Evaluación de la eficacia de Viusid Vet Polvo* sobre los parámetros productivos e inmunológicos en cerdos en engorda. Introducción La producción porcina en países industrializados y del tercer mundo, ha cambiado en los últimos años, lo cual ha generado que grandes grupos de animales se alojen bajo condiciones intensivas, con poblaciones de cerdos muy densas, lo que aumenta la incidencia y facilita el contagio de enfermedades infecciosas dentro de la piara, elevando la mortalidad y produciendo una deficiente ganancia de peso, mala conversión alimenticia, aumento en el número de días en que los cerdos llegan al rastro, y un excesivo gasto en medicamentos. Todo lo anterior se traduce en pérdidas económicas (4). En México al igual que en otros países las enfermedades infecciosas representan la principal causa de muertes en los cerdos y, el uso indiscriminado de antibacterianos, ha fomentado la aparición de cepas bacterianas resistentes como consecuencia del uso inapropiado de antibacterianos, facilitando el establecimiento y prevalencia de enfermedades infecciosas. Por lo anterior, una de las alternativas para mejorar los parámetros productivos e inmunes, es el empleo de agentes o preparados inmunoestimulantes de origen no antibiótico (8,13,15), que a la vez mejoren los parámetros productivos sin la restricción de la presencia de residuos de antibacterianos que conlleva al establecimiento de los tiempos de retiro de estas sustancias, tal es el caso del Viusid-Vet Polvo*, preparado nutricional a base de antioxidantes, vitaminas, oligoelementos y, un principio activo producto de la extracción del regaliz (ácido glicirricínico) con actividades antivirales potenciales. Por lo anterior, se consideró conveniente realizar una prueba de eficacia de Viusid-Vet Polvo* en lechones de engorda para evaluar su efecto en los parámetros productivos y producción de inmunidad humoral (anticuerpos) hacia la enfermedad de Influenza Porcina. Material y Métodos. El estudio se llevó a cabo en el Centro de Enseñanza e Investigación en Producción Porcina (CEIEPP) perteneciente a la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la UNAM (Universidad Nacional Autónoma de México), localizado en Jilotepec, Edo de México. Con un total de 40 lechones recién destetados machos y hembras DurocLandrace de aproximadamente 7 kg, los cuales se dividieron en dos grupos de 20 lechones cada uno de la siguiente manera: Grupo Viusid-Vet Polvo*: Previa prueba de eficiencia de mezclado, se utilizó alimento preparado en la misma granja experimental en presentación en harina manejado por etapas, se administró el Viusid-Vet Polvo* en el alimento a razón de 2400 g/Ton de alimento durante todo el ensayo. Grupo control: Recibió alimento preparado en la misma granja experimental por etapas desde destete a crecimiento y finalización ad libitum sin Viusid-Vet Polvo*. Parámetros en evaluación: ganancia diaria de peso promedio por grupo (g), consumo de alimento semanal (Kg), índice de conversión alimenticia por grupo semanal (Kg) y peso promedio semanal por grupo (Kg). Pruebas serológicas y RT-PCR (Polymerase Chain Reaction). Monitoreo: Inhibición de Hemoaglutinación para Influenza Porcina (HI-IP): para realizar las pruebas se tomaron 20 muestras a 7 días y al final de la engorda de sangre completa sin anticoagulante para separación de sueros y realizar la prueba de inhibición de hemoaglutinación contra virus de Influenza Porcina por grupo. El propósito fue corroborar el comportamiento del sistema inmune en la generación de anticuerpos hacia la enfermedad presente en la granja (Influenza Porcina). Para la determinación de los títulos de anticuerpos contra la enfermedad de Influenza Porcina en el suero de cada cerdo se utilizó la prueba de inhibición de la hemoaglutinación con el virus de referencia A/swine/New Jersey/11/76 (H1N1) GeneBank access K00992 y con el subtipo A/swine/Minnesota/9088-2/98 (H3N2). Número de acceso al GeneBank AF153234. Para considerar a los animales expuestos al virus de Influenza Porcina subtipos H1N1 y H3N2 como animales positivos, éstos deberían tener una dilución 1:80 o mayores o su expresión logarítmica respectiva equivalente a 1.9 1 log. La interpretación de los animales negativos a la prueba se basa en los títulos de anticuerpos localizados en la dilución 1:40 o menores, o ser menor a 1.9 log. RT-PCR Tiempo real: se tomaron 20 hisopos nasales por cada grupo para realizar la prueba de RT-PCR en tiempo real para evaluar excreción viral. Durante la segunda semana de iniciado el destete 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20 y 22 de Mayo, dando un total de 8 monitoreos para este estudio. Los animales con una concentración viral mayor o igual a 2.0 logaritmos corresponden a los animales positivos. Los animales que contengan una concentración viral menor a 2.0 logaritmos corresponden a los animales negativos. Resultados. Los resultados productivos semanales para los grupos control y Viusid-Vet Polvo* (ganancia diaria de peso, consumo de alimento, conversión alimenticia y peso) se presentan en el siguiente cuadro. GDP (g) Control 637 Viusid Vet Polvo* 726 +14.0% % Consumo promedio (Kg) 1.50 1.71 +14.0% Conversión (Kg) Peso promedio (Kg) 2.24 89.88 2.15 -4.0% 103.32 +15% El grupo Viusid-Vet Polvo* a término del ensayo, tuvo mayor ganancia de peso (14%), mayor consumo promedio de alimento (14%), menor indice de conversión alimenticia (4%) y mejor peso promedio (15%) que el grupo de cerdos control. Análisis de Laboratorio. Inhibición de la hemoaglutinación para el virus de Influenza Porcina subtipo H1N1. Monitoreo Control Viusid Control Viusid Control Viusid Promedio Promedio Diferencia desviación Desviacion Diferencia % % Diferencia Log Log Estándar Estandar Positivos Positivo 15 días 1.80 1.80 0.00 0.18 0.32 0.14 61.11 47.37 -13.74 120 días 2.16 1.88 -0.28 0.49 0.25 -0.24 86.66 71.43 -15.23 %Promedio Grupal 1.98 1.84 -0.14 0.34 0.29 -0.05 73.88% 59.40% -14.49% Inhibición de la hemoaglutinación para el virus de Influenza Porcina subtipo H3N2. Monitoreo Control Viusid Control Viusid Control Viusid Promedio Promedio Diferencia Desviación desviación Diferencia % % Diferencia Log Log Estándar Estándar Positivos Positivo 15 días 1.60 1.54 -0.06 0.23 0.27 0.04 22.22 15.79 -6.43 120 días 1.82 1.41 -0.41 0.13 0.25 0.12 73.33 0 -73.33 %Promedio Grupal 1.71 1.48 -0.235 0.18 0.26 0.08 47.78% 7.90% -39.88% En el primer monitoreo a 15 dias se observó que el grupo tratado con Viusid-Vet Polvo* tiene menor porcentaje de sueros positivos con respecto al grupo control, (H1N1:47.3% Viusid vs 61.1% Control y H3N2: 15.8% Viusid vs 22.2% Control), lo anterior pone en evidencia un mejor comportamiento del sistema inmune de los cerdos tratados con el Viusid-Vet Polvo*. La respuesta inmunológica que generan ambos grupos es similar en cantidad de anticuerpos, el mecanismo de defensa general del organismo del cerdo tratado con Viusid-Vet Polvo* ayuda a defenderlo de la infeccion hacia el virus de Influenza Porcina, esto explica el resultado de menor positividad a los dos subtipos (H1N1 y H3N2). 2 En el segundo monitoreo a 120 días se observó de manera significativa un menor porcentaje de animales positivos con el uso de Viusid-Vet Polvo*(H1N1: 71.4% Viusid vs 86.6% Control y H3N2: 0% Viusid vs 73.3% Control). Lo anterior, pone en evidencia que el organismo del cerdo tiene mayor capacidad para reaccionar y defenderse de la infeccion de Influenza Porcina, desarrolla menor infeccion y menor eliminación viral. Asimismo, se postula que los cerdos con un número mayor de infectados generan mayor título de anticuerpos contra el virus de Influenza Porcina correspondientes a los cerdos del grupo control, los cerdos del grupo tratado con ViusidVet Polvo* desarrollaron menor infección y menor título de anticuerpos a la infección de Influenza Porcina subtipo H1N1. Con relación al subtipo H3N2, se presentó el mismo comportamiento, en donde cerdos tratados con Viusid-Vet Polvo* expuestos al mismo antígeno viral desarrollaron menor infección, menores títulos de anticuerpos y menor eliminación viral. En conclusión, dado que las pruebas de serología en el grupo con Viusid-Vet Polvo* presentaron mejores resultados (menor porcentaje de positivos H1N1 y H3N2), se postula que el producto mejora el sistema inmune del cerdo antes de la madurez inmunológica. Lo anterior concuerda con el hecho de que el grupo con Viusid-Vet Polvo* presentó los promedios de títulos más bajos al final del estudio (inmunidad más estable). Los resultados coinciden con los obtenidos de la prueba de PCR (Polymerase Chain Reaction), ya que el grupo sin Viusid-Vet Polvo* presentó más circulación viral, lo cual resulta en una mayor cantidad de anticuerpos. Resultados de la prueba de RT-PCR (polymerase Chain Reaction) tiempo real. En el siguiente cuadro, se listan los resultados de la prueba RT-PCR (Muestras (+) >2.0 copias/reacción) evaluadas a partir de hisopos nasales de ambos grupos, control y Viusid-Vet Polvo*. Monitoreo 1 2 3 4 5 6 7 8 %Promedio Grupal Control Viusid Control Viusid Control Viusid Promedio Promedio Diferencia Desviación Desviación Diferencia % % Diferencia Log Log Estándar Estándar Positivos Positivo 1.88 1.83 1.66 2.24 1.92 1.90 1.79 1.91 1.87 1.58 1.93 1.85 1.94 1.64 1.44 1.44 -0.01 -0.25 0.27 -0.39 0.02 -0.26 -0.35 -0.47 0.45 0.31 0.36 0.42 0.30 0.33 0.42 0.42 0.63 0.39 0.37 0.42 0.49 0.35 0.20 0.20 0.18 0.08 0.01 0.00 0.19 0.02 -0.22 -0.22 35% 30% 5% 70% 35% 45% 35% 50% 25% 5% 45% 25% 45% 20% 0% 0% -10% -25% 40% -45% 10% -25% -35% -50% 1.89 1.71 -0.18 0.38 0.38 0.01 38.13% 20.63% -17.50% El grupo tratado con Viusid-Vet Polvo* presentó un menor porcentaje de animales positivos (20.6%) con respecto al grupo sin Viusid-Vet Polvo* (38.1%) lo cual confirma los resultados encontrados en las pruebas de inhibición de hemoaglutinación en donde se observó un menor número de animales infectados, menor concentración viral debido a una menor permanencia en el organismo del cerdos esto es, menor porcentaje de positividad y menor eliminación viral. En la mayoría de los monitoreos la carga viral siempre fue menor que en el grupo control, lo que refleja una mejor reacción general del organismo del cerdo a no desarrollar una infección viral, es por esto que es menor el número de cerdos positivos a Influenza Porcina subtipo H1N1. Conclusiones: 1. El uso de Viusid-Vet Polvo* en el alimento de crecimiento y finalización a una dosis de 2.4 Kg/ tonelada de alimento, mejoró los parámetros productivos hasta las 18 semanas de duración del ensayo. 2. Viusid-Vet Polvo* a las 18 semanas en etapa de engorda mejoró la ganancia diaria de peso en 89 gramos, el consumo de alimento en 210 gramos promedio, el índice de conversión alimenticia en 90 gramos promedio de alimento por kilogramo de peso vivo y el peso promedio final en 13.44 Kg. 3 3. El uso de Viusid-Vet Polvo* como inmunomodulador en el alimento de crecimiento y finalizador de cerdos en engorda mejoró las defensas del organismo del cerdo medido a través de la pruebas de inhibición de hemoaglutinación y RT-PCR tiempo real para el virus de Influenza Porcina subtipos H1N1 y H3N2. 4. En el grupo tratado con 2,500 ppm (partes por millón) del producto, se observó un menor porcentaje de animales positivos con la dosis aplicada de Viusid-Vet Polvo*, lo cual parece indicar que estimula el sistema inmune permitiendo controlar mejor las infecciones por los virus de Influenza Porcina. La aplicación del Viusid-Vet Polvo* a cerdos en engorda no ocasionó ninguna alteración de la homeostasis ni signología alguna tras la aplicación del producto, favoreciendo la expresión productiva en las razas de engorda de alta productividad. **** Marca registrada, Viusid-Vet Polvo* Catalysis, España, distribuido por Dermaceutical México, S. A. de C. V. Dr. Luis Ocampo Camberos. Dr. Iván Sánchez Betancourt. Profesores Tiempo Completo. Departamento de Farmacología y Producción Animal Cerdos. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia (FMVZ). Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM). Bibliografía. 1. Dai, JH. Et al. Glycyrrhizin enhances interleukin-12 production in peritoneal macrophages. Immunology 103 (2): 235-43, 2001.Sugawara, I, et al: Human interferon-gamma (IFN-gamma) containing cells bear various surface 2. Growth Promoters. The Pig Site. 3. Hirabayashi, K: Antiviral activities of glycyrrhizin and its modified compounds against human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and herpes simplex type 1 (HSV-1), in vitro. Research Laboratory, Minophagen Pharmaceutical. Japan, 1990. 4. Hughes, P.; Heritage, J.: Antibiotic Growth Promoters-Promoters in food animals. (2002). University of Leeds, United Kingdom. 5. Krausse, R. et al: In vitro anti-Helicobacter pylori activity of extractum liquiritae, glycyrrhizin and its metabolites. J. Antimicrobial Chemother. 54 (1):243-6, 2004. 6. Lin, JC: Mechanism of action of glycyrrhizic acid in inhibition of Epstein-Barr virus replication in vitro. Antiviral. Res: 59 (1): 41-47, 2003. 7. Lo, HH. Et al. Glycyrrhizinic acid inhibits arylamine N-acetyltransferase activity in Klebsiella pneumoniae in vitro. J Appl. Toxicol. 17 (6), 385-90, 1997. 8. Mordenti, A.: Probiotics and new aspects of growth promoters in pig production. Chiem-ptions Mediterraneennes. 9. Ohtsuki, KIahida, N: Inhibitory effect of glycyrrhizin on polypeptide phosphorylation by polypeptide dependent protein kinase (kinase P) in vitro. Biochem-Biophys-Res-Commun 157/2, 1988. 10. Phenotypic markers. Microbiol. Immunol. 30(10): 1049-59, 1986. 11. Pompei, R, Marccialis, MA: Effect of glycyrrhizinic acid on herpes simplex virus type 1 glycoprotein synthesis. Universitá di Cagliari, Italy.1G-MOD.83/2, 1985. 12. Tanaka, Y, et al: Antibacterial compounds of licorice against upper airway respiratory tract pathogens; J. Nutr. Sci. Vitaminol (Tokyo) 47 (3):270-73, 2001. 13. Vondruskova, H.; Slamova, R.; Trckova, M.: Alternatives to antibiotic growth promoters in prevention of diarrhea in weaned pigs: a review Veterinarian Medicine, 55, 2010 (5): 199-224. 14. Yechering Industrial Products, Co, LTD (2006). E-mail: infoechering.com. 15. Zdzislaw, M.: Organic acids as potential alternatives to antibiotic growth promoters for pigs. Advances in pork production. Vol. 18 (2008). 4