UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES MAESTRÍA EN CIENCIAS MANEJO SUSTENTABLE DE RECURSOS BIOACUÁTICOS Y MEDIO AMBIENTE TESIS DE GRADO MAGISTER EN CIENCIAS DISTRIBUCIÓN Y CONCENTRACIÓN DE COLIFORMES TOTALES, COLIFORMES FECALES, Escherichia coli Y ENTEROCOCOS EN EL AGUA Y SEDIMENTO EN EL ESTERO SALADO (TRAMOS B, D, E y G) Luis Guillermo Baños Cruz GUAYAQUIL – ECUADOR 2012 UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES MAESTRÍA EN CIENCIAS MANEJO SUSTENTABLE DE RECURSOS BIOACUÁTICOS Y MEDIO AMBIENTE Tesis de Grado para la obtención del Título de Magister en Ciencias con Énfasis en Manejo Sustentable de Recursos Bioacuáticos y Medio Ambiente DISTRIBUCIÓN Y CONCENTRACIÓN DE COLIFORMES TOTALES, COLIFORMES FECALES, Escherichia coli Y ENTEROCOCOS EN EL AGUA Y SEDIMENTO EN EL ESTERO SALADO (TRAMOS B, D, E y G) Luis Guillermo Baños Cruz GUAYAQUIL – ECUADOR 2012 ii CERTIFICACIÓN DEL TRIBUNAL DE SUSTENTACIÓN PRESIDENTE DEL TRIBUNAL MIEMBRO DEL TRIBUNAL MIEMBRO DEL TRIBUNAL Dr. Luis Muñiz DIRECTOR DE MAESTRÍA M.Sc. Carmen Bonifáz de Elao DECANA iii DEDICATORIA A mis queridos padres (+) por ensenarme a ser la persona que soy, y a quienes le admire su fortaleza de carácter para salir adelante a pesar de todos los problemas que se enfrentaron en su vida. A mi esposa Elba, por su paciencia y su constante dedicación en ayudarme a concluir esta meta tan importante. A mis hermanos: Anita, Miguel, Carlos, Kleber, Lenin, Jenny, Miriam y José. A mis hijos: Patricia Denise y Guillermo David, que son los faros que guían mi vida. A mis nietos: mí querido Mathias, la inigualable Ivanna, al inquieto Joaquín y al apacible Sebastián David, porque dentro de sus sonrisas eternas sentimos que la vida está llena de satisfacciones no materiales. A Iván y Maru, por llenar de alegría a mi existencia. A mis sobrinos iv AGRADECIMIENTOS A Jehová, por llevarme a su lado a lo largo de esta vida, siempre llenándome de alegría y gozo. A mi tutor de tesis, Rubén Castro, MSc por su asesoría y sugerencias, a Miguel Uyaguari, PhD por su paciencia y su invalorable ayuda incondicional. Gracias a todos y cada una de las personas que participaron en la investigación realizada, ya que invirtieron su tiempo y conocimientos para ayudarme a completar mi proyecto de tesis. Por último, quiero agradecer a María José Brito y George Moncada que sin esperar nada a cambio compartieron platicas, conocimientos y diversión. A todos aquellos que durante este tiempo que duro este sueno lograron convertirlo en realidad. v ÍNDICE CARÁTULA ii CERTIFICACIÓN DEL TRIBUNAL DE SUSTENTACIÓN iii DEDICATORIAS iv AGRADECIMIENTOS v ÍNDICE vi ÍNDICE DE TABLAS vii ÍNDICE DE FIGURAS ix ANEXOS xii RESUMEN xiii ABSTRACT xiv 1. INTRODUCCIÓN 1 1.1. Objetivo General 6 1.2. Objetivos Específicos 6 1.3. Hipótesis 6 2. REVISIÓN DE LA LITERATURA 7 3. MATERIALES Y MÉTODOS 18 3.1. Área de Estudio 18 3.2. Metodología 20 3.2.1. Procesamiento de las muestras (agua y sedimento). 3.3. Análisis Estadísticos 4. 20 22 3.3.1. Análisis de regresión múltiple. 22 3.3.2. Análisis de conglomerado(clúster analysis) 22 RESULTADOS 23 4.1.Parámetros físico-químico 23 4.2. Parámetros Microbiológicos 26 5. DISCUSIÓN 32 6. CONCLUSIONES 47 7. RECOMENDACIONES 48 8. LITERATURA CITADA 50 9. ANEXOS 55 vi ÍNDICE DE TABLAS Tabla 1. Ubicación de la estaciones en el Estero Salado. 19 Tabla 2. Análisis de conglomerados Coliformes totales en agua diciembre 2009. 39 Tabla 3. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en agua diciembre 2009. 39 Tabla 4. Análisis de conglomerados Escherichia coli en agua diciembre 2009. 39 Tabla 5. Análisis de conglomerados Enterococos en agua diciembre 2009. 40 Tabla 6. Análisis de conglomerados Coliformes totales fecales en sedimento diciembre 2009. 40 Tabla 7. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en sedimento diciembre 2009. 40 Tabla 8. Análisis de conglomerados Escherichia coli en sedimento diciembre 2009. 41 Tabla 9. Análisis de conglomerados Enterococos en sedimento diciembre 2009. 41 Tabla 10. Análisis de conglomerados Coliformes totales en agua enero 2010. 42 Tabla 11. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en agua enero 2010. 42 vii Tabla 12. Análisis de conglomerados Escherichia coli en agua enero 2010. 42 Tabla 13. Análisis de conglomerados Enterococos en agua enero 2010. 43 Tabla 14. Análisis de conglomerados Coliformes totales en sedimento enero 2010. 43 Tabla 15. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en sedimento enero 2010. 43 Tabla 16. Análisis de conglomerados Escherichia coli en sedimento enero 2010. 44 Tabla 17. Análisis de conglomerados Enterococos en sedimento enero 2010. 44 viii ÍNDICE DE FIGURAS Figura 1. Relaciones del grupo Coliformes 10 Figura 2. . Ubicación del área de estudio. 18 Figura 3. Ubicación de la estaciones de muestreos en el Estero Salado. 19 Figura 4. Temperaturas (°C) reportadas en las estaciones de muestreo en el Estero Salado, durante diciembre (2009) y enero (2010) Figura 5. Valores de Oxigeno Disuelto (mg/L) reportados en las estaciones de muestreo en el Estero Salado, durante diciembre (2009) y enero (2010). 24 Figura 6. Valores del Potencial de hidrogeno (pH) reportados en las estaciones de muestreo en el Estero Salado, durante diciembre (2009) y enero (2010). 25 Figura 7. Valores de Salinidad reportados en las estaciones de muestreo en el Estero Salado, durante diciembre (2009) y enero (2010). 25 Figura 8 Coliformes totales en agua (NMP/100mL), diciembre (2009) y enero (2010). 26 Figura 9. Coliformes totales en sedimento (NMP/100g), diciembre (2009) y enero (2010). 27 Figura 10. Coliformes fecales en agua (NMP/100g), diciembre (2009) y enero (2010). 27 Figura 11. Coliformes fecales en sedimento (NMP/100g), diciembre (2009) y enero (2010). 28 ix Figura 12. Escherichia coli en agua en el Estero Salado, durante diciembre 2009 y enero 2010. 29 Figura 13. Escherichia coli en sedimento en el Estero Salado, durante diciembre 2009 y enero 2010. 29 Figura 14. Valores estimados de Enterococos en agua y sedimento en el Estero Salado, durante diciembre 2009 y enero 2010 30 Figura 15. Valores estimados de Enterococos en agua y sedimento en el Estero Salado, durante diciembre 2009 y enero 2010. Figura 16. Coliformes totales vs Salinidad /Agua /Diciembre 31 31 Figura 17 Coliformes fecales vs Salinidad /Agua /Diciembre 32 Figura 18. E. coli vs Salinidad /Agua /Diciembre 32 Figura 19. Enterococos vs Temperatura /Agua /Diciembre 33 Figura 20. Coliformes totales vs Oxigeno /Sedimento /Diciembre 33 Figura 21. Coliformes fecales vs Oxigeno /Sedimento /Diciembre 34 Figura 22. E. coli vs Oxigeno /Sedimento /Diciembre 34 Figura 23. Enterococos vs Oxigeno/ Sedimento/ Diciembre 35 Figura 24. Coliformes totales vs Oxigeno/ Agua/ Enero 35 Figura 25. Coliformes fecales vs Oxigeno/ Agua/ Enero 36 x Figura 26. E. coli vs Oxigeno/ Agua/ Enero 36 Figura 27. Enterococos vs Oxigeno/ Agua/ Enero 27 Figura 28. Coliformes totales vs pH/ Sedimento/ Enero 37 Figura 29. Coliformes fecales vs Temperatura/ Sedimento/ Enero. 38 Figura 30. Enterococos vs Temperatura/ Sedimento/ Enero. 38 Figura 31. Análisis de conglomerados Coliformes totales en agua diciembre 2009. 39 Figura 32. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en agua diciembre 2009. 39 Figura 33. Análisis de conglomerados Escherichia coli en agua diciembre 2009. 39 Figura 34. Análisis de conglomerados Enterococos en agua diciembre 2009. 40 Figura 35. Análisis de conglomerados Coliformes totales fecales en sedimento diciembre 2009. 40 Figura 36. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en sedimento diciembre 2009. 40 Figura 37. Análisis de conglomerados Escherichia coli en sedimento diciembre 2009. xi 41 Figura 38. Análisis de conglomerados Enterococos en sedimento diciembre 2009. 41 Figura 39. Análisis de conglomerados Coliformes totales en agua enero 2010. 42 Figura 40. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en agua enero 2010. 42 Figura 41. Análisis de conglomerados Escherichia coli en agua enero 2010 42 Figura 42. Análisis de conglomerados Escherichia coli en agua enero 2010 43 Figura 43. Análisis de conglomerados Coliformes totales en sedimento enero 2010 43 Figura 44. Análisis de conglomerados Coliformes fecales en sedimento enero 2010 43 Figura 45. Análisis de conglomerados Escherichia coli en sedimento enero 2010. 44 Figura 46. Análisis de conglomerados Enterococos en sedimento enero 2010. 44 xii ANEXOS Anexo 1. Parámetros abióticos y microbiológicos en las estaciones muestreadas en el Estero Salado en diciembre de 2009. 56 Anexo 2. Parámetros abióticos y microbiológicos en las estaciones muestreadas en el Estero Salado en enero de 2010. 57 xiii RESUMEN Se realizaron dos muestreos en marea baja, uno en diciembre (2009) y el otro en enero (2010) para determinar los microorganismos existentes en el Estero Salado que son los indicadores de contaminación. Un total de nueve estaciones fueron ubicadas a lo largo del Estero Salado en los Tramos B, D, E y G. Estas mediciones incluyeron el análisis de los parámetros físico-químicos (pH, salinidad, temperatura, y oxigeno disuelto), y la medición de las bacterias indicadoras (coliformes totales, coliformes fecales, Escherichia coli y enterococos). Los resultados obtenidos en diciembre del 2009 indican una fuerte contaminación bacteriana en el agua , cuyos valores variaron desde 180NMP/100 mL hasta 160000NMP/100 mL en coliformes totales, coliformes fecales y escherichia coli, en cambio los valores para enterococos fueron de 180NMP/100 mL hasta 7900 NMP/100 mL; para los sedimentos los valores fueron desde 360NMP/100 g hasta 110000 NMP/100g para coliformes totales, coliformes fecales y E. coli y para los enterococos, los valores fueron 300NMP/g hasta 29000NMP/g, estos resultados están por encima de los niveles máximos permitidos . Las estaciones más contaminadas están en los puentes: Linderos, Miraflores, Alban Borja y las Monjas, Dos tubos y la Y. Dentro de los parámetros físicos-químicos que afectan a la contaminación fueron la salinidad, el oxigeno disuelto y la temperatura. En enero (2010), los coliformes totales en el agua tuvieron valores entre 84 NMP/100 mL y 7000 NMP/100mL, para los coliformes fecales (4NMP/100mL – 450NMP/100mL), E. coli (1,8 NMP/100mL -180 NMP/100mL) y los enterococos (6NMP/100mL610NMP/100mL). En sedimento, los valores fueron relativamente bajos en comparación con los datos de sedimentos en diciembre. Los datos obtenidos indican que existen variaciones muy marcadas en las estaciones dentro del Estero Salado, lo cual se presume que existe un proceso continuo de contaminación. Palabras claves: Estero Salado, Coliformes totales, Coliformes fecales, Escherichia coli, Enterococos. xiv ABSTRACT Two samplings were performed at low tide, one in December (2009) and the other in January (2010) to determine the microorganisms in the Estero Salado which are indicators of pollution. A total of nine stations were located along the Estero Salado in Sections B, D, E and G. These measurements included the analysis of physical-chemical parameters (pH, salinity, temperature, and dissolved oxygen), and quantification of indicator bacteria (total coliforms, fecal coliforms, Escherichia coli and enterococci). The results obtained in December 2009 indicate a strong bacterial contamination in the water, the values ranged from 180NMP/100 mL to 160000NMP/100 mL total coliforms, fecal coliforms and Escherichia coli, whereas the values for enterococci were 180NMP/100mL to 7900MPN/100 mL for sediment values ranged from 110,000NMP/100g to 360NMP/100 g for total coliforms, fecal coliforms and E. coli and enterococci, values were 300NMP / g to 29000NMP / g, these results are above the maximum permitted levels. The most polluted stations are on bridges: Boundaries, Miraflores, Alban Borja, Las Monjas, Dos Tubos and La Y. Within the physicalchemical parameters affecting pollution were salinity, dissolved oxygen and temperature. In January (2010), total coliforms in water had values between 84NMP/100mL and 7000 NMP/100ml for fecal coliforms (4NMP/100mL 450NMP/100mL), E coli (1.8 NMP/100mL- 180 NMP/100mL) and enterococci (6NMP/100mL-610NMP/100mL). In sediment values were relatively low in comparison with the data of sediment in December. The data indicate that there are variations in the marked seasons in the Estero Salado, which suppose that there is a continuum of contamination. xv