BIOSURFACTANTE PRODUCIDO POR UNA NUEVA ESPECIE DE Serratia marcescens María Guadalupe Paredes Figueroa1, Sergio Zavala Castillo1, Jeiry Toribio Jiménez2, Gloria Soberón Chávez2, Refugio Rodríguez Vázquez 1 1 Departamento de Biotecnología y Bioingeniería, CINVESTAV-IPN, 07360 México, D.F. Fax: 57473800 ext. 3313 e-mail: mgpf05@yahoo.com.mx 2 Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM, Cd. Universitaria, 70-256, México, D.F. Modalidad: Oral ( ) Cartel (X) Temática: Tecnología y Biotecnología Ambiental Serratia marcescens, biosurfactante, emulsificación. Introducción. Serratia marcescens es una bacteria gram-negativa que se encuentra en el agua, suelo, plantas y animales. En la fase estacionaria, S. marcescens produce un biosurfactante extracelular conocido como Serrawetina y se clasifica en el grupo de lipopéptidos cíclicos (1). Estos agentes tensoactivos poseen dos funciones, la de reducir la tensión superficial y actividad emulsificante. Ambas propiedades permiten incrementar la solubilidad de compuestos hidrofóbicos o bien la transferencia de masa en forma eficiente. Ambas características ofrecen la posibilidad de ser usados en aplicaciones ambientales, como derrames de petróleo y tratamiento de aguas (2). Los objetivos del presente trabajo son la obtención del biosurfactante producido por una nueva especie de Serratia marcescens y su evaluación por diferentes técnicas. Metodología. Serratia marcescens fue aislada del municipio de Cuatro Ciénegas, Coahuila, México y se encuentra bajo resguardo del Instituto de Investigaciones Biomédicas de la UNAM. La cepa Serratia marcescens control fue proporcionada por ENCB-IPN. Ambas cepas fueron sembradas en medio PG líquido, incubadas a 30 ºC por 72 h con agitación orbital (200 rpm), se realizaron muestreos cada 3 horas. El crecimiento bacteriano fue determinado mediante turbidimetría a 600 nm. Para determinar la presencia de biosurfactante se realizaron las pruebas de Índice de Actividad Emulsificante (3), Método de la Gota Colapsada (4) y Cromatografía de Capa Fina (TLC). Resultados y discusión. Crecimiento bacteriano. La curva de crecimiento muestra un comportamiento exponencial típico, alcanzando la fase estacionaria a las 30 h. Índice de Actividad Emulsificante (E24). El mayor índice de actividad emulsificante se obtuvo a las 48 horas de cultivo, con un valor de 50%, con una emulsión que permaneció estable durante más de 7 días. Método de la Gota Colapsada. Como control negativo se utilizó H2O y como control positivo sobrenadante de Pseudomonas aeruginosa. En la figura 1 se muestra que Serratia marcescens dio un resultado positivo con la gota colapsada a partir de las 24 h. Figura 1. Método de la gota colapsada para S. marcescens Los compuestos separados por el método de Cromatografía de Capa Fina para Serratia marcescens se compararon con las placas reportadas por Matsuyama (2004), y se observaron los compuestos nombrados como W1, W2 y W3; los cuales son considerados como los 3 tipos de exolípidos producidos por estos microorganismos. Conclusiones. Se obtuvo e identificó la presencia del biosurfactante en Serratia marcescens mediante tres técnicas diferentes. Agradecimientos. M. en C Jeiry Toribio Jiménez del Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM. Bibliografía. 1. Yamashita, M., Nakagawa, Y., Matsuyama, T. (2001). Silica gel-dependent production of prodigiosin and serrawettins by Serratia marcescens in a liquid culture. Microb. Environ. 16:250-254. 2. McCray, J., Bai G., Maier, R., Brusseau M. (2001). Biosurfactant-enhanced solubilization of NAPL mixtures. J. Contam. Hydrol. 48:45-68. 3. Cooper D. and Goldenberg B. (1987). Surface-active agents from two Bacillus species. Appl. Environ. Microbiol. 53:224-229. 4. Bodour, A., Raina, M., Miller M. (1998). Application of a modified drop-collapse technique for surfactant quantitation and screening of biosurfactant-producing microorganisms. J. Microbio.l Meth. 32:273-280.