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Pruebas bioquímicas:
O-F ~ metabolismo oxidativo
Pruebas bioquímicas:
O-F ~ metabolismo oxidativo
Pruebas bioquímicas:
Medio O-F~
metabolismo fermentativo
Pruebas bioquímicas:
Gelatina~ positivo
Pruebas bioquímicas:
Movilidad~ positivo
Pruebas bioquímicas:
Test de oxidasa~positivo
Pruebas bioquímicas:
Test de oxidasa ~positivo
Pruebas bioquímicas:
Test de oxidasa~positivo
Pruebas bioquímicas:
Medio de Mac Conkey~
colonias rosadas lactosa positivas
Pruebas bioquímicas:
Medio de Mac Conkey~
colonias rosadas lactosa positivas
Pruebas bioquímicas:
Medio de lactosa rojo fenol~
colonias lactosa positivas
Pruebas bioquímicas:
Medio de lactosa rojo fenol~
Colonias lactosa positivas
Pruebas bioquímicas:
Citrato de Simons~negativo
•
Este medio indica la capacidad de las bacterias de metabolizar el citrato.
Contiene citrato como única fuente de carbono, fosfato de amonio como única
fuente de fosfato y azul de bromotimol como como indicador de pH.
Únicamente las bacterias capaces de metabolizar citrato podrán multiplicarse
en este medio, al utilizar los fosfatos presentes liberan iones amonio (básicos)
que junto con la eliminación de citrato (ácido) generará una fuerte basificación
del medio que será aparente con un cambio de color del indicador de pH de
verde a azul..
Pruebas bioquímicas:
Citrato de Simons~negativo
• Prueba de citratos (+) izquierda,
(-)derecha.Utilización de Citrato
como única fuente de carbono.
Indicador de pH: azul de bromotimol.
Enterotubos
Pruebas bioquímicas:
Rojo de metilo~positivo
Para la realización de estas dos pruebas se
cultiva el microorganismo en caldo RMVP
(medio de Clark y Lubs) y se incuba a 30ºC
durante un periodo de 3 días como mínimo y
5 como máximo. Al revelar las pruebas, se
separa el cultivo en dos porciones de unos
2,5ml que servirán para cada uno de los ensayos.
Rojo de Metilo: A uno de los tubos se le añade unas gotas (4-5) de solución indicadora
de Rojo de Metilo. Se agita para homogeneizar y se observa la coloración. Se considera
positiva si vira al rojo y negativa si permanece amarillo.
Pruebas bioquímicas:
Voges-Proskauer~negativo
Las enterobacterias son anaerobios facultativos que utilizarán la
glucosa en 2 fases:
1. Metabolismo aeróbico (respiración oxibióntica) consumiendo
rápidamente el oxígeno del medio
2. Metabolismo anaeróbico (fermentación) que puede ser de 2
tipos dependiendo de los productos finales obtenidos:
2.1 fermentación ácido-mixta: productos finales son ácidos
orgánicos (fórmico, acético, láctico y succínico) y etanol
2.2 fermentación butilén glicólica: productos finales son
compuestos neutros como el butanodiol y el etanol, produciéndose
acetoína como intermediario.
La liberación de ácidos orgánicos generará un acusado descenso
del pH que podrá ser detectado añadiendo al medio un indicador de
pH como el rojo de metilo (rojo a pH 4.0).
Si la fermentación que se ha llevado a cabo produce acetoína
puede ser detectada añadiendo al medio KOH y alfa-naftol que
reaccionarán con este compuesto produciendo rojo característico.
Pruebas bioquímicas:
Voges-Proskauer~negativo
Pruebas bioquímicas:
Ornitina~positivo
Descarboxilasas de aminoácidos
(arginina, lisina, ornitina) Los aminóacidos al
perder el grupo carboxilo se convierten en
aminas lo que incrementa el pH del medio y el
indicador (púrpura del bromocresol) vira a
violeta. Las descarboxilasas son útiles en la
diferenciación de enterobacterias.
Las bacterias se inoculan en medios complejos
que contienen lisina, ornitina o arginina al 1% y
un indicador de pH (púrpura de bromocresol).
Pruebas bioquímicas:
Ornitina~positivo
Sistema API para
enterobacterias
Pruebas bioquímicas:
Fermentación de H. de
Carbono
Glucosa~positivo
Pruebas bioquímicas:
Fermentación de H. de
Carbono
Manosa~negativo
Haemophilus-influenzae
Satelitismo con Staphilococcus aureus
Pruebas bioquímicas:
Fermentación de H. de
Carbono
Glucosa~positivo
(con formación de gas)
Pruebas bioquímicas:
Prueba de indol~positiva
• Mediante esta prueba se detecta la liberación de indol en un
cultivo bacteriano. Dicha liberación se debe a la degradación
del aminoácido triptófano mediante el enzima triptofanasa.
• Para la realización de esta prueba la bacteria se cultiva durante
24-48 horas en un caldo de triptona con NaCl al 0,5% (la
triptona presenta abundante triptófano). Para la posterior
detección del indol se usa el reactivo de Kovacs que se puede
preparar con los siguientes ingredientes:
• Alcohol amílico o isoamílico (puede sustituirse por
alc.butílico).....-------------------------------------------------------...150ml
• p-dimetilamino-benzaldehído.............................................10g
• HCl (concentrado)................................................................50ml
• Se disuelve primero el aldehído en el alcohol y después se
agrega lentamente a esta mezcla el ácido. Para el control de
calidad del reactivo se pueden utilizar cultivos conocidos. Las
más convenientes son Escherichia coli (indol+) y todas las
especies de Klebsiella (indol-).
Pruebas bioquímicas:
Prueba de indol~positiva
Pruebas bioquímicas:
Prueba de fenilalanina~positiva
• Esta prueba determina la capacidad de un organismo
para desaminar el aminoácido fenilalanina en ácido
fenilpirúvico por su actividad enzimática de
fenilalanina desaminasa, con la consiguiente acidez
resultante.
• Se cultiva el microorganismo en agar fenilalanina
sembrando la superficie con abundante inóculo e
incubando durante 12-16 horas. Seguidamente se
añade 0,2ml de una solución de cloruro férrico al 10%
de manera que inunde todo el crecimiento. La
presencia de ácido fenilpirúvico (prueba positiva) se
manifiesta por la aparición de un color característico
verde oscuro o verde-azulado.
Pruebas bioquímicas:
Prueba de fenilalanina~positiva
Pruebas bioquímicas:
Test de catalasa ~ positivo
+
-
Pruebas bioquímicas:
Test de coagulasa~positivo
Pruebas bioquímicas:
Test de catalasa ~ negativo
Pruebas bioquímicas:
Fermentación de manitol~positivo
Prueba de la DNAsa
Se basa en la presencia de la enzima
termoestable DNAsa que es capaz de
clivar los enlaces fosfodiester internos de
la molécula de DNA. Se utiliza un medio
sólido que contiene verde de metilo el cual
se combina con DNA altamente
polimerizado. Cuando la combinación no
ocurre, por acción de la enzima DNAsa,
se produce una decoloración del medio.
Pruebas bioquímicas:
Prueba de optoquina ~ negativo
Pruebas bioquímicas:
Bilis esculina~ negativo
Pruebas bioquímicas:
Bilis esculina~ positivo
Pruebas bioquímicas:
Fermentación de
carbohidratos~manitol +
(API)
Pruebas bioquímicas:
Prueba de bacitracina ~positivo (A)
Prueba de CAMP- positiva (B)
Se basa en que los estreptococos(B)
producen un factor llamado CAMP (factor de monofosfato de adenina cíclica) que aumenta la zona de
hemólisis producida por un estafilococo productor
de ß lisina
Pruebas bioquímicas:
Sal tolerancia~ positivo
Pruebas bioquímicas:
de:
Producción de ácido a partir
glucosa ~ positivo
maltosa ~ positivo
lactosa ~ negativo