12/04/2012 Trascripción y Traducción Cátedra de Bioquímica - FOUBA 1 12/04/2012 Cátedra de Bioquímica - FOUBA Cátedra de Bioquímica - FOUBA 2 12/04/2012 Cátedra de Bioquímica - FOUBA Tipos de ARN Cátedra de Bioquímica - FOUBA 3 12/04/2012 Molécula lineal que contiene información genética copiada del ADN. Tiene regiones codificadoras y regiones no codificadoras como la cabeza o líder y la cola. Los mensajeros de eucariotas tienen un cap o gorra en el extremo 5’ y una cola polyA en el extremo 3’. Dirección de la transcipción Cátedra de Bioquímica - FOUBA El ARN mensajero tiene un principio, una secuencia y un final. Cátedra de Bioquímica - FOUBA 4 12/04/2012 • Juega un papel crítico en la síntesis de proteínas llevando AA al ribosoma • Tienen una estructura tridimensional muy bien definida Amino ácido Anti codon ARNm 5’ GTAAAGTCCCTTTAGC 3’ Doble papel: • adaptador que reconoce al amino ácido Cátedra de Bioquímica - FOUBA en el extremo 3’ • El anticodón se empareja con el codón en el ARNm Estructura del ARNt Cátedra de Bioquímica - FOUBA 5 12/04/2012 ARN de transferencia Cátedra de Bioquímica - FOUBA Cátedra de Bioquímica - FOUBA 6 12/04/2012 Cátedra de Bioquímica - FOUBA ARNnp (nucleadores pequeños) Cátedra de Bioquímica - FOUBA 7 12/04/2012 Cátedra de Bioquímica - FOUBA Cátedra de Bioquímica - FOUBA 8 12/04/2012 ARN ribosómico P A Cátedra de Bioquímica - FOUBA Cátedra de Bioquímica - FOUBA 9 12/04/2012 TRANSCRIPCIÓN Cátedra de Bioquímica - FOUBA Cátedra de Bioquímica - FOUBA 10 12/04/2012 Cátedra de Bioquímica - FOUBA Cátedra de Bioquímica - FOUBA 11 12/04/2012 Cátedra de Bioquímica - FOUBA Transcripción Cátedra de Bioquímica - FOUBA 12 12/04/2012 Cátedra de Bioquímica - FOUBA Cátedra de Bioquímica - FOUBA 13 12/04/2012 La transcripción: Síntesis de ARN. 5’ 3’ ARNpolimerasa 5’ 3’ U G U T A C A A G C C G G G C U G C C C G A C G ARN ADN (i) Cátedra de Bioquímica - FOUBA Transcripción: 1- Iniciación: Una ARN-polimerasa comienza la síntesis del precursor del ARN a partir de unas señales de iniciación "secuencias de consenso " que se encuentran en el ADN. ARNpolimerasa T A A U C G G C A U A C U G C G G C T A T A G C C G A U C A T C G Cátedra de Bioquímica - FOUBA 14 12/04/2012 Transcripción: 2. Alargamiento: La síntesis de la cadena continúa en dirección 5'3'. Después de 30 nucleótidos se le añade al ARN una cabeza (caperuza o líder) de metil-GTP en el extremo 5‘ con función protectora. ARNpolimerasa T A A U C G G C A U A C U C G T A G C G T G A C C G A C U A T C G m-GTP Cátedra de Bioquímica - FOUBA Transcripción: 3- Finalización: Una vez que la enzima (ARN polimerasa) llega a la región terminadora del gen finaliza la síntesis del ARN. Entonces, una poliA-polimerasa añade una serie de nucleótidos con adenina, la cola poliA, y el ARN, llamado ahora ARNm precursor, se libera. poliA-polimerasa m-GTP A U G C U C G U G U A G A A A A A ARNm precursor Cátedra de Bioquímica - FOUBA 15 12/04/2012 4. Maduración (cont.): El ARNm precursor contiene tanto exones como intrones. Se trata, por lo tanto, de un ARNm no apto para que la información que contiene sea traducida y se sintetice la correspondiente molécula proteica. En el proceso de maduración un sistema enzimático reconoce, corta y retira los intrones y las ARN-ligasas unen los exones, formándose el ARNm maduro. ARNm maduro precursor cola Cabeza AAAAAA AUG UAG Cátedra de Bioquímica - FOUBA Maduración del ARNm (Visión de conjunto). Región codificadora del gen ADN Promotor E1 I1 E2 I2 E3 Terminador TAC ATC Cabeza E1 ARNm precursor ARNm maduro I1 E2 I2 cola E3 AAAAAA AUG UAG Cabeza cola AAAAAA AUG UAG Cátedra de Bioquímica - FOUBA 16 12/04/2012 En el núcleo tiene lugar la transcripción de los genes codificadores de proteínas. El resultado es un ARN mensajero que posee secuencias de dos tipos: con y sin función codificadora, llamados respectivamente exones e intrones. Cátedra de Bioquímica - FOUBA Supongamos el siguiente transcrito de ARN de un gen: ARNm maduro Los intrones son eliminados mediante la unión de los exones; Cátedra de Bioquímica - FOUBA 17 12/04/2012 Cátedra de Bioquímica - FOUBA La mayoría de los intrones se degradan Y sólo se genera un ARNm maduro ARNm maduro Cátedra de Bioquímica - FOUBA 18 12/04/2012 Constitutivo Splicing Cada intrón es removido y todos lo exones son incorporados al ARNm maduro Alternativo Se producen múltiples formas de ARNm maduros debido al empalme diferencial de algunos exones Cátedra de Bioquímica - FOUBA •Solo existen 20 amino ácidos – pero 64 codones posibles DNA mRNA mRNA codons amino acids threonine proline glutamate glutamate lysine Cátedra de Bioquímica - FOUBA 19 12/04/2012 Cátedra de Bioquímica - FOUBA TRADUCCIÓN Cátedra de Bioquímica - FOUBA 20 12/04/2012 Aminoácido + ATP Aminoácido adenilado + PPi aminoacil-tRNA sintetasa Aminoácido adenilado + tRNA Aminoacil-tRNA + AMP Consumo 2 enlaces Alta energía Cátedra de Bioquímica - FOUBA Cátedra de Bioquímica - FOUBA 21 12/04/2012 Inicio de la traducción Cátedra de Bioquímica - FOUBA Elongación de la cadena polipeptídica Cátedra de Bioquímica - FOUBA 22 12/04/2012 Fin de la traducción Cátedra de Bioquímica - FOUBA Cátedra de Bioquímica - FOUBA 23 12/04/2012 Síntesis de proteínas. Cátedra de Bioquímica - FOUBA Iniciación: La subunidad pequeña del ribosoma se une a la región líder del ARNm y el ARNm se desplaza hasta llegar al codón AUG, que codifica el principio de la proteína. Se les une entonces el complejo formado por el ARNt-metionina (Met). La unión se produce entre el codón del ARNm y el anticodón del ARNt que transporta la metionina. Subunidad menor del ribosoma 5’ P A AAAAAAAAAAA 3’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G UAC Anticodón (i) Codón ARNt ARNm Cátedra de Bioquímica - FOUBA 1er aminoácido 24 12/04/2012 Elongación I: se une la subunidad mayor a la menor completándose el ribosoma. El complejo ARNt-aminoácido2 , la glutamima (Gln) [ARNt-Gln] se sitúa enfrente del codón correspondiente (CAA).El reconocimiento activa al EF1 e hidroliza el GTP a GDP + Pi. De forma que el EF1 se disocia del ribosoma sin llevarse al al aminoacil ARNt al que estaba unido La región del ribosoma a la que se une el complejo ARNt-Gln se le llama región aminoacil (A). Subunidad menor del ribosoma P A AAAAAAAAAAA 3’ 5’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G UAC GU U Consumo 1 GTP Cátedra de Bioquímica - FOUBA (i) Elongación II: Se forma el enlace peptídico entre el grupo carboxilo de la metionina (Met) y el grupo amino del segundo aminoácido, la glutamina (Gln). P A ARNm 5’ AAAAAAAAAAA 3’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G UAC GU U Cátedra de Bioquímica - FOUBA 25 12/04/2012 Elongación III: El ARNt del primer aminoácido, la metionina (Met) se libera. P A ARNm 5’ AAAAAAAAAAA 3’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G GUU Cátedra de Bioquímica - FOUBA Elongación IV: El ARNm se traslada, de tal manera que el complejo ARNt-Gln-Met queda en la región peptidil del ribosoma, quedando ahora la región aminoacil (A) libre para la entrada del complejo ARNt-aa3 . Se consume un GTP para realizar el desplazamiento P A ARNm AAAAAAAAAAA 5’ 3’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G GUU Consumo 1 GTP Cátedra de Bioquímica - FOUBA 26 12/04/2012 Elongación V: Entrada en la posición correspondiente a la región aminoacil (A) del complejo ARNt-Cys, correspondiente al tercer aminoácido, la cisteína (Cys). P A ARNm 5’ AAAAAAAAAAA 3’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G GU U AC G Cátedra de Bioquímica - FOUBA Elongación VI: Unión del péptido Met-Gln (Metionina-Glutamina) a la cisteína (Cys). P A ARNm 5’ AAAAAAAAAAA 3’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G GU U AC G Cátedra de Bioquímica - FOUBA 27 12/04/2012 Elongación VII: Se libera el ARNt correspondiente al segundo aminoácido, la glutamina (Glu). P A ARNm 5’ AAAAAAAAAAA 3’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G AC G (i) Cátedra de Bioquímica - FOUBA Elongación VIII: El ARNm corre hacia la otra posición, quedando el complejo ARNt3-Cys-Glu-Met en la región peptidil del ribosoma. P A ARNm 5’ AAAAAAAAAAA 3’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G AC G Cátedra de Bioquímica - FOUBA 28 12/04/2012 Elongación IX: Entrada del complejo ARNt-Leu correspondiente al 4º aminoácido, la leucina. P A ARNm AAAAAAAAAAA 3’ 5’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G AC G AAU Leu Cátedra de Bioquímica - FOUBA Elongación X: Este se sitúa en la región aminoacil (A). P A ARNm 5’ AAAAAAAAAAA 3’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G AC G AAU Cátedra de Bioquímica - FOUBA 29 12/04/2012 Elongación XI: Unión del péptido Met-Gln-Cys con el 4º AA, la leucina (Leu). Liberación del ARNt de la leucina. El ARNm se desplaza a la 5ª posición ARNm P A 5’ AAAAAAAAAAA 3’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G AAU Cátedra de Bioquímica - FOUBA Elongación XII: Entrada del ARNt de la leucina, el 5º AA , la arginina (ARNt-Arg). ARNm P A 5’ AAAAAAAAAAA 3’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G AAU GCU Cátedra de Bioquímica - FOUBA 30 12/04/2012 Elongación XIII: Unión del péptido Met-Gln-Cys-Leu con el 5º aminoácido, la arginina (Arg). Liberación del ARNt de la leucina (Leu). El ARNm se desplaza a la 6ª posición, se trata del un codón de finalización o de stop. ARNm P A 5’ AAAAAAAAAAA 3’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G GCU Arg-Leu-Cys-Gln-Met Cátedra de Bioquímica - FOUBA Finalización I: Liberación del péptido o proteína. Las subunidades del ribosoma se disocian y se separan del ARNm. ARNm P A 5’ AAAAAAAAAAA 3’ AU G C AA U G C U UA C GA UA G GCU Arg-Leu-Cys-Gln-Met Cátedra de Bioquímica - FOUBA 31 12/04/2012 ADN Trascripción ARN Translación Proteína Traducción Cátedra de Bioquímica - FOUBA Célula Eucariótica Cátedra de Bioquímica - FOUBA 32