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REPERCUSIÓN DE LA LACTANCIA
ARTIFICIAL SOBRE LA MADURACIÓN
INTESTINAL EN RATAS
Dra. Silvia Lopez Miranda
Especialista de Primer Grado en Fisiología Normal y Patológica.Instituto Superior de
Ciencias Medicas de La Habana.Facultad Salvador Allende.
silvia.miranda@infomed.sld.cu
1
Resumen.
Considerando la hipótesis, que la suspensión de la lactancia materna de forma precoz,
priva a la mucosa intestinal de los beneficios de los factores maduradores y protectores de
esta estructura que se encuentran presentes en la leche materna y no en otras leches y que
esto conlleva un retardo en la maduración intestinal, decidimos realizar un estudio
experimental en ratas Wistar lactantes a las que se le suspendió la lactancia materna y se le
suministró una fórmula de leche de composición similar a la de la rata, para evaluar la
repercusión de la suspensión de la lactancia materna y la administración de fórmulas
artificiales sobre la maduración intestinal. Para lograr este objetivo estudiamos la actividad
de la enzima lactasa como marcador enterocito-específico de la maduración intestinal y el
comportamiento de variables morfofuncionales del intestino como peso del órgano, peso de
la mucosa, índice peso/mucosa, longitud del intestino y analisis histológico del borde en
cepillo.
Comprobamos que en las crías con lactancia artificial se produce una disminución de la
actividad de la enzima lactasa y de las variables morfofuncionales del intestino delgado así
como alteraciones en el borde en cepillo dadas por disminución de la vellosidad, espesor
del glicocalix y número de células globadas.
2
1.-Introducción.
El abandono de la lactancia materna es un problema de salud mundial y es frecuente la
sustitución de la misma por fórmulas artificiales de leche u otros alimentos
(1,2)
. En la
actualidad se reporta en el mundo un retroceso en la utilización de la lactancia materna
prolongada, esto se ha visto asociado al aumento en la producción de fórmulas artificiales
de leche enriquecidas y al desarrollo de nuevas tecnologías que han permitido añadir
vitaminas, oligoelementos y nutrientes
(3-9)
.La mayor parte de las fórmulas artificiales se
obtienen de la leche de vaca, esta leche posee características físico-químicas muy diferentes
a la materna, que influyen además en su valor biológico y digestibilidad lo que les confiere
una digestión, absorción y respuesta hormonal diferentes
(10,11,12,13)
. Estas fórmulas
artificiales no pueden proveer al niño de los factores protectores y maduradores de la
mucosa intestinal, en primer lugar por la especificidad y en segundo lugar porque se
pierden durante el proceso de industrialización (13,14).
Se señala que la lactancia protege contra infecciones gastrointestinales y respiratorias sin
embargo en estudios inmunológicos no se han esclarecido aspectos importantes de los
mecanismos involucrados en los efectos de los factores maduradores y protectores aislados
en la leche materna(15-17) , contiene lactoferrina, lizosimas , IgA secretora, ácido ascórbico,
peróxido de hidrógeno y C3,(18,19,20), posee muchos lípidos entre ellos ácidos grasos libres
no saturados y monoglicéridos que rompen envolturas virales
leche oligosacáridos y glicoconjugados
21
, también existen en esta
que compiten con receptores en las células
epiteliales del intestino a los que se unen habitualmente bacterias
(19,20)
. El lactobacilo
presente en la leche materna se considera un factor de crecimiento y es la principal bacteria
que se encuentra en el tracto gastrointestinal del niño lactado a pecho, su crecimiento es
estimulado por polisacáridos N-específicos presentes en la leche materna pero no en la de
3
vaca (22,23), en el colon el crecimiento de esta bacteria produce una cantidad considerable de
ácido acético que inhibe el crecimiento de bacterias y hongos patógenos a este nivel
Durante la lactancia existe una protección contra la inflamación de causa alérgica, ya que
existe una hipofuncionalidad de los sistemas y mediadores de la inflamación debido a que
las células efectoras de esta reacción se encuentran ausentes prácticamente de la leche
materna, las proteasas, antiproteasas, antioxidantes y enzimas que degradan los mediadores
inflamatorios y los inhibidores de los leucocitos si se encuentran presentes en la leche
materna24. Existen además muchos factores de crecimiento en la leche materna que actúan
para fortificar los sistemas de barrera de las mucosas causando proliferación epitelial (23,24).
La leche materna se comporta como un fluido con propiedades maduradoras e
inmunomoduladoras no solo del intestino sino de todo el organismo (25, 26,27-30),
En los estudios que se realizan en la actualidad sobre maduración intestinal se utiliza con
mucha frecuencia la actividad de la enzima lactasa que cumple con los requisitos de ser un
marcador validable, reproducible, sensible y específica para este proceso27.
La maduración intestinal es un fenómeno complejo que involucra factores disímiles se ha
confirmado que en el mismo la nutrición no solo del niño sino incluso de la madre juega un
papel determinante (44-48).
El borde en cepillo de la mucosa intestinal es una membrana, cuya función está
determinada por sus propiedades físico-químicas, la expresión fenotípica y las células
absortivas del mismo se adaptan a los cambios en la dieta y todas estas propiedades pueden
ser modificadas por el tipo de nutriente (44-48).
El tipo de constituyente de la dieta es trascendental en el período neonatal inmediato ya que
existe una inadaptación de las enzimas gastrointestinales que puede ser causa de mala
digestión y mala absorción Para garantizar una función adecuada el tracto gastrointestinal
4
se precisa de una adecuada maduración que lo va a proveer de un sistema enzimático que
garantice la función digestiva y de una correcta estructuración de la pared para la absorción
de los nutrientes.
La lactasa es una disacaridasa se encuentra al igual que las demás ubicada en el borde en
cepillo de la vellosidad intestinal con la peculiaridad de ser la más expuesta de las enzimas
intraenterocitarias, es considerada un marcador de aparición precoz en la maduración
intestinal, su importancia en la estructuración del intestino delgado ha sido estudiada en
todo el mundo
(49-52)
. Esta enzima se encuentra ligada a la membrana por un enlace
hidrofóbico su actividad mayor se encuentra en yeyuno proximal y medio, a las 10 semanas
ya es posible detectarla en el feto, el recién nacido sano es capaz de hidrolizar 60 gramos de
lactosa en 24 horas (50-52).
La lactasa ha sido identificada como el marcador por excelencia de la maduración intestinal
en los mamíferos en edades tempranas de la vida, donde la leche constituye en estas
especies la forma principal de alimentación.
Al realizar este trabajo pretendemos demostrar que la suspensión precoz de la Lactancia
Materna y la administración de fórmulas artificiales a crías lactantes de ratas Wistar
produce un retardo en la maduración intestinal en las mismas, esto se traduce en una
afectación de las variables morfofuncionales del intestino delgado: Peso del intestino, peso
de la mucosa intestinal, índice peso/mucosa, longitud del intestino y estado histológico del
borde en cepillo y en una disminución de la actividad de la enzima lactasa intestinal.
5
3-Material y método.Tipo y diseño del estudio.
Se realizó un estudio en ratas Wistar lactantes a las que se les suspendió la leche materna
en diferentes momentos del período de 21 días en que dura este proceso en esta especie, a
los siete y catorce días de nacidas y se les suministró leche artificial , se tomó como base
para la formulación la leche NAN 1 de Nestlé (Swiserland), se realizó una fórmula de leche
similar en su composición a la leche de rata, para ello tuvimos en cuenta el estudio
realizado en el Centro Productor de Animales de Laboratorio de Cuba (CENPALAB) para
la formulación de la misma. Se confeccionó un modelo de lactancia artificial intermitente
decidimos aplicar un modelo de lactancia intermitente porque es más factible en nuestro
medio al carecer de bombas de infusión continua y porque además se aproxima más a la
forma habitual en que se alimenta esta especie.
Se confeccionaron 4 grupos:
Grupo1-Lactancia materna exclusiva hasta los 21 días (LM).
Grupo 2 -Lactancia materna exclusiva hasta los 21 días y sonda intra gástrica (LMSN).
Grupo 3-Lactancia artificial a partir de los 7 días de nacido (Lact.artif 1).
Grupo 4-Lactancia artificial a partir de los 14 días de vida (Lact. artif 2).
El grupo 2 se confeccionó con el objetivo de evaluar la posible repercusión del gavage intra
gástrico sobre la actividad disacaridásica por algún mecanismo de stress no descartable a
priori. Todas las crías se mantuvieron con lactancia materna exclusiva hasta los siete días
fueron separadas de la madre de acuerdo al grupo donde quedaron incluidas. Se utilizaron
los siguientes criterios: crías nacidas a término de 23 días en adelante, sanas sin
malformaciones visibles, con peso de 5grs o más. Se excluyeron del estudio: crías nacidas
antes del término, con pesos inferiores a los 5grs, con malformaciones visibles, las que no
6
presentaron un crecimiento y desarrollo adecuado en los primeros 7 días de vida y a las que
se le detectaron malformaciones durante la extracción de órganos.
Se les realizó examen físico y medición antropométrica del peso, talla, y largo de la cola
los días 0, 3, 7, 10, 14 y 21 del ciclo de vida. Para la lactancia artificial se confeccionó y
suministró la leche artificial con períodos intermitentes que están establecidos para la
especie, edad en días del animal y con los cuidados en su confección que exige
CENPALAB.
Se confeccionó una fórmula de leche teniendo en cuenta las necesidades específicas de la
especie, partir de los 14 días se les permitió a las crías la incorporación de alimentos
sólidos, utilizamos la ratonina, garantizando previamente la leche que le correspondía para
mantener el estímulo de la lactasa.
A los 21 días se procedió a su sacrificio, colocándolos en una campana con éter.
Se realizó la extracción de los órganos, los que fueron colocados en suero fisiológico y
pesados en una balanza analítica.
Los órganos y tejidos fueron procesados inmediatamente después de su extracción.
Se extrajo el intestino delgado, se resecó desde el ángulo de Treizt hasta su entrada a la
válvula ileocecal, el 45% de esta muestra fue considerada yeyuno y el resto íleon, se
procedió a un lavado gentil con suero fisiológico, se pesó y se midió, se separó una pequeña
porción para análisis histológico. Se raspó toda la mucosa para su pesaje, previamente se
diferenció la procedente de la primera porción de yeyuno para la determinación de lactasa.
El análisis histológico se efectuó en el departamento de Histología del mismo centro donde
se realizó el estudio. Técnica de Pass y Tinción con hematoxilina y eosina (83). Los cortes
histológicos fueron observados a microscopio óptico y sus imágenes fueron digitalizadas.
7
Análisis estadístico: se utilizó para el procesamiento de los datos el paquete estadístico
Sistac 3. Todas las variables analizadas fueron cuantitativas continuas, excepto el análisis
del borde en cepillo en el cuál se realizó una valoración cualitativa del mismo. Para
relacionar el tipo de lactancia con la actividad disacaridásica se utilizó un análisis de la
varianza de una vía (ANOVA de una vía).En el estudio de las variables antropométricas se
realizó un análisis de observaciones repetidas. Para el análisis de las variables
morfométricas y bioquímicas se realizó una comparación de medias.
Resultados.
Comportamiento de la actividad lactásica. La mayor actividad de la enzima se encontró en
el grupo de lactancia materna exclusiva (lact. Mat), los menores niveles de actividad de la
enzima se encontró en el grupo de lact. art. 1(lactancia artificial de 7-21 días), el grupo lact.
art. (2) , presentó niveles superiores de actividad lactásica que el grupo lact. art. (1), pero
niveles muy inferiores a los del grupo con lact. Mat., desde el punto de vista estadístico
existió una diferencia significativa entre el grupo de lactancia materna y los de lactancia
artificial. El grupo control positivo (lactancia materna exclusiva y sonda intra gástrica),
presentó una actividad de la enzima similar al de lactancia materna exclusiva, no existiendo
diferencias significativas entre estos 2 grupos. Tabla 1, Gráfico 1.
8
Tabla Nro1. Actividad de la enzima lactasa, en yeyuno de ratas Wistar lactantes
(µM/glucosa/mg proteína/h).
Grupo n=10
Actividad Lactasa
Lact Mat.( control)
17.29a
Lact Mat. y sonda
15.29a
Lact art. 1
7.84b
Lact art. 2
11.56c
Delgado. Letras diferentes denotan diferencias estadísticas significativas p<0.05.
Letras iguales denotan diferencias estadísticas no significativas p>0.05.
Grafica #1. Comportamiento promedio de la actividad de la enzima lactasa en
Intestino mM/ glucosa/mg de proteína /hora
Actividad Lactásica **
.
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
Control
positivo
Control positivo
Lac.Mat.
Lac.Mat.
Lact.art.(1) Lact.art (2)
Lact.art.(1)
Lact.art (2)
9
Tabla # 2. Variables morfofuncionales de intestino delgado.
Grupo n=10
Peso
Peso
Índice peso /
Longitud
Intestino
mucosa
mucosa
intestino
(grs.)
(grs.)
Lact Mat.
2.41a
0.98a
2.45a
62.55a
Lact.art 1.
1.77b
0.77b
2.28b
58.00b
Lact.art 2
1.84b
0.82c
2.32b
61.00a
(cm.)
Letras iguales denotan diferencia no significativas entre las medias (p>0.05).
Letras diferentes denotan diferencias significativas entre las medias (p< 0.05).
Gráfico # 2. Comportamiento promedio de la Longitud de intestino delgado. Fuente
Tabla 2.
63
Longitud Intestino
Delgado (cms)
62
61
60
59
58
57
Lact.mat.
Lact.mat.
Lact.art (1)
Lact.art (1)
Lact.art.(2)
Lact.art.(2)
El grupo con lactancia materna exclusiva presentó mayor longitud del intestino delgado, en
relación con los grupos de lactancia artificial existiendo una diferencia significativa entre el
grupo de lactancia materna y los de lactancia artificial, no existiendo diferencias
significativas
10
El peso de este órgano fue mayor en el grupo de lactancia materna exclusiva en relación a
los de lactancia artificial, no encontrándose diferencias significativas entre los de lactancia
artificial, pero sí entre estos últimos y los de lactancia materna. Gráfico 3.
Gráfico # 3. Comportamiento promedio del Peso del Intestino Delgado.Fuente Tabla # 2.
2.5
2
Peso
1.5
Intestino
1
(grs.)
0.5
C1
0
Lact Mat.
Lact.art 1.
Lact.art 2
Lactancia
Peso de la mucosa intestinal (gr.).
El grupo de lactancia materna exclusiva presentó mayor peso de esta estructura, mostrando
una diferencia estadísticamente significativa con los grupos de lactancia artificial, no
encontrándose diferencia entre estos últimos desde el punto de vista de la significatividad
estadística. Gráfico 4.
Gráfico # 4. Comportamiento promedio del Peso de la mucosa del Intestino.
11
Peso de la Mucosa
(g)
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
Lact.mat.
Lact.mat.
Lact. art.(1)
Lact. art.(1)
Lact.art.(2)
Lact.art.(2)
Delgado.
Indice peso del intestino/ peso de la mucosa intestinal .Este parámetro presentó un mayor
valor en el grupo de lactancia materna exclusiva, evidenciándose diferencia significativa
con los grupos de lactancia artificial.
Gráfico # 5. Comportamiento promedio del Índice Peso-mucosa del Intestino Delgado.
Indice Peso-Mucosa
del Intestino Delgado
2.45
2.4
2.35
2.3
2.25
2.2
2.15
Lact.Mat.
Lact.Mat.
Lact.art
(1)
Lact.art (1)
Lact.art.(2
)
Lact.art.(2)
Imágenes. Cortes histológicos del borde en cepillo de yeyuno de crías de ratas Wistar de 21
días .
La imagen 1, muestra el corte histológico de las vellosidades intestinales del grupo con
lactancia materna exclusiva, en el mismo se observa gran número de vellosidades, células
globadas y un mayor diámetro del glicocálix.
12
.
La imagen 2, muestra un corte histológico de las vellosidades del grupo con lactancia
artificial de 7 a 21 días (lact. art. 1), como podemos observar existe pérdida de la
conformación de la vellosidad, un glicocálix delgado y ausencia de células globadas.
En la imagen 3 podemos observar el corte perteneciente al grupo con lactancia artificial de
14 a 21 días, en la misma se aprecia una altura de la vellosidad similar a la del grupo con
lactancia materna exclusiva pero menor diámetro del glicocálix y poca células globadas.
13
DISCUSIÓN.
El destete precoz constituye una ruptura del equilibrio adaptativo, su repercusión en el
desarrollo del sistema gastrointestinal de animales y humanos ha sido estudiada y existen
resultados que sustentan esta teoría
(86,87)
. La maduración de intestino como órgano va a
depender de la alimentación en las primeras etapas de la vida entre otros aspectos no menos
importantes. Lebenthal88, plantea que la ontogenia del sistema gastrointestinal es el
resultado de 4 determinantes: entorno genético, desarrollo intrínseco y reloj biológico,
mecanismos endógenos regulatorios y factores ambientales (dieta). Este desarrollo es
secuencial, se inicia en la vida intra útero y se extiende al período postnatal. El desarrollo
del intestino como una estructura funcional que garantiza la vida depende de señales
morfogenéticas entre las células que originan cambios en la expresión de los genes, donde
los factores neurohormonales y dietéticos (tipo de alimento, etapa de la vida, contenido,
volumen y concentración del alimento) juegan un papel decisivo (87, 88).
14
En nuestro estudio demostramos que el tipo de lactancia repercute en la maduración del
intestino delgado,. La lactancia artificial ocasiona modificaciones y alteraciones en la
actividad enzimática y funcional de este órgano.
La enzima lactasa como marcador de la maduración del intestino delgado, como
expresamos en los resultados la mayor actividad de la enzima se encontró en los animales
con lactancia materna exclusiva, los factores que se encuentran en la leche materna y que
estimulan el crecimiento y desarrollo de las estructuras del intestino delgado, enterocito,
vellosidad, glicocálix), ejercen un efecto positivo sobre la expresión genética y síntesis de
esta enzima, los resultados de Uni y cols89 en 1998 no concuerdan con los nuestros,
tampoco coincide Dorhout90 que no encontró diferencias significativas entre grupos
alimentados con lactancia materna y artificial, otros han obtenido resultados parecidos a los
nuestros(75,80,91. Algunos autores han reportado un aumento de la actividad de la enzima en
animales vírgenes de gérmenes patógenos potencialmente agresivos, en esto se incluye a
animales y humanos con lactancia natural los cuales presentan un ecosistema intestinal con
una flora benigna, mientras los alimentados con fórmula presentan
negativos potencialmente patógenos(38,90,91,92).La actividad
gérmenes gran
de la enzima lactasa se
relaciona directamente con la presencia de una maduración adecuada del intestino, en
animales alimentados artificialmente existe una disminución del aporte de micronutrientes
y macronutrientes, de las hormonas , enzimas y factores defensivos de la mucosa, aunque
en la mayor parte de las formulaciones de leche artificial se observan las recomendaciones
nutricionales para la edad, está demostrado que la absorción de los minerales, Vitaminas y
oligoelementos no es óptima ya que el vehículo (leche) presenta variaciones en su
composición, especificidad, densidad, osmolaridad, digestibilidad y
biodisponibilidad,
además de la ruptura del equilibrio adaptativo que representa el destete (89,94, 102).A El grupo
15
de animales a los que se le prolonga un poco más la lactancia (grupo con lactancia materna
hasta los 14 días y artificial de los 14-21 días) la actividad de la enzima es mayor que la del
grupo destetado a los 7 días y con lactancia artificial de 7-21 días, aunque la actividad de la
lactasa en ambos grupos sigue siendo inferior a la del grupo con lactancia materna
exclusiva. La nutrición y el tipo de nutriente se relaciona con la actividad lactásica, se ha
encontrado disminución de la actividad de la enzima lactasa y translocación bacteriana en
animales con deprivaciones nutricionales ligeras
(76,89,92,93)
, el destete se considera una
deprivación de los nutrientes especie específico, necesarios para el crecimiento adecuado
del animal, pensamos que muchos de los componentes de la leche materna pertenecen a
esta categoría, fundamentalmente teniendo como referencia el momento del ciclo vital en
que este alimento es indispensable para la supervivencia de cualquier mamífero.
Se ha demostrado que la actividad de la lactasa disminuye en animales alimentados
artificialmente con bajo contenido de hierro en la leche esto ha sido encontrado por
Fernández y cols97, existe una relación entre el contenido de lactosa y la absorción de este
mineral, a pesar de que la leche materna humana tiene menor contenido de hierro que la de
vaca se ha demostrado que los niños lactados a pecho presentan niveles mayores de
hemoglobina que los alimentados artificialmente, al parecer existe una modulación positiva
de la absorción de hierro en la lactancia natural que no se produce en los niños alimentados
con fórmulas, y que es producida por los compuestos bioactivos presentes en la leche
materna Fenferbauss 98
El peso de la mucosa fue una de ellas, los animales con lactancia materna presentaron
mayor peso de esta estructura, existió una disminución de la misma en los animales con
lactancia artificial. La mucosa es la porción funcional del intestino delgado, a este nivel
acontecen los eventos de digestión y absorción de los nutrimentos, la composición de esta
16
estructura a su vez depende de la dieta, se ha demostrado que la membrana de la leche
materna( una estructura micelar presente en la misma), es determinante para un buen
desarrollo de la funcionalidad de la membrana gastrointestinal de la cual la mucosa es
definitoria en el proceso de asimilación de los nutrientes, las membranas de la leche
materna actúan como emulsificadores permitiendo que la grasa permanezca dispersa en la
fase acuosa de la leche, proveyendo una barrera que previene la lipólisis y la oxidación de
las grasas(99) . Esta membrana contiene gran cantidad de proteínas, fosfolípidos,
glicoproteínas, triglicéridos, colesterol, esfingomielina, fosfatidilcolina y enzimas que es
absorbido de forma integral a través de la mucosa intestinal y que a su vez aporta parte de
los componentes de la barrera absortiva del intestino, esta forma de absorción solo se ha
descrito en mamíferos con lactancia materna y los mecanismos involucrados en el proceso
no han sido esclarecidos. Las hormonas y otros nutrientes presentes en la leche ,materna
son un fuerte estímulo para el desarrollo
y proliferación de esta estructura(90-101).Los
efectos mitogénicos de diferentes tipos de factores de crecimiento presentes en la leche
materna sobre la mucosa han sido demostrados (80,77).Pensamos que la ausencia o disbalance
de algunos nutrientes producen una afectación de esta estructura, fundamentalmente en
diferentes condiciones carenciales no severas, lo que se encuentra en reportes de estudios
sobre este tema (76,89, 97,102).
En el análisis de peso del intestino el mayor peso encontrado en los animales con lactancia
materna está influido por un mayor peso de la mucosa de esta estructura en este grupo
experimental, aunque los factores implicados en el desarrollo de la mucosa también son
válidos para el resto de las estructuras de este órgano, se añaden además péptidos
intestinales, neuropéptidos, hormonas y probióticos(22-25,103) que se utilizan durante la
lactancia natural y que tienen efectos estimulantes para el desarrollo y crecimiento del
17
sistema gastrointestinal, y en específico sobre las diferentes capas musculares, vasos
sanguíneos y otras estructuras de este órgano(25-30,103). Los animales con lactancia artificial
se ven privados de todos estos efectos beneficiosos y el proceso de maduración se ve
retrasado en comparación a los que son lactados de forma natural.
El índice peso del intestino / peso de la mucosa representa la relación entre el peso total del
órgano y la parte funcional del mismo (mucosa) los mayores valores se observaron en las
crías que se mantuvieron con lactancia materna exclusiva se explica por lo antes
mencionado, al estar beneficiadas por más tiempo con la lactancia materna permitió que
estos factores ejercieran un efecto estimulante más duradero y proporcionarán un desarrollo
más efectiva de la mucosa, lo que a su vez ocasiona un aumento del valor de este índice, el
grupo de lactancia materna de solo 7 días (lactancia artificial de 7-21 días) presentó un
índice menor al recibir menor estímulo de los factores protectores y maduradores y
presentar niveles inferiores en el peso de la mucosa intestinal.
El intestino de los animales con lactancia materna exclusiva presentó mayor longitud,
aunque hemos encontrado pocos reportes que corroboren o descarten este hecho en las
revisiones realizadas, existe la referencia de Steeb que encontró un aumento en un 36% de
esta estructura en animales lactantes tratados con Factor de Crecimiento epidérmico(80),
pensamos que es posible que este fenómeno se produzca en primer lugar por esta primera
etapa de la vida del animal en la que se están suscitando procesos de elongación de órganos
y tejidos, y por la influencia de los factores mitogénicos que causan estimulación de la
celularidad y cuyos efectos son desencadenados por muchos de los compuestos bioactivos
presentes en la leche materna.
El análisis histológico del borde en cepillo de los animales con lactancia materna mostró un
desarrollo de las vellosidades con gran número de las mismas, así como la presencia de
18
células globadas, glicocalix (Imagen 1). El grupo destetado a los 7 días presentó una
disminución del tamaño de la capa mucosa, disminución del glicocálix, pocas células
globadas (Imagen 2), el grupo de lactancia materna hasta los 14 días y artificial de 14-21
días presenta una estructuración del borde similar al del borde en animales con lactancia
materna exclusiva (Imagen 3). Esta estructura desempeña un papel crucial en la digestión y
absorción de los alimentos, la presencia en su zona más expuesta de la lactasa hace que
cualquier cambio, agresión del intestino no solo afecte al borde en cepillo sino también a
esta enzima. Se ha demostrado que los animales mantenidos en regímenes convencionales
libres de gérmenes al igual que en niños alimentados con lactancia materna exclusiva y la
presencia de una flora benigna, las enzimas de esta estructura y sus componentes se
mantienen con un adecuado funcionamiento (12, 91, 92,93).
También se ha encontrado que el déficit de vitaminas fundamentalmente liposolubles se
relaciona con alteraciones del borde89. Otros autores han encontrado que los factores de
crecimiento presentes en la leche materna producen un aumento de la vellosidad y un
aumento de la lactasa (75,80).
CONCLUSIONES.
-La suspensión de la lactancia materna y la administración de fórmulas artificiales de leche
producen un retardo de la maduración intestinal en crías lactantes de ratas Wistar, esto se
manifiesta en una disminución de la actividad de la enzima lactasa intestinal y de las
variables morfofuncionales del intestino delgado estudiadas, así como en una afectación del
borde en cepillo..
19
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.
1-Fernández-MC. Lactancia materna y enfermedad diarreica. Su estudio en servicios de
gastroenterología. Tesis de terminación de residencia.1989.
2-López García-CA. Causas del fracaso de la lactancia materna. Rev Cub MGI 1995;3:3741.
3-Alikasifoglu-M;Eginez-E;Gur-ER;Baltas-E;Beker-B;Arvas-A.Factors
influencing
the
duration of exclusively breastfeeding in a group of Turkish women.Lact 2001 Aug;17,
3:220-226.
4-Ryan-AS;Rush-D;Krueger-FW; Lewandowsky-GE. Recent declines of breastfeeding in
the United States.Pediartrics 1991 Oct;88( 4 ):873-4.
5-Heat-AL;Tuttle-CR;Simmons-MS;Ceghorn-CL;Parnell-WR.A
longitudinal
study of
breastfeeding and weaning practices during the first year of life in Dudenin,New Zeland.J
Am Diet Assoc 2002 Jul;102( 7):937-943.
6-Chiye-JK;Lim-CT.Breastfeeding at 6 months and effects on infections.Singapore Med J
1998 Dec;39( 12):551-556.
20
7-Lawoguin-TO;Olawayi-JF;Onadenko-MO.
Factors
Associated
with
exclusive
breastfeeding in Ibardan,Nigeria.J Human Lact 2001 Nov;17( 4):321-5.
8-Ryan-AS;Wenjun-Z;Acosta-A.Breastfeeding Continues to increases into the new
milenium.Pediatrics 2002 Dec;110( 6):1103-9.
9-Bagwell-JE;Kendrick-OW;Still-KR;Leeper-JD;Espy-ML,Gendell-ML.Breastfeeding
Among women in Alabama. J Huma Lact 1992 Dec; 8(4):205-8.
10- Schulman-RJ; Schanler-RJ;Land-C.Early feeding, feeding tolerance, and lactase
activity in preterm infants.J Pediatr 1998 Nov;133(5):645-9.
11-Lloyd-B; Halter-RJ;Kuchan-MJ.Formula tolerance in postbreasfed and exclusively
formula-feed infants.Pediatrics 1999 Jun;103(1):e7.
12-Welsh-E,May-JT.Antiinfected properties of breast milk.J Pediatr 1979, 94:1-9.
13-Lebenthal- ;Leung-YK.Feeding the premature and compromised infant;Gastrointestinal
consideration.Peditr Clin North Am 1988;35:215-238.
14-Cunninham-AS.Breastfeeding and morbidity in industrialized countries:An update.In
Jelife DB, eds.Raven Press.New York.1981;129-38.
15- Cunninham-AS.Morbidity in breastfeed and artificially feed infants. Pediatr
1999;95:685-89.
16-Holmgren- J;Svennerho-AM;Abren-C.Nonimmunoglobulin fraction of human milk
inhibits bacterial adhesion(hemaglutination) and enterotoxine binding of Ecoli and
VCholerae.Infect Immun 1981;33:136-141.
18- Issac-CE;Thormar-H;Pessolano-T.Membrane disruptive effects of human milk.
19-Gillen-FD;
Nerver-DS;
Wang-CS.Human
milk
kill
parasite
protozoa.Science
1983;221:1290-1292.
21
20-Welsh-JK; Arsenaki-SM; Collen-RJ; May-JT.Effect of antiviral lipids ,heats and
freezing on the activity of virusses in human milk.J Infect Dis 1979; 140:332-338.
21-Benno-Y,Sawada-K,Misota-T.The intestinal microflora of infants:composition of faecal
flora in breastfed and bottle feed infants.Microbiology and Immunology 1984; 28:975-986.
22-Holmgreen-J; Svennerholm- AM; Lindblood-M.Inhibitory of bacterial adhession and
toxic binding by glycoconjugated and oligosaccharide receptor analogues in human
milk.In: In Human lactation 111:the effect of human milk on the recipient infant.Plenum
Press,New York.1987:251-259.
23-Cebra-JJ.Influence of microbiota on immune system development. Am-J-Clin-Nutr
1999;69,1046s-1051s.
24-Underdown-BJ;Knight-A;Papsin-FR.The relative paucity of IgE in human milk.
Immunol 1987 ;6,116:1435-1438
25- Goldman- AS;Atkinson-SA;Hanson-LA.Human Lactation111:The effect of human
milk.IN :Board RG, ed.Natural antimicrobial Systems.International Dayri Federation U.K.
:Bath University Press, Belgium, 1986:1-17.
26-Jarocka-E;Keelan-M;Wierzbicki-T;Clandenin-T;Thompson-ABR.Early
dietary
experiences influences ontogeny of intestine in response to dietary lipids changes in later
life. Am-J-Physiol-Gastroenterol -Liver 1998;275:6250-6258.
27-Dipplock-AT;Aggeth-PJ;Ashwell-M;Bennett-F;Fern-EB;Roberfun-MB.Scientific
concept of functionally food in Europe:consensus documen.British Journ Nutr 2002,
81,supp 1s-2s:275-279.
28-Ferrari-RP;Diamond-JM.Specific regulation of intestinal nutriment transportes by their
dietary substrates. Annu Rev Physiol 1989; 51-125.
22
29-Jhonson-LR.Regulation of gastrointestinal mucosal growht. Physiol Rev 1988;68, 456461.
30-Jhonson-L.Phisiology of the gastrointestinal tract.Second Ed.New York, Raven
Press,1987:336-339.
31-Buddinton-RK.Nutrition and ontogenic development of the intestine.Can Physiol
Pharmacol 1998;72:251-259.
32-Hamosh-J;Margertie-T.Enzymes in human milk:their role in nutrient digestion,
gastrointestinal function and nutrient delivery to the newborn infant.Teexbook of
Gastroenterology and Nutrition in Infancy, Cap 5:231-234Second edition edited by E
Lebenthal.Raven Press,New York c,1989.
33-Hauri HP; Sterchi EE; Fransen JA; Marxer- MA. Expression and transpoprt of
microvillus membrane hydrolases in human intestinal epitelial cell. Cell Biol 1986;
101:838-851.
34-Antonowicz- I; Chang- SK; Grahand- R. Development and distribution of Lisosomal
enziymes and disaccharidases activity in the human fetus.Gastroenterology 1992;72:12991303.
35-Antonowicz- I; Milunsky- A;Lebenthal- A. Disaccharidases and lisozomal enzyme
activity in amniotic fluid, intestinal mucosa and meconium:correlation between activities in
human fetus small intestine. Biol Neonate 1977;32:944-954.
36-Dalqvist-A.Assay of the intestinal disaccharidase.Anal-Biochem 1968;22:99-107.
37-Winnick-M.Role of sensory stimulation in energy economy of mother and infant IN
Teexbook of Gastroenterology and Nutrition in Infancy,second edition.,edited by E
Lebenthal.Raven Press,New York 1989:45-49.
23
38-Dobbing-J.Quantitative growht and development of human brain.Arch-Dis-Child
1983;48:723-731.
39-Lebenthal-E.The
ontogeny
of
the
smallintestinal
epitelium.Jour-Paren-Ent-
Nutr1986;;23;53-56.
40-Uni-Z;Zarger-R.Vitamin A deficiency induces morphometric changes and decreases
functionally in chicken small intestine.Br-J-Nutr 1998 Oct;80(4):401-407.
41-Dorhout-B;van Frasen-A.Oral administration of deuterium-labeled polyamines to
sucking rats pups luminal uptake, metabolic fate and effects on gastrointestinal
maturation.Br-J-Nutr 1997 Oct;78(4):639-654.
42-Reifen-R;Zaiger-G; Uni-Z.Effect of vitamin A on small intestinal brush border enzymes
in rat.Int-Vitam-Nutr-Res 1998;68(5):639-654.
43-Korakova-H;Stepankova-R;Rehakova-Z. Difference in enterocite brus border enzymes
activities in ageing rats rearing in germ free and conventional conditions.Physiol-Res
1998;47(4):253-258.
44-Gibson-GR;Roberfroid-MB.Dietary Modulation of the human colonic microbiota:
introducing the concept of prebiotics. Journal of Nutrition 2002;125:1401-1412.
45- Hamosh-M.Introduction:Should infants formulas be supplemented with bioactives
components
and conditoanally essential nutrients present in huiman milk.Journal of
Nutrition1997;127:9715-9745.
46-Weaver-LT; Desai-M; Austin-S.Effects of protein restriction in early life on growth and
fuction of the gastrointestinal tract of the rat.J-Pediatr-Gastroenterol-Nutr 1998
Nov;27(5):553-559.
47-Mountzouris Konstantinos-M; Mc Cartney-AL,Gibson-GR. Intestinal microflora of
human infants and current trends for its modulation.Br-J-Nutr 2002;87:405-420.
24
48-Fernández-MJ;Galvao-LC;Bortolozzi-MR.Disaccharidase level in normal epithelium of
the small intestine of the rat with iron defficiency anemia.Braz-J-Med-Biol-Res 1997
Jul;30(7):849-854.
49-Congreso Latinoamericano de Nutrición Enteral y Parenteral,.Conferencia: leche
materna uso terapéutico, Rubens Fenferbaum, La Habana, Cuba 23-27 Nov 2003.
50-Patton-S;Keenan-JB.The milk fat globule membrane.Biochem Biophys Acta 1995
;14:269-273.
51-Lifschitz-CH;Smith-EO;Garza-C.Delayed Complete functionally lactase sufficiency in
breast feeding infant.Journ-Pediatr-Gastroent-Nutr 1983; 2:478-482.
52-Varela Nutrición En Tresguerres Tratado de Fisiología Médica, segunda edición,
editado por Mc Graw Hill, Barcelona, España 2001:193 265.
53-Kaonass-M;Deloger-P;Dandridof-S.Involvement of bombazine in spermine-induced
corticosterone
secretion
and
intestinal
maturation
in
suckling
rats.J-Endocrinol
1997Jun;153(3):429-436.
54-Matther-IH; Keenan-JB.Studies on the structure of milk fat globule membrane.JMembr-Biol 1995;21:65-85.
55-Lee-MF;Montgomery-RR.Total intestinal lactase and sucrase activity are reduced in
aged rat.J-Nutr 1997 Jul;127(79:1382-1387.
56-Stebb-CB;Lamb-J;Shoubridge-CA.Systematically butr not orogastically delivered
insulin-like growth factor(IGF) stimulates intestinal disaccharidase activity in two groups
of suckling rats.Peditr-Res 1998 Nov;44(5):663-667.
57-Svisky-Gross S.Pathogenic strains of E.Coli(0:111) among prematures and the use of
human milk controlling the outbreak of diarrhea.Ann Pediatr 1958;190:109-115.
58-Giorgy-P, Jeanly-RW,von Nicolai-H, Zcilliken-F.Undializable growth factors of
lactobacilllus bifidus.Pensilvania.Eur J Biochem, 1974;43:29-33.
25
59 Bennet - R; Nord-CE. Transient colonization of the gut of newborn infants by orally
administration bifidobacteria and lactobacillus. Acta Pediatr 1992;81;784-87.
60-Richarson-T; Mattarella-N.Hormonal substances in human milk, cow milk and diary
products.J Food Protein 1977;40:57-74.
61-Choi-YS;Cho-SH;Kim-HJ.Effects Of soluble diettrary fibers on lipid metabolism and
activities
of
intestinal
disaccharidases
in
rat.J-Nutr-Sci-Vitaminol
Tokyo
1198
Oct;44(5):591-600.
62-Koldovski O.Hormones in milk.Life Sci 1980; 26:1833-1836.
63-Hazum-E.Hormones and neurotransmitter in milk.Tred Pharmacol Sci 1983;4:454-456.
64-Second International Symposium in "Hormones in milk: their physiological
role".Smolenicu,Czechoslovakia September 16-20,1895.Endocrinol Exp 1996;20:97-136.
65- Koldovski-O; Thorbough-W. Hormones in milk: a review. J Pediatr Gastroenterol Nutr
1987;6:172-196.
66- Koldovski-O. Hormones in milk: their possible physiological significance for the
neonate. Teexbook of Gastroenterology and Nutrition in Infancy, Second edition edited by
E Lebenthal. Raven Press, New York c,1989:231-246.
26
Bibliografía anterior.
19-Butha-ZA;Nizami-SQ;Isari-Z.Lactose
intolerance
in
persistent
diarrhea
during
chlidhood:the role of a traditional rice-lentil(khitchtri) and yogourt diet in nutritional
management.JPMA-J-Pak-Med-Assoc1997Jun;47(1):20-4.
20-Lebenthal-E ;Leung-YK. Development changes of the gastrointestinal tract in the
newborn.In Stern L (ed):Feeding the sick infant,Nestlé Nutrition Workshop series Vol
11.New York,Raven Press, 1987.
21-Polkin-SA, Katz-M, Brown-RE et al.Oral poliovirus vaccination in newborn African
infants.The innhibitory effect of breast feed. Am J Dis Child 1966;111:27-30.
31-Cleary-TG; Chambers-JP; Pickering-LK. Protection of suckling mice from the heatstable enterotoxine of E coly by human milk.J Infect Dis1983,148:1114-1119.
32-Svanborg-Eden-C;Anderson-B; Haybrerg- L. Receptor analogues and anti-pili
antibodies as inhibitors of bacterial attachment in vivo and in vitro.Am NY Acad Sci
1983;409-502.
33-Holmgreen-J; Svennerholm- AM; Lindblood-M.Inhibitory of bacterial adhession and
toxic binding by glycoconjugated and oligosaccharide receptor analogues in human
milk.In: In Human lactation 111:the effect of human milk on the recipient infant.Plenum
Press,New York.1987:251-259.
27
36-Gillen-FD;
Nerver-DS;
Wang-CS.Human
milk
kill
parasite
protozoa.Science
1983;221:1290-1292.
37-Miller-TG. Killing and lysis of gram-negative bacteria through the synergistic effect of
hidrogen peroxide, ascorbic acid and lisozyme. J Bacteriol 1969;98:949-955.
40-Prentice-E;Ewing-G;Roberts-SB.The nutritional role of breast milk, IgA and lactoferrin.
Acta Pediatr Scand, 1987;76:592-598.
53-Boyle-J;Celono-P;Koldowsky-O.Demostration
of a difference in expression of
maximal lactase and sucrasse activity along the villus in the addult rat jejunum.
Gastroenterology 1989;79:503-507.
54-Auricchio-S;Rubino-A; Murset-G.Intestinal glyciosidase activities in the human
embryo, fetus and newborn.Pediatrics 1965; 35:944-954
55-Koldovsky-O;Hereingova-V;Jirzova-V;Kruml-J;Toelstra-JA.Development of enzymes
and absorption procces in the small intestine of human fetus.In:Jonxis-JHP;VisserHKA;Toelstra-JA
eds.
Aspects
of
prematuruty
and
dismaturity.
Nutricia
Symposium.Leiden:Kroese,1968.
56-Dalqvist-A;Imbert-T.Development of the intestinal disaccharidases and alkaline
phosphatase activities in human fetus.Clin Sci ,1966;30:517-528.
57-Danielsen-EM;Skovjerg-H;Noren-O;Sjostrom-H.Biosynthesis
of
intestinal
proteins.Nature of the precursor form of microvillar enzymes from Ca+2-precipitated
enterocyte menbranes.Feebs Leet 1981; 132:197-200.
58-Sjostrom-H;Noren-O; Danielsen-EM;Skovjerg-H.Structure of microvillar enzymes in
different
phases
of
their
life
cycles.In:Porter-R;Collin
GM,eds.Brush
border
membranes,Ciba Foundation Symposium.
28
59-Danielsen-EM;Skovjerg-H;Noren-O.Biosynthesis
of
intestinal
microvillar
proteins.Intacellular processing of lactase-plhorizin hydrolase.Rev Commun 1984;122:8290.
60-Naim-HA;Sterchi-EE;Lentze-MJ.Biosynthesis and maturation of lactase-phlorizin
hydrolase in the human small intestinal epitelial cells.Biochem 1991;L24:427-434.
61-Oliva-CA;Scalesky-J, de Morais-MB.Severe acute diarrhea associated to classic entero
pathogenic EColi:clinical features and faecal losses in hospitalized infants.Rev-Assoc-MedBras 1997, Oct-Dic;43(4):283-285.
62-Palma-D;Oliva-CA;Taddeu-JA;Fagundes-Neto-U.Acute diarrhea:stool water loss in
hospitalized infants and its correlation with ethiologic agents and lactose contents in the
diet. Arg-Rev-Gastroenterol 1997,Jul-Sept;34(3):1876-1895.
63-Vanderhoof-J. Chronic diarrhea. Pediatr-Rio 1998,Dec 19(12):418-422.
64-Vernia-PI;Ricciardi-MR;Frandina-C.
Lactose
malapsortion
an
irritable
bowel
syndrome.Effect of a long-term lactose free diet. Ital-J-Gastroenterol 1995 Apr; 27(3):117121.
65-Anuario Estadístico del Minsap. Disponible en http/: www.sld.cu
66-Launiala-K; Kuilunum-P; Visakorpi-JK. Disacharidase and histology of duodenal
mucosa in congenital lactose malabsoprption.Acta Pediatr 1966;55-257-429.
67-Levin-B;Abraham-SM;Burguess-EA;Wallis-PG. Congenital lactose malabsortion.Arch
Dis Child 1970;45:173-177.
68-Freinburguess-AU; Schmithz-J; Schindler-M et al. Protein pattern of brush border
fragments in congenital lactose malapsorption and in specific hypolactasia of the adult.N
Engl J Med 1976;294:1030-1035.
29
69-Hadorn B;Green-JR;Sterchi-EE; Hauri-HP. Biochemical mechanism in congenital
enzymes deficiencies of the small intestine.Clin Gastroenterol 1981;10:671-690.
70-Lorenz-Meyer-H;Blum-AL;Haemrely-HP;Linenza-G.A second enzymes
deffect in
adquiered lactase deficiency: lack of small phlorizin-hydrolase. Eur J Clin Invest,
1972;2:326-331.
71-Alpers-D;Seethanam-B.Pathophysiology of diseases involving intestinal brush border
enzymes.New England J Med 1977;296:1047-1050.
72-Troelsen-JT;Mitchelmoore-C;Olsen-J.An enhancer activates the pig promoter intestinal
cells. Gene 2003,Feb13;305(1):101-11.
73-Hadorn-HB;Lentze-MJ;Verfuerth-MO;Rossi-E.Congenital
enzymes and ttransport
deficiency
of
intestinal
defects of monosacharids and aminoacids IN Teexbook of
Gastroenterology and Nutrition in Infancy,second edition, edited by E Lebenthal, New
York, Raven Press,19989:723-727.
74-Harada-E;Hashimoto-Y;Syouto-B.Polydextrose
induces
precocious
cessation
of
intestinal transmission and development of digestive enzymes in the suckling rats.CompBiochem-Physiol, 1999, :479-485.
75-Houle-VM.Small intestinal disaccharidase activity and illeal villus height are increases
in piglets consuming formula containig recombinant insulin-like growht factor.J Pediatr
Res, 1997 Jul;42(1):78-80.
78-Kojima-T;Nishimura-M;Yagina-T.Effect of intermitent feeding on the development of
disaccharidase actvities in reared rat pups.Comp-Biochem-Physiol 1998 Nov;121(3):28997.
30
79-Yakima-S;Kanno-T;Katoru-Y.Gut hypertrphy in response to the ratios of casein and
whey protein in milk formulas in artificially reared rat pups.Biol-Neonate 1998
Oct;74(4):314-322.
81-ILAR.Commitee of Laboratory animals Research.Control of diets in laboratory animals
experimentation.ILAR News 1998;21,A3-A12.
82-Forte Miranda-C;Ponce-P. Desarrollo de una metodología para la liberación
y
extracción de la leche de la rata. Evaluación de la composición nutritiva. Rev-HispanoamAnim-Labr 2001; 6(1):5-6.
83-Dalqvist-A.Assay of the intestinal disaccharidase.Anal-Biochem 1968;22:99-107.
84-Lowry-OH;Rossenbrough-NJ;Farr-AL;Randall-RJ.Protein Measurements with the Folin
Phenol Reagent.J-Biol-Chem 1977: 345-476.
85-Mallory FB.Pathological techniques.Philadelphia WB.Sanders Co,1944:126 139.
104-Kwu-T,Kwon-S.Disaccharidase activity in rat cecum and colon with hiperplatia
induced by maltitol or gluconoman.J- Nutr-Sci-Vitaminol Tokyo1998 Feb; 44(1):69?73.
31