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MODULACIÓN AUTÓCRINA/PARÁCRINA DE LA CORRIENTE DE CALCIO POR
ATP Y OPIOIDES EN CÉLULAS CROMAFINES DE MÉDULA ADRENAL DE
RATA.
Alejandre Garcia T., Segura-Chama P., Hernández-Cortes A. , Hernández-Cruz A.
email: malegar@ifc.unam.mx. Instituto de Fisiología Celular, Depto. de Neurociencia
Cognitiva. Universidad Nacional Autónoma de México, CU, México D.F., México.
Las células cromafines (CCs) de la médula adrenal liberan catecolaminas al
torrente sanguíneo ante una situación de estrés. Las CCs también co-liberan ATP y
opioides. Estudios realizados en CCs en cultivo han mostrado que ATP y opioides
inhiben las corrientes de calcio (ICa2+) mediante receptores P2y purinérgicos, µ y δ
opioidérgicos respectivamente. La rebanada de glándula adrenal es un modelo
idóneo para el estudio de la modulación endógena de ICa2+ dependiente del voltaje
debido a que se preserva su microambiente fisiológico. En este trabajo
determinamos la modulación autócrina/parácrina de la corriente macroscópica de
calcio (ICa2+) de CCs en la rebanada de médula adrenal de rata.
Las glándulas adrenales de rata Wistar macho adulto fueron embebidas en
agar al 3% y se obtuvieron rebanadas de 200 m de grosor que se mantuvieron en
solución Krebs con un burbujeo constante de 95%O2-5%CO2. Para el registro de
ICa2+ utilizamos la técnica de fijación de voltaje en la configuración de célula entera;
aplicamos pulsos despolarizantes a 0 mV (50 ms de duración) partiendo de un
potencial de mantenimiento de -80 mV. La modulación dependiente de voltaje de la
ICa2+ se evaluó a través de la corriente recuperada ante pre-pulsos despolarizantes a
+80 mV precediendo al pulso prueba.
Los resultados muestran que en condiciones basales las CCs tienen un 6%
(n=85) de modulación dependiente de voltaje recuperada por pre-pulso. A
continuación se detuvo el flujo de la perfusión con la finalidad de aumentar la
concentración de los productos de secreción endógena; en esta situación la ICa2+ se
inhibió significativamente (17%; p<0.001; n=17). El componente dependiente de
voltaje de esta inhibición fue del 14% (n= 19). La adición exógena de ATP y leucinaencefalina (agonistas de receptores P2y y -, -opioides respectivamente) inhibió
significativamente la ICa2+ (26%; p<0.001; n= 15) del cual un 24% corresponde al
componente dependiente de voltaje. La adición de suramina (antagonista P2y)
provocó un incremento de la ICa2+ de un 10% (n=9) pero el componente dependiente
de voltaje no aumentó significativamente respecto a la basal (8%; p=0.38; n=10). En
presencia de suramina, la adición de ATP provocó un 19% de inhibición dependiente
del voltaje. La naloxona (antagonista de los receptores -, -opioides), no mostró
acción directa sobre la ICa2+ y tampoco afectó la modulación basal dependiente de
voltaje (basal, 7%; naloxona 8%; p=0.46; n=9). La inhibición producida por leucinaencefalina fue completamente bloqueada en presencia naloxona (n=5).
La inhibición basal de ICa2+ encontrada en este estudio puede ser
fisiológicamente relevante en la regulación de la exocitosis, frenando la cantidad de
neurotransmisores liberados. La inhibición de ICa2+ por activación de los receptores
P2y,  y , involucra principalmente un mecanismo dependiente de voltaje.
El presente trabajo se realizo con apoyo de CONACYT Nº. 102085 y DGAPA
(PAPIIT) IN-227910/21.