Enzimología 1. Iztapalapa, D.F. a 27 de septiembre de 2013

División de Ciencias Biológicas y de la Salud
Posgrado en Biotecnología
Enzimología
(Ejercicios)
Iztapalapa, D.F. a 27 de septiembre de 2013
1. Las propiedades cinéticas de la enzima ATPasa, aislada de levadura, la cual cataliza la
hidrólisis de ATP para formar ADP y Pi, son obtenidas midiendo las tasas iniciales de
reacción en solución, con varias concentraciones de ATP, S0, y una concentración total de
ATPasa, E0 = 0.60 μM. De estos experimentos, se determinó que:
Vmax = 1.20 μM s-1;
KM = 40 μM.
a). Calcula los valores de kcat y el coeficiente de especificidad para la ATPasa bajo estas
condiciones.
b). Una molécula de inhibidor es adicionada a una concentración de 0.1 mM, y los
experimentos son repetidos. La Vmax y KM aparentes obtenidas son 0.6 μM s-1, y 20 μM,
respectivamente. Indique el tipo de inhibidor y calcule el valor de KI.
2. En un experimento se midió la tasa inicial de una reacción enzimática, v, a varias
concentraciones de substrato [S]. La concentración de la enzima es 10 M. Se graficó [S]/v
versus [S] y se observó una línea recta con ordenada al origen (b) es 500 s y la pendiente
(m) es 0.25 s M-1. ¿Cuál es el valor de KM y el de Vmax para esta reacción enzimática?
¿Cuál es el valor de kcat para esta enzima? ¿Determina el coeficiente de especificidad? Al
medir las tasas iniciales en presencia de 50 M de un inhibidor, A, se observó que la
ordenada al origen (b) es 625 s y la pendiente (m) es 0.25 s M-1. ¿Qué tipo de inhibición
se observó? ¿Cuál es el valor de Ki para el inhibidor con esta enzima?
3. Considere una reacción enzimática, en presencia de un inhibidor competitivo, a una
concentración de sustrato [S] de 2.5 x 10-3 M, la constante de inhibición (Ki) es 1.7 x 10-5 M
y la concentración del inhibidor [I] es 7.5 x 10-5 M. Calcula la constante de Michaelis (KM)
el grado de inhibición observado es del 40%.
4. Para una reacción enzimática en presencia de un inhibidor competitivo, la velocidad de
reacción observada a una concentración de sustrato [S]i = 1.5 x 10-3 M es igual a la
velocidad de reacción sin el inhibidor a una concentración de sustrato [S]0 = 7.5 x 10-5 M.
Calcule la constante de inhibición, Ki, del inhibidor si su concentración [I] = 3.5 x 10-4 M.