Separación de proteínas por diálisis La diálisis suele utilizarse

Separación de proteínas por diálisis
La diálisis suele utilizarse como técnica para separar las proteínas de las moléculas de
bajo peso molecular que proceden de un extracto de un tejido o de un extracto celular.
Procedimiento
Una vez obtenido un homogeneizado de células o tejidos, este se retiene en un saco
construido con un material cuyos poros son ultramicroscópicos, como, por ejemplo, el
celofán. Posteriormente, el saco se suspende en agua destilada, las moléculas pequeñas
que hay en el extracto, tales como las sales minerales, atravesarán los poros, pero las
proteínas quedarán retenidas.
Saco de
diálisis
Moléculas
pequeñas
El agua se
sustituye varias
veces
Proteínas
Solución
concentrada
Agua
destilada
Las moléculas pequeñas
se difundirán fuera del
saco ya que tienden a
desplazarse hacia las zonas
de menor concentración.
Las proteínas tienen
impedido el paso por el
tamaño del poro.
El agua se sustituye
varias veces para que los
solutos pequeños puedan
seguir difundiéndose fuera
del saco.
La concentración
de moléculas de soluto
pequeñas en el interior
del saco llega a ser
despreciable.
Tras la separación de las moléculas pequeñas, en el interior del saco queda una mezcla
de proteínas que pueden separarse según su tamaño. Para ello, se utilizan dos técnicas:
la cromatografía y la electroforesis.
De esta forma, se dispone de la suficiente cantidad de proteína pura de la que se puede
determinar su composición aminoácida y su secuencia.
Técnicas
La diálisis
La diálisis es un fenómeno que permite que las moléculas grandes (como las proteínas o
el almidón) y las moléculas pequeñas (como los aminoácidos, la glucosa o las sales minerales) de una disolución puedan separarse por difusión selectiva a través de una membrana semipermeable. Esta membrana, llamada dializadora, presenta un tamaño de poro
que permite el paso de las sustancias pequeñas, pero no el de las moléculas grandes.
Moléculas grandes que
no pueden atravesar la
membrana
Moléculas pequeñas
que pueden atravesar
la membrana
Membrana semipermeable que
permite el paso de moléculas pequeñas,
pero no de solutos grandes como
las proteínas
Técnicas