Tema 9 Nucléolo • Organizadores nucleolares • Papeles fisiológicos • Constituyentes moleculares • Ultraestructura • Biogénesis M.A.Novales Biologia y Embriologia general 2006/07 Nucleolo (1-7µm) M. O. Con M.E. aspecto alveolar Organizadores nucleolares Porciones de la cromatina cuya secuencia de ADN contiene los genes de ARNr • Es ADN de secuencia repetida • Las copias de disponen en tándem (familia de genes en tándem). • Cada gen tiene unas 13000 pb en humanos y esta separado del siguiente por una secuencia de ADN que no se transcribe (ADN espaciador) • Cada gen contiene la información para las 3 moléculas de “ARNr mayores”: ARNr 28S, ARNr 18S y ARNr 5’8S. • La síntesis de los “ARNr mayores” se realiza de forma coordinada Organizadores nucleolares En humanos los organizadores nucleolares se localizan en los brazos cortos de los cromosomas acrocéntricos Grupo D Grupo G En total: 10 organizadores nucleolares por célula y unas 400 copias del gen del ARNr Función Síntesis de ribosomas • Síntesis y maduración del transcrito 1º de ARNr (ARN 45S) • Ensamblaje de los ARNr mayores + ARNr 5S + proteínas Síntesis del transcrito 1º = ARNr 45S La ARN polimerasa I necesita para unirse al promotor la colaboración del TFI S y del TF IB Todos los genes del organizador nucleolar originan el mismo transcrito 1º un ARNr de 45S con unos 13000 nucleótidos de longitud ARNr 45S a medida que se va sintetizando se va asociando a proteínas Gen del ARNr Maduración del transcrito 1º = ARNr 45S Modificaciones químicas: metilacion de azucares, isomerización de uridina. snoRNP partículas ribonucleoproteicas pequeñas de localización nucleolar Modifican químicamente el ARN (metilacion de azucares, isomerización de uridina) en puntos muy concretos del transcrito primario. Escinden el transcrito primario en los tres ARNr maduros Ensamblaje de los ARNr mayores + ARNr 5S + proteínas Constituyentes moleculares • ADN del organizador nucleolar • ARN **Transcrito 1º = ARNr 45S (13000 nucleótidos) **Productos de la maduración = ARNr mayores: ARNr 28S (5000 n) ARNr 18S (2000 n) ARNr 5’8S (160 n) **De origen extranucleolar ARNr 5S (120 n) snoARN • Proteínas: **Histónicas y no histónicas del organizador nucleolar **Implicadas en la transcripción y maduración del ARNr **Ribosómicas y nucleolares … Estructura M.O. Componente fibrilar tras ser sometida a una solución salina de baja fuerza iónica Unidad de transcripción Unidad de transcripción ADN espaciador que no se transcribe ARN sintetizándose (transcrito 1º) ADN del organizador nucleolar ARN polimerasa I U3 (snoRNP) ARNr 5s (estranucleolar) • ADN moderadamente repetido (unas 2000 copias por genoma haploide) • En un solo grupo fuera del nucleolo (en el cromosoma 1) • Transcrito por la ARN polimerasa III que necesita varios FT III para reconocer al promotor • La síntesis de ARNr 5S no se realiza de forma coordinada con el resto de los ARNr, es mucho mas activa (5x) y el exceso se degrada en el núcleo ARNr 5s (estranucleolar) Biogénesis del nucleolo • ADN: Del organizador nucleolar con el resto de la cromatina, dentro del núcleo mediante la replicación • Proteínas: en los ribosomas del citoplasma • ARN: mediante la transcripción y maduración, dentro del nucleolo los ARNr mayores y en el núcleo el ARNr de 5S Organización del núcleo: estructuras subnucleares Organización del núcleo: estructuras subnucleares