Medios de cultivo

MEDIOS RICOS Y ENRIQUECIDOS: NO TIENEN AGENTES INHIBIDORES
MEDIO
COMPONENTES
PRINCIPALES
CARACTERÍSTICAS USOS
VISUALIZACIÓN DE
LAS COLONIAS
Caldo nutritivo + Agar.
Diferentes versiones con
distintos componentes
(peptona, triptona-soja,
infusión de cerebro y
corazón, agar Brucella, agar
Columbia, etc.)
Digestión enzimática de soja
y caseína.
No es diferencial
Medio rico para el cultivo de
microorganismos en general, crecen
una gran mayoría, excepto algunos
muy exigentes
-----
No es diferencial, si no
se le añade sangre
-----
Agar Columbia
Peptona, tripteína, extracto
de levadura y extracto de
corazón, almidón
No es diferencial, si no
se le añade sangre
BHI
Infusión de tejidos animales,
peptonas, glucosa y tampón
No es diferencial
Medio rico para el cultivo de
microorganismos en general. Se usa
como base para agar sangre. Crecen
una gran mayoría, e incluso algunos
exigentes, como Brucella,
Corynebactrium, Listeria
Medio rico para el cultivo de
microorganismos en general. Se usa
como base para agar sangre. Crecen
una gran mayoría, e incluso algunos
exigentes al añadir sangre.
Medio rico que permite el
crecimiento de una gran mayoría de
los microorganismos, menos los
muy exigentes. Se puede usar como
base para Agar sangre.
MEDIOS SÓLIDOS
Agar nutritivo
Agar TSA
----
---
Agar sangre
Agar base (BHI, Columbia,
TSA, Brucella) + 5% sangre
de oveja desfibrinada
Diferencial, permite ver Aislamiento de la gran mayoría de
distintos tipos de
microorganismos, incluidos algunos
hemólisis
muy exigentes. No permite el
crecimiento de Neisseria y
Haemophilus.
Distingue tres tipos de
hemólisis:
ß-hemólisis o hemólisis total
α-hemólisis o hemólisis
parcial
γ-hemólisis o no hemólisis
Agar sangre con disco
de bacitracina
Ídem. a agar sangre + disco
de bacitracina de muy baja
concentración (0,04U)
Diferencial, hemólisis
Agar sangre con estría
estafilocócica
Agar sangre con una estría
con S.aureus. La betahemólisis producida por S.
aureus libera factor V y
factor X, permitiendo el
crecimiento de Haemophilus
Agar base (p.e.., Columbia)
+ 5% sangre de oveja +
extracto de levadura +
hemina + vitamina K
Agar sangre, con la sangre
lisada (por calentamiento a
80ºC). Los eritrocitos lisados
liberan la hemoglobina y
otros nutrientes como factor
X (hemina) y factor V
(NAD)
S. pyogenes: Colonias betahemolíticas sensibles a
bacitracina (halo de
inhibición), S. agalactiae,
colonias beta-hemolíticas no
sensibles
Colonias puntiformes
satelitales de Haemophilus
Agar sangre para
anaerobios
Agar chocolate
Identificación de Streptococcus
pyogenes y Streptococcus
agalactiae
Identificación de Haemophilus
como colonias satélites en la estría
de Staphylococcus aureus.
Diferencial, hemólisis
Medio enriquecido, permite el
crecimiento de una gran mayoría de
anaerobios
Hemolisis
Ya no es diferencial
Medio rico que permite el
crecimiento de una gran mayoría de
los microorganismos, incluidos los
muy exigentes como Neisseria y
Haemophilus
-----
Agar CLED
Medio de Kligler
(Tubo en pico de
flauta)
Cistina, lactosa, deficiente
en electrolitos. La cistina
mejora la recuperación de las
enterobacterias. La lactosa y
el indicador (azul de
bromotimol) permiten
distinguir las bacterias
fermentadoras de lactosa de
no fermentadoras de lactosa.
La deficiencia en electrolitos
limita el movimiento de
Proteus.
Lactosa:glucosa 10:1
Rojo fenol como indicador
Tiosulfato sódico
Fe para detectar la formación
de sulfuro
Medio rico y diferencial,
permite distinguir
fermentadoras y no
fermentadoras de lactosa
Para urocultivo
Fermentadoras de lactosa se ven
amarillas (baja el pH y vira el
indicador a amarillo). Las no
fermentadoras se ven incoloras,
blancas o incluso azuladas (si suben
el pH por utilización de las
peptonas).
Medio rico y diferencial,
permite ver 4
características de las
enterobacterias:
fermentación de la
glucosa, fermentación de
la lactosa, producción de
sulfuro y formación de
gases.
Identificación presuntiva de
géneros de enterobacterias
Pico rojo/fondo amarillo: fermentan
glucosa y no produce sulfuro
(Providencia, Shigella, Serratia,
algunas especies de Citrobacter)
Pico rojo/ fondo rojo y precipitado
negro: fermenta glucosa y produce
sulfuro (Salmonella, Proteus)
Pico amarillo/fondo amarillo:
fermenta glucosa y lactosa y no
produce sulfuro (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter). Puede haber
formación de gases (se levanta el
agar).
Pico amarillo, fondo amarillo y
precipitado negro: fermenta glucosa
y lactosa y produce sulfuro
(Citrobater freundii).
Müeller-Hinton
Peptona, almidón, pH 7,3
Transparente para
observar bien los halos
de inhibición, no tiene
PABA (interacción con
antibióticos), grosor 4
mm.
Realización de las pruebas de
sensibilidad a antibiótios (BauerKirby, dilución en agar y test de
épsilon)
Se siembra en césped, tres
veces con un hisopo
Extracto de carne con NaCl.
Se puede suplementar con
extracto de levadura,
peptonas, glucosa, etc.
--
Para microorganismos no exigentes
----
Caldo tioglicolato
Caldo suplementado con
caseína, extracto de levadura
y de carne y tiglicolato. Para
anaerobios, añadir además
hemina y vitamina K.
Caldo más utilizado en
microbiología clínica.
Bajo potencial redox.
Favorece el crecimiento de aerobios, -----microaerófilos, y anaerobios (capa
de parafina líquida), incluso
microorganismos exigentes. Bajo
potencial redox, favorece la
recuperación de anaerobios.
Caldo con carne
picada
Trozos de carne como fuente
de proteínas
Bajo potencial redox
Favorece la recuperación de
anaerobios, mejor cuando se añade
una capa de parafina líquida.
CALDOS
Caldo nutritivo
CALDOS DE ENRIQUECIMIENTO (agentes inhibidores a baja concentración, retrasan el crecimiento de la microbiota contaminante y
permiten el enriquecimiento de un microorganismo que se quiere recuperar.
MEDIO
Caldo gram negativos GN
Caldo selenito F
Caldo tetrationato
Caldo peptona
complementada
Caldo tioglicolato Campy
Caldo Todd-Hewitt con
sangre y antibióticos
COMPONENTES PRINCIPALES
Agentes inhibidores a baja
concentración: citrato y desoxicolato
(sal biliar) inhiben las gram positivas
y retrasan el crecimiento de las
coliformes
Agente inhibidor: selenito de sodio.
Inhibe los enterococos y retrasa el
crecimiento de las coniformes. Se
puede añadir cisterna que favorece el
crecimiento de Salmonella.
Inhibidores: sales biliares y
tetrationato sódico (se genera en la
reacción de tiosulfato con yodo),
inhiben las bacterias gram positivas y
las coniformes que no tienen la
enzima tetrationato reductasa
Caldo con peptona
Caldo similar al tioglicolato
suplementado con un poco de agar
(semisólido) y antibióticos
Como inhibidores lleva ácido
nalidíxico y gentamicina o colistina
CARACTERÍSTICAS USOS
Enriquecimiento de Salmonella y Shigella
en muestras de heces e hisopados rectales
Enriquecimiento de Salmonella.
Enriquecimiento de Salmonella
pH 8,4
Enriquecimiento de especies de Vibrio,
antes de subcultivar en medios más
selectivos
Enriquecimiento de especies de
Campylobacter antes de subcultivar en
medios más selectivos
Enriquecimiento de Streptococcus
agalactiae de muestras genitales.
MEDIOS SELECTIVOS
MEDIO
Agar de MacConkey
Agar EMB
COMPONENTES
CARACTERÍSTICAS
PRINCIPALES
Inhibidores: cristal
Selectivo y diferencial
violeta y sales biliares.
Lactosa como agente
diferencial. Rojo neutro
como indicador.
Inhibidores: eosina y
azul de metileno.
Lactosa como agente
diferencial.
Selectivo y diferencial
USOS
Aislamiento de
bacterias gram
negativas
(enterobacterias). El
colorante cristal
violeta inhiben las
gram positivas. Las
sales biliares inhiben
las gram positivas y
algunas gram
negativas (no las
enterobacterias).
Aislamiento de
bacterias gram
negativas
(enterobacterias). Los
colorantes inhiben las
gram positivas.
VISUALIZACIÓN DE LAS
COLONIAS
Las enterobacterias fermentadoras de
lactosa (E. coli, Enterobacter, Klebsiella)
se ven rosa/rojo/violeta. E. coli puede
presentar um halo rosa alrededor de lãs
colonias, debido a la precipitación de las
sales biliares a pH muy ácido. Las no
fermentadoras de lactosa (Salmonella,
Shigella,Providencia, Proteus) se ven
transparentes.
Las enterobacterias fermentadoras de
lactosa (Enterobacter, Klebsiella) se ven
rosa/rojo/violeta. E. coli se ve de color
verde metálico, debido a la precipitación
de los colorantes a pH muy ácido. Las no
fermentadoras de lactosa (Salmonella,
Providencia, Shigella, Proteus) se ven
transparentes.
Agar SS
Inhibidores: sales
biliares, citrato, y el
colorante verde
brillante: Incorpora
lactosa y tiosulfato
como agentes
diferenciales. Rojo
neutro como indicador.
Selectivo y diferencial
Agar entérico Hektoen
(HE)
Inhibidores: sales
biliares, citrato, y los
colorantes fucsina
ácida y azul de
bromotimol. Incorpora
lactosa y tiosulfato
como agentes
diferenciales. Azul de
bromotimol como
indicador.
Inhibidores: sales
biliares a alta
concentración, citrato y
tiosulfato. Lactosa,
sacarosa y xilosa como
agentes diferenciales.
Lisina como agente
diferencial. Tiosulfato
y citrato como agentes
diferenciales.
Indicador: rojo fenol.
Selectivo y diferencial
Agar XLD
Selectivo y Diferencial
Aislamiento selectivo
de Salmonella y
Shigella de muestras
de heces o hisopados
rectales.
Colonias de Salmonella: incoloras, no
fermentan la lactosa y con punto central
negro (producen sulfuro).
Colonias de Shigella: incoloras, sin punto
central negro.
Coliformes (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter) pequeñas, muy inhibidas,
pero rosa/rojo, por la fermentación de la
lactosa. Gram positivas no crecen.
Aislamiento selectivo Colonias de Salmonella: incoloras o
de Salmonella y
verdes, del color del medio, no fermentan
Shigella de muestras
la lactosa y con punto central negro
de heces o hisopados
(producen sulfuro).
rectales.
Colonias de Shigella: incoloras o verdes,
del color del medio, sin punto central
negro. Coliformes (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter) pequeñas, muy inhibidas, y
amarillas, (fermentación de la lactosa).
Gran positivos no crecen.
Aislamiento selectivo Colonias de Salmonella rosas o rojas (no
de especies de
fermentan la lactosa, pero descarboxilan la
Salmonella y Shigella. lisina, suben el pH) con punto central
negro (por producción de sulfuro). Las
colonias de Shigella se ven transparentes
(no fermentan la lactosa) sin punto central
negro.
Coliformes (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter) pequeñas, muy inhibidas,
pero amarillas, por la fermentación de la
lactosa. Gram positivos no crecen.
Agar desoxicolatocitrato (ADC)
Inhibidores:
Selectivo y Diferencial
desoxicolato y citrato.
Incorpora lactosa como
agente diferencial. Rojo
neutro como indicador.
Aislamiento selectivo
de especies de
Salmonella y Shigella.
Colonias de Salmonella y Shigella se ven
transparentes (no fermentan la lactosa).
Coliformes (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter) pequeñas, muy inhibidas,
pero rosa/rojo, por la fermentación de la
lactosa.
Agar sulfito de bismuto
Inhibidor: bismuto y el
colorante verde
brillante. Sulfato
ferroso y sulfito como
agentes diferenciales.
Selectivo y Diferencial.
Aislamiento selectivo
Muy inestable, no se
de Salmonella typhi
puede usar al cabo de una
semana tras su
preparación.
Colonias con bordes claros y punto central
negro.
Agar verde brillante
Inhibidor: colorante
verde brillante (inhibe
gram positivas).
Incluye lactosa y
sacarosa. Rojo fenol
como indicador.
Selectivo y Diferencial
Aislamiento selectivo
de especies de
Salmonella, salvo S.
typhi y S. paratyphi.
No se recomienda
para Shigella
Colonias de Salmonella rosas, blancas o
transparentes, dependiendo de la
fermentación de los azúcares.
Agar chocolate con
Isovitalex y
vancomicina
Agar sangre, con la
sangre lisada (por
calentamiento a 80ºC).
Se añade isovitalex
(suplemento
vitamínico,
aminoácidos, Fe,
glucosa, etc.) y
vancomicina para
inhibir gram positivos
Ya no es diferencial. Los
eritrocitos lisados liberan
la hemoglobina y otros
nutrientes como factor X
(hemina) y factor V
(NAD). El añadido de
vitaminas, aminoácidos,
glucosa, Fe, etc. permite
el crecimiento de
Neisseria y Haemophilus
Medio selectivo
modificado para el
aislamiento de
Neisseria y
Haemophilus
-----
Agar salino manitol
(Chapman)
Inhibidor: cloruro
Selectivo y diferencial
sódico al 7,5%. Manitol
como agente
diferencial, rojo fenol
como indicador.
Aislamiento selectivo
de estafilococos y
micrococos
Los estafilococos coagulasa positivos
(Staphylococcus aureus) fermentan el
manitol y dan colonias amarillas. Los
estafilococos que no fermentan el manitol
(p.e., S. epidermidis) dan colonias blancas
o del color del medio.
Agar Columbia CNA
Agar base Columbia
con colistina y ácido
nalidíxico
No es diferencial
Aislamiento de cocos
gram positivos
----
Agar selectivo para
estreptococos
Inhibidores: cristal
violeta y antibióticos
(trimetoprimsulfametoxazol y
colistina). También
lleva sangre.
Selectivo y Diferencial
Aislamiento selectivo
de S. pyogenes
(garganta) y S.
agalactiae
Permite ver hemólisis (beta).
Agar PEA (alcohol fenil
etílico)
Inhibidor: alcohol
fenil-etílico (inhibe
gram negativas).
También se puede
añadir 5% sangre de
oveja.
Selectivo.
Si lleva sangre es
diferencial
Aislamiento selectivo
de cocos gram
positivos
(estafilococos y
estreptococos).
También para cocos
gram positivos
anaerobios si se
incuba en
anaerobiosis.
Si lleva sangre se observan reacciones
hemolíticas. Si no, no es diferencial.
Agar sangre lacada con
kanamicina y
vancomicina (KVLB)
BHI + Antibióticos
Sangre lacada
(congeladadescongelada). Agentes
inhibidores:
antibióticos
(kanamicina, inhibe
algunos gram negativos
aeróbios, y
vancomicina, que
inhibe gram positivos
em general).
Ídem. a BHI +
cicloheximida (inhibe
hongos saprófitos) +
cloranfenicol
(antibacteriano)
Selectivo.
No es diferencial
Aislamiento selectivo
de anaerobios,
fundamentalmente
gram negativos, de
muestras en las que
hay microbiota
aerobia y anaerobia
mezcladas.
-----
Selectivo. No es
diferencial
Aislamiento selectivo
de hongos patógenos
-----
Agar sangre +
antibióticos
Agar base (BHI,
Selectivo y Diferencial
Columbia) + 5% sangre
de oveja desfibrinada +
cloranfenicol +
gentamicina
Agar glucosa de
Sabouraud
Agentes inhibidores de
bacterias: antibióticos
(cicloheximida y
cloranfenicol), pH
levemente ácido (5,6)
inhibe algunas
bacterias
Selectivo. No es
diferencial
Aislamiento selectivo
de hongos patógenos,
incluso los más
exigentes. Los
antibióticos inhiben
las bacterias.
Aislamiento de
hongos patógenos
dermatofitos.
------
Agar SABHI
Agar base de
Sabouraud al que se le
añade BHI, para poder
aislar hongos más
exigentes
Selectivo. No es
diferencial
Aislamiento óptimo
de Blastomyces
dermatitidis e
Histoplasma
capsulatum
---
MEDIOS ESPECÍFICOS
Bordet-Gengou
Regan-Lowe
Agar sangre de caballo con carbón
Bordetella pertussis
Bordetella pertussis
Bordetella pertussis y B. parapertussis
Agar Campy con sangre
Agar Skirrow
Campylobacter
Campylobacter
Agar CCF (fructosa, cicloserina, cefoxitina)
CCYE
Clostridium difficile
Clostridium difficile
Agar cistina-telurito
Pico de flauta de Loeffler
Corynebacterium diphtheriae
Corynebacterium diphtheriae
BCYE (agar tamponado con carbón y extracto de levadura)
Agar sangre de caballo con bacitracina
Legionella pneumophila
Legionella pneumophila
Lowestein-Jensen
Mycobacterium tuberculosis
Agar Thayer-Martin
Martin-Lewis
New York City
Neisseria
Neisseria
Neisseria gonorrhoeae (también micoplasmas genitales)
Diamond
Trichomonas vaginalis
Agar TCBS (tiosulfato-citrato-bilis-sacarosa)
Vibrio cholerae
Agar CIN (cefsulodina, irgasán, novobiocina)
Yersinia