1. 2. 3. Alaya Misahuamán, Danely Karina Alaya Misahuamán, Jhenson Jhonatan Bardales epiquien, Carlos TEMA: TUBERCULINA HIPERSENSIBILIDAD RETARDADA INMUNOLOGÍA Docente : Biólogo. Héctor Garay TUBERCULINA HIPERSENSIBILIDAD RETARDADA INTRODUCCIÓN La prueba tuberculina constituye el instrumento básico para detectar la presencia de infección tuberculosa. La hipersensibilidad retardada es necesaria para la defensa específica contra los bacilos, ella también es responsable de la necrosis de caseificación en una primera etapa y de la liquefacción con necrosis tisular en el estado de enfermedad. OBJETIVOS Dar a conocer los conceptos y clasificación de tuberculina hipersensibilidad retardada. Informar para qué sirve la tuberculina hipersensibilidad retardada. Realizar la práctica demostrativa y aprender la técnica Universidad de Pensilvania tuberculosis Robert Koch Los animales infectados por el bacilo tuberculoso presentaban una reacción cuando se inyectaban bajo la piel fragmentos de estas bacterias, denominado “tuberculina”. En 1908 el mismo Koch desarrolla la tuberculina en colaboración con el veterinario Camille Guérin (18721961) que creía útil como agente inmunizante pero que Charles Mantoux depuraría posteriormente para administrar por vía intradérmica como método diagnóstico Esta prueba consiste en la inoculación de un antígeno, la PPD (derivado proteico purificado); producto derivado del bacilo tuberculoso la tuberculina o el derivado proteico purificado y medir la respuesta cutánea obtenida, aplicandose en forma intradérmica, con el objeto de poder establecer si el mismo fue infectado por el agente causante de la enfermedad. EL DERIVADO PROTEICO PURIFICADO El PPD tuberculina, es un extracto antigénico derivado del cultivo de un bacilo tuberculoso en un medio sintético. Se puede utilizar tres tipos de bacterias: Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium bovis Mycobacterium avium. TIPOS DE TUBERCULINA La tuberculina vieja de Koch La tuberculina de Medio Sintético Derivado Proteico Purificado de tuberculina REACCIÓN CUTÁNEA Cuando la reacción al PPD es positiva Enrojecimiento de la piel (eritema) acompañado de un endurecimiento con la elevación de su superficie en aproximadamente un milímetro en relación a la piel circundante Pápula Este es el resultado de la acumulación de células inmunológicas, principalmente de linfocitos, en la piel. El enrojecimiento aislado (eritema) no acompañado de pápula indurada, no traduce una respuesta específica al PPD y por lo tanto NO debe considerarse como prueba tuberculina positiva. Ocasionalmente, pueden aparecer una o varias ampollas (flictenas) con líquido claro amarillento en su interior. Con esta prueba no se hace diagnóstico de enfermedad sino de infección tuberculosa las respuestas al PPD en personas vacunadas con BCG o infectadas por micobacterias no tuberculosas (MNT) suelen ser menos intensas que las debidas a la infección por el bacilo tuberculoso virulento (bacilo de Koch). TIPO DE RESULTADOS Resultados falso positivo Se puede dar por infección de microbacterinas no tuberculosas o por vacunación previa con la vacuna BCG. La vacunación previa con BCG puede dar falsos positivos muchos años después de dicha vacunación. Resultados falso negativo Puede ocurrir por el efecto booster (consiste en una reacción muy débil de respuesta a la prueba de la tuberculina o Mantoux en pacientes de edad avanzada. La palabra hipersensibilidad alude en principio a efectos negativos sobre el propio hospedador, pero en muchos casos el efecto consiste en pequeños daños tisulares, siendo en general la respuesta beneficiosa, puesto que va encaminada a destruir a ciertos patógenos intracelulares. Respuesta De Hipersensibilidad De Tipo Retardado Es una reacción inflamatoria localizada que se induce por citoquinas secretadas por ciertas subpoblaciones de linfocitos TH Fases de la hipersensibilidad de tipo retardado Distinguir una fase inicial de sensibilización en la que se produce el contacto inicial con el estímulo antigénico, y que no presenta síntomas y de un contacto secundario con el antígeno, en la que se manifiestan tales síntomas y que es la tendente a eliminar al patógeno Sensibilización dura de una a dos semanas, tiempo durante el cual los linfocitos TH se activan y expanden clonalmente tras el reconocimiento del antígeno presentado por células presentadoras (APCs). Fase efectora ocurre en tejido extralinfoide, y es la reacción de hipersensibilidad en sentido estricto, detectándose sus síntomas a las 24 horas del contacto secundario con el antígeno que provocó la sensibilización inicial. La podemos subdividir en tres etapas: desencadenamiento, inflamación y resolución. desencadenamiento linfocito T activado (que ahora denominaremos como TDTH), ante el contacto secundario con el antígeno presentado por una APC, secreta ciertas citoquinas, cuyas acciones dan paso a la reacción de inflamación. La inflamación se produce cuando las citoquinas secretadas reclutan y activan a macrófagos y otras células inflamatorias hacia el sitio de infección. La resolución se produce porque los macrófagos activados aumentan su capacidad de eliminación del patógeno. son la principal célula efectora de la hipersensibilidad retardada, pudiendo representar el 90% de la población celular infiltrada Interacción entre citoquinas y células en la DTH La IL-2 del linfocito TDTH funciona de modo autocrino, permitiendo la expansión clonal, con lo que aumenta el número de estas células, que siguen produciendo más citoquinas. La IL-3 y el GM-CSF inducen hematopoyesis del linaje. las distintas citoquinas actúan sobre distintos tipos celulares, responsables de diversos aspectos de esta respuesta. El IFN-g el TNF-b de las células T, así como el TNF-a y la IL-1 de los macrófagos actúan sobre las células endotelilales vasculares cercanas al foco de infección, Efectos de la hipersensibilidad retardada El efecto positivo de la DTH es que tiende a eliminar ciertos patógenos intracelulares y antígenos de contacto: Bacterias intracelulares como Mycobacterium tuberculosis, M. leprae, Listeria monocitogenes, Brucella abortus. Hongos intracelulares como Candida, Pneumocystis carinii, Histoplasma, Cryptococcus. Protozoos como Leishmania. Virus. La DTH desempeña un papel importante en la defensa contra estos agentes, ya que el macrófago activado destruye mejor al patógeno, y el contenido de sus gránulos, vertido a exterior, destruye células propias infectadas Hipersensibilidad tipo IV se manifiesta de forma más grave cuando el Ag atrapado en un macrófago no puede ser eliminado (ej.: tuberculosis). Los LT son estimulados después para elaborar linfocinas que median respuestas inflamatorias. En el rechazo a injertos y en la dermatitis alérgica por contacto se observan reacciones DTH. Es un proceso de hipersensibilidad tardía mediada por los linfocitos T y sus productos solubles; se trata de un reclutamiento de linfocitos T específicamente sensibilizados e inducidos a producir citoquinas que mediarán la inflamación local. La fase de sensibilización comienza cuando el alérgeno ingresa a la piel por primera vez, es procesado y presentado a los linfocitos T que reconocen al Ag Hipersensibilidad tipo IV período dura de 1 a 2 semanas. A medida que trascurre la respuesta inmune, el Ag es eliminado, sin embargo quedan las células T memorias específicas capaces de reconocer a su Ag al ser reestimuladas por él, de diferenciarse y proliferar como células efectoras. Por lo tanto, tras un segundo contacto con el Ag los linfocitos T memoria específicos lo reconocerán y en una rápida acción determinarán la cascada de eventos que dará lugar a una respuesta inflamatoria típica de la sensibilidad tardía. antígeno se inyecta en el tejido subcutáneo y procesada por las células presentadoras de antígeno locales una célula efectora th1 reconoce antígenos y libera citoquinas que actúan sobre el endotelio vascular reclutamiento de células T fagocitos, líquido y proteína en el sitio de la inyección del antígeno provoca lesión visible Para la hipersensibilidad retardada se describen 4 criterios Son imprescindibles las células T. Las células T se observan en la misma lesión. Es imposible la sensibilización en individuos con aplasia tímica. Las sensibilizaciones previas se bloquean mediante tratamiento con suero antilinfocítico Pruebas para evaluar la hipersensibilidad retardada se realizan a través de métodos Epicutáneos: (test del parche) se utilizan los supuestos alergenos responsables sobre la piel del paciente empleando apósitos y manteniendo el contacto durante 48 horas . Intracutáneos: el prototipo es la reacción de tuberculina y el método utilizado es la reacción de Mantoux, PARTE PRÁCTICA PRUEBA DE LA TUBERCULINA TÉCNICA DEL MANTOUX Consiste en la inoculación de una cantidad mínima de tuberculina purificada para observar si hay una reacción dérmica, y así comprobar si el organismo responde positivamente a la tuberculina. El objetivo es distinguir a las personas infectadas por el Bacilo de Koch de las no infectadas MATERIAL TÉCNICA Informar al paciente del procedimiento. Explicarle que una vez inoculado, no friccione el área de punción, ni se coloque esparadrapo. Colocarse los guantes Desinfectar la piel con una torunda de alcohol Preparar el medicamento Con la mano dominante coger la jeringa y acomodar la aguja con bisel hacia arriba Con la otra mano estirar la piel Avisarle al paciente e introducir la aguja en un ángulo de 15° o 25°tratando de llegar a la dermis Inyectar 0.1 ml y retirar la aguja del sitio de punción Con una torunda secar el liquido restante . Quedar una pápula