Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas Escuela Superior de Sanidad “Dr. RAMON CARRILLO” Universidad Nacional del Litoral Coloquio 6: Métodos espectroscópicos de analisis 1) Una solución de KMnO4 7.25*10-5 M tiene una transmitancia de 44.1% cuando se mide en una celda de 2.10 cm a una longitud de onda de 525 nm. Calcule: a) la absorbancia de la solución, y b) la absortividad molar de KMnO4. 2) Suponiendo que la diferencia de energía entre los orbitales 3s y 3p es de 2.107 eV, calcule la longitud de onda de la radiación que se absorbería en la excitación del electrón 3s al 3p. Indique a que región del espectro electromagnético pertenece dicha emisión. Datos: 1 eV = 1.60*10 -19 J. Constante de Planck 6.63*10-34 Js. Velocidad de la luz en el vacio 3.0*1010 cm/s. 3) Una solución que contiene 8.75 ppm de KMnO4 tiene una transmitancia de 0.743 e una celda de 1.0 cm a 520 nm. Calcule la absortividad molar de la especie. 4) El berilio (II) forma un complejo con la acetilacetona (166.2 g/mol). Determina la absortividad molar del complejo teniendo en cuenta que una solución de 1.34 ppm tiene una transmitancia de 55. % cuando se mide en una celda de 1.00 am a 295 nm. 5) A 580 nm la longitud de onda de absorción máxima del complejo Fe(SCN) +2 tiene una absortividad molar de 7.0*10-3 l/cm.mol. Calcule: A) La absorbancia de una solución 3.75*10-5 M del complejo a 580 nm en una celda de 1.0 cm. B) La absorbancia de una solución cuya concentración es el doble que en el párrafo precedente. C) La transmitancia de las soluciones descriptas en los dos párrafos anteriores. D) La absorbancia que tiene una solución con la mitad de la transmitancia correspondiente al párrafo a. 6) Una alícuota de 5.0 ml de una solución que contiene 5.94 ppm de Fe(III) se trata con un exceso de KSCN y se diluye a 50.0 ml. Cuál es la absorbancia de la solución resultante? Ver problema 5. 7) Una solución que contiene que el complejo formado entre el bismuto (III) y la tiourea tiene una absortividad molar de 9.32*103 l/cm.mol a 470 nm en una celda de 1.0 cm? 8) Una forma habitual de determinar el fosforo en la orina es tratar la muestra con molibdofosfato con acido ascórbico para obtener una especie azul intenso denominado azul de molibdeno. La absorbancia puede medirse a 650 nm. Un paciente produce 1122 ml de orina en 24 hs. Se trata una alícuota de 1.00 ml de la muestra con molibdeno (VI) y se diluye a 50.0 ml. Se prepara una curva de calibrado al tratar alícuotas de 1.0 ml de soluciones patrón de la misma manera que la muestra de orina. Las absorbancias de los patrones y la muestra de orina se determinan a 650 nm y se obtienen los siguientes resultados: Solución (ppm) 1.00 2.00 3.00 4.00 Muestra de orina Absorbancia a 550 nm 0.065 0.436 0.638 0.848 0.518 A) Desarrolle la grafica de dicha curva. B) Cual es la masa en gramos de fosforo eliminad diariamente? C) Cual es la concentración de fosforo en la orina expresada en mM? Problemas propuestos: Con la finalidad de determinar la concentración de nitrógeno contenido en las formas de nitrito y nitrato de una muestra de agua de río, se procedió a centrifugar la misma a 15000 r.p.m. durante 10 minutos, a continuación fue pasada por una columna de reducción con cadmio tomándose una alícuota de 50 ml, la que fue sometida al igual que el blanco de agua destilada y los patrones a la reacción cromógena de diazotaciόn del acido sulfanίlico, seguida de la copulaciόn del diazoico con la alfa naftil amina. Las lecturas correspondientes a los patrones se indican en la siguiente tabla: (NO2-) mg / L A 0 0.000 2 0.059 4 0.120 6 0.181 8 0.240 10 0.305 12 0.362 14 0.425 16 0.482 1) Determinar la concentración de una muestra que fue diluida a 100 ml durante el acondicionamiento en tubo Nessler, correspondiéndole en la lectura realizada a la misma longitud de onda que los patrones, un valor de 0.325 de absorbancia. Expresar el resultado final en mg / L de nitrógeno (NO2- + NO3-). 2) Una solución contiene 7.86 ppm KMnO4 tiene una transmitancia de 0.851 en una celda de 1.50 cm a 520 nm. Calcule la absortividad molar de la especie. Realizado por: Bioq. S. Vanesa Kergaravat Lic. Julio Macagno