícil discriminar qué pelos en estado catagénico darán resultados positivos en la extracción de ADN y cuáles no lo harán; por ello, recomendamos que se intente la analítica de ADN en todos ellos. Recogida En la escena del crimen puede haber pelos del criminal o de la víctima, pero también de curiosos que contaminaron el lugar de los hechos. Por ello hay que ser rigurosos a la hora de elegir qué pelos se enviarán al Laboratorio, pues no todos los pelos presentes en el lugar de los hechos tienen la misma importancia. Por ejemplo, si el delito ha ocurrido en un local público es innecesario recoger todos los pelos que puedan estar presentes en el lugar; se ha de realizar una selección y centrarse sobre todo en pelos que la víctima pueda tener en las manos por ejemplo. Los inconvenientes de este tipo de muestra son su poco peso y en ocasiones su escaso tamaño, lo cual dificulta su transporte y localización. Por ello, la manipulación del material se realizará con el máximo cuidado, preferiblemente se usarán guantes y se evitarán las pinzas, pues pueden ocasionar la fragmentación del pelo. Dichas muestras pueden enviarse en bolsas de plástico herméticamente ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 40 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO cerradas, en frascos de cristal o en los típicos frascos de toma de muestra de orina, como siempre etiquetados. Deben tomarse muestras de pelo control en la víctima, preferiblemente arrancándolos para que conserven su bulbo o raíz; pero si los estudios a realizar son análisis de polimorfismos de ADN nuclear no es necesario que la muestra control de la víctima sea también un grupo de pelos, sino que puede ser sangre o saliva. Analista de Huellas Latentes Estos criminalistas son responsables de hacer copias de las huellas halladas en la escena del crimen y contrastarlas en una base central de datos, con las huellas conocidas de criminales. Su trabajo incluye huellas dactilares, huellas de la palma de la mano y huellas de pisadas. Nuestras huellas dactilares son completamente únicas y permanecen inalteradas a lo largo de nuestras vidas. A pesar de que el fundamento para identificar a un sospechoso por huellas latentes no ha cambiado en casi un siglo, los métodos para archivarlas y compararlas sí lo han hecho. Sigue existiendo una fiabilidad constante en las huellas dactilares y la tecnología ahora juega un rol crucial en el archivo y comparación de las huellas. Programas de reconocimiento, digitalización y bases de datos enormes, hacen que el trabajo de un analista de huellas sea ahora más fácil y eficiente. (2) Analista de Armas de Fuego Los crímenes por arma de fuego van en aumento; sólo el año pasado tuvieron un incremento sostenido del 3% en el Reino Unido. Como consecuencia, los servicios de analistas de armas de fuego están en constante demanda. Entrenados para reconocer armas y municiones, estos profesionales analizan las propiedades ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 41 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO balísticas de las balas y construyen un gráfico de lo que pasó con ellas una vez que dejaron el arma. Los investigadores de armas de fuego también establecen claves vitales en la escena del crimen. Por ejemplo, su responsabilidad es determinar cuan alejada estaba la víctima del arma o, si el disparo fue realizado a distancia, estimar la trayectoria de la bala. También comparan balas y sus fundas bajo un microscopio para corroborar el tipo de arma que se usó para dispararla. (2) Analista de Marcas de Herramientas Las herramientas son utilizadas con frecuencia en crímenes, por ejemplo una palanca que es utilizada para abrir una ventana. Y al igual que una huella dactilar puede delatar al delincuente, las marcas de armas dejadas en pinturas, mastique, yeso o madera pueden ser igualmente incriminatorias. Las herramientas tienen características distintivas, no sólo su diseño físico, sino también el material con el que fueron fabricadas. Las marcas de estriación del metal a partir del cual son forjadas las herramientas pueden ser comparadas, correspondidas y usadas como medio para lograr que se produzca un arresto. Las marcas de deslizamientos y los cortes hechos por las herramientas en otros materiales también pueden revelar una buena cantidad de información bajo un microscopio comparativo. (2) ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 42 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO CAPITULO IV CONCLUSIONES El desarrollo científico ha permitido la introducción de la tecnología del ADN en la investigación forense, posibilitando el estudio de indicios biológicos mínimos, hecho que unos pocos años atrás era imposible. El estudio del ADN ha supuesto un enorme "paso de gigante" en la identificación médico-forense, tanto en la investigación criminal, como en la investigación biológica de la paternidad. Las especiales circunstancias en las que se desenvuelve la primera de ellas hace que el potencial tecnológico no sea suficiente para la consecución del objetivo si previamente no se ha realizado un buen trabajo por parte del equipo de investigación encabezado por el Médico Forense, que por su formación y especialización es el profesional idóneo para valorar los indicios biológicos. En los casos en los que haya que recoger las evidencias, debe hacerse en condiciones de máxima limpieza o esterilidad todos los indicios de origen biológico presentes, almacenándolos independientemente y adecuadamente identificados en cuántos recipientes estériles sea necesario y manteniéndolos custodiados en un frigorífico hasta recibir las instrucciones oportunas por parte de las Autoridades Judiciales.. ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 43 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO CAPITULO V ANEXOS ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 44 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTONIO GUILLERMO URRELO CAPITULO VI BIBLIOGRAFÍA: 1. http://www.docstoc.com/docs/107884422/Presentaci%EF%BF%BDn-dePowerPoint 2. http://gbcriminologia.blogspot.com/2010/05/crimen-y-ciencia-forense.html 3. http://cdigital.udem.edu.co/TESIS/CDROM26512007/08.Capitulo3.pdf 4. http://www.adnresuelve.com/forenses.htm 5. http://www.centrodeadn.com/mit_test.aspx 6. http://www.iuisi.es/15_boletines/15_2006/doc051-2006.pdf 7. http://payala.mayo.uson.mx/QOnline/Genetica_forense.htm 8. http://www.portalesmedicos.com/publicaciones/articles/643/1/La-huellagenetica-en-Medicina-Legal-ADN-con-fines-forenses.html 9. http://www.javeriana.edu.co/Genetica/PDFDOC/POLIMORFISMO%20GEN ETICO.pdf ADN FORENSE: GENES EN TELA DE JUCIO Página 45
