PRODUCCIÓN DE AUTODEFENSAS EN LA PLANTA COMO PROMOTOR DE RESISTENCIA AL COMBATE DE HONGOS OOMICETOS. ING. LUIS EDUARDO GONZALES CEPEDA ® 2007 Date First Observed (approx) Fungicide or fungicide class Year of commercial use before resistance observed (approx) Main crop diseases and phatogens affected Refs + 1960 Aromatic hydrocarbons 20 Citrus storage rots, Penicillium spp. 10 1964 Organo mercurials 40 Cereal leaf spot and stripe, Pyrenophora spp. 11 1969 Dodine 10 Apple scab, Venturia inaequalis 12 1970 Benzimidazoles 2 Many target diseases asnd pathogens 13 1971 2-Amino-pyrimidines 2 Cucumber and barley powdery mildews, Sphaerotheca fuliginea & Erysiphe graminis 14 1971 Kasugamycin 6 Rice blast, Magnaporthe grisea 15 1976 Phosphorothilates 9 Rice blast, Magnaporthe grisea 15 1977 Triphenyltins 13 Sugar-beet leaf-spot, Cercospora betae 16 1980 Phenylamides 2 Potato bight and grape downy mildew, Phytophthora infestans & Plasmopara viticola 17 1982 Dicarboximides 5 Grape grey mould, Botritis cinerea 18 1982 Sterol demethylation inhibitors (DMI’s) 7 Cucurbit and barley powdery mildews Sphaerotheca fuliginea & Erysiphe graminis 19 1985 Carboximides 15 Berley loose smut, Ustilago nuda 20 • La investigación de los elicitores está orientada a la creación de una nueva generación fungicidas denominado “Promotores de las defensas de las plantas” • Materiales de origen Orgánico de alta biodisponibilidad y de actividad sistémica. • Las plantas han evolucionado con sofisticados y vigorosos sistemas de defensas para protegerse de los patógenos o cualquier agresor. • Estos sistemas pueden ser efectivos y una vez montados pueden ser capaces de prevenir la infección de cualquier patógeno que ataque o dañe a una planta. Desde 1882 se sabe del control que ejercieron los iones de cobre sobre patógenos (mildius) en cultivos como: uva y papa y posteriormente los elementos de manganeso y el hierro facilitaron el control de enfermedades en arroz y fríjol. Su participación está asociada a la acción de varios factores que catalizan las reacciones de las estructuras de las plantas y las defensas que tienen las mismas al ataque de patógenos. La mayoría de las plantas, generan compuestos antimicrobianos que se acumulan a altas concentraciones, después de infecciones microbianas o fungosas ayudando a limitar la dispersión del patógeno. • La mayoría de las plantas muestran cierta resistencia a la mayoría de los patógenos en forma natural (auto-defensas). La defensa de las plantas frente a los patógenos biotrofos obligados (parásitos obligados ej. Royas Ustillago y Tilletia) es controlada por un bajo número de sustancias llamadas: FITOALEXINAS. FITOALEXINAS Estas sustancias llamadas fitoalexinas (fito=planta, alexin= compuesto que repele), son compuestos producidos después de una infección bajo la influencia de dos sistemas metabólicos: la interacción de un organismo hospedero (planta) y un huésped (patógeno) y la inhibición del patógeno. Otra definición de las fitoalexinas es: compuestos antimicrobianos que se acumulan en las plantas en altas concentraciones, después de infecciones bacterianas o fúngicas y ayudan a limitar la dispersión del patógeno. Las fitoalexinas tienen como características sobresalientes las siguiente: • No se detectan antes de la infección. • Se sintetizan muy rápido, en pocas horas (1 a 8 horas) después del ataque microbiano. • Su formación está restringida a una zona local alrededor del sitio de infección. • Son tóxicas a un espectro amplio de hongos y bacterias patógenas en plantas. Mecanismos de las plantas Las sustancias que estimulan la síntesis de fitoalexinas se denominan ELICITORES. Los ELICITORES inducen la síntesis de Fitoalexinas en las plantas como un mecanismo de defensa. EXISTEN VARIOS TIPOS DE ELICITORES: a)Según su origen : • • Endógenos (Endoelicitores) Estos se producen o se originan naturalmente dentro de la planta. Exógenos (Exoelicitores) Estos son creados por elicitores externos (productos que se aplican para inducir a la producción de Fitoalexinas en la planta, Ejemplo: Fosetil-Al, FOSFIMAX. Mecanismos de las plantas b) Según su naturaleza: Bióticos: • Carbohidratos complejos producidos por hongos y bacterias en las plantas: oligosacarinas • Lípidos: Ac. araquidónico • Enzimas microbianas • Acido salicílico Abióticos: • Metales pesados, detergentes • Ribonucleasa autoclada, • frío, luz UV. Mecanismos de las plantas Las fitoalexinas formadas específicamente por los fosfitos tienen un efecto directo sobre los hongos de la familia de los Oomicetos (Phytophthora, Pseudoperonospora, Peronospora, Pythium, Albugo, Bremia, etc.) Actualmente para la protección de las plantas de diversos patógenos, se han están usando productos que estimulen la producción de Fitoalexinas en varios cultivos, creando así un mecanismo natural de defensa de la planta. Características • Promotor de las defensas de la planta y de acción fungicida contra Oomycetes. • Alta calidad de formulación. • Movilidad Ascendente y Descendete. • Rápida absorción. Características • Formulación: concentrado soluble (CS). • Modo de acción: absorción foliar y radicular. • Concentración de i.a.: 639 gr./litro de ión fosfito (H2PO3). • Riqueza: – P2O5: 56% p/v – K2O : 28% p/v Modo de acción Ejerce su acción fungicida por 2 vías: 1.- Vía directa: control del fitopatógeno. 2.- Vía indirecta: estimulación de las defensas naturales de la planta (Fitoalexinas) Modo de acción Estimula la producción natural de fitoalexinas, que a su vez promueve las defensas naturales de la planta (alelopatías), imposibilitando la aparición de resistencia contra enfermedades ocasionadas por hongos oomicetos. Control de Fitopatógenos 1. Inhibe la esporulación del hongo. 2. Inhibe la penetración del hongo en el tejido vegetal. 3. Inhibe el crecimiento del micelio. Liberación de zoosporas Control de Fitopatógenos • FOSFIMAX altera la formación zoosporangios, clamidosporas y oosporas. • Altera la membrana celular de los hongos, reduciendo su permeabilidad y la síntesis de fosfolípidos. clamidosporas oospora de esporangio los Control de Fitopatógenos Afecta el metabolismo energético: disminución de la respiración y la producción de ATP (Mc Grath, 2004). Por sus múltiples formas de acción, efecto “multisitio”, dificulta la aparición de resistencias. zoospora de Phytophthora cinnamomi afectada por HPO3= ZOOSPORAS DE Phytophthora cinnamomi EN RAICES DE AGUACATE 6 HORAS DESPUES DE LA INOCULACIÓN. Van der Merwe and Kotzé ( 1994 ) ZOOSPORAS DE Phytophthora cinnamomi EN RAICES DE AGUACATE 6 HORAS DESPUES DE LA INOCULACIÓN. Estimulación de defensas de la planta. • Inductor de síntesis de fitoalexinas, al estimular la enzima Fosfo-Amino-Liasa (PAL). • La PAL es clave en la producción de compuestos del tipo Fenoles (Resveratrol), Ligninas, Suberinas y compuestos derivados del Acido Cinnámico. Todos mecanismos de defensa de la planta. • De esta forma, FOSFIMAX es capaz de inducir cambios químicos y morfológicos en el vegetal como la formación de suberina y tilosas. Ataque de Patógenos: Producen liberación de Enzimas, Toxinas y elicitores. Elicitores no específicos: Inducen respuestas de defensa en un amplio rango de especies vegetales . - - Fragmentos de paredes celulares, enzimas hidrolíticas, péptidos, glicoprot eínas y ácidos grasos polinsaturados Defensas del Vegetal Barreras Barreras Físicas (Pared celular) “pasivas” Bioquímicas “reactivas” PR-1 PR-2 ( Glucanasas ) PR-3 ( Quitinasas) PR-4 – PR-11 ( PR ) RECEPTORES DE MEMBRANA Pathogenesis Related Protein Señal química TOXINAS PATOGENO OLIGOSACARIDOS DE LA PARED DEL PATOGENO ENZIMAS Fenómenos de Antibiosis PARED CELULAR Síntesis Fitoalexinas CITOPLASMA ( PR ) PR-1 PR-2 ( GLUCANASAS ) PR-3 ( QUITINASAS ) PR-4 – PR-11 Pathogenesis Related Protein SEÑAL QUIMICA SINTESIS SINTESIS FENOMENOS DE ANTIBIOSIS FITOALEXINAS PARED CELULAR CITOPLASMA REDUCCIÓN DE LA FITOTOXICIDAD POR GLIFOSATO GLIFOSATO TESTIGO SIN GLIFOSATO GLIFOSATO GLIFOSATO + GLIFOSATO + FOSFITO ( 2 lts./ha ) FOSFITO ( 4lts./ha ) Estabilidad • Prolongado período de protección contra los patógenos. • A la fecha, no se han descrito enzimas en las plantas capaces de oxidar el fosfito a fosfato. • De ahí su estabilidad y alta perduración dentro de la planta (Smillie el al, 1989) Penetración • FOSFIMAX puede ser hojas, raíces, tronco y frutos. absorbido por • Formulación líquida de pH ácido y fácil absorción; además tienen gran efecto sistémico en el árbol. • Así, luego de 30 minutos de aplicado, el 85 % del producto penetra en el tejido vegetal evitando el riesgo de lavado por lluvias. Velocidad de traslocación del Fosfimax Aplicado al follaje en aguacate. EN LAS RAICES, 4 DÍAS DESPUÉS. Adaptado de: Whiley, A.W., Hargreaves, P.A., Pegg, K.G., Doogan, V.J., Ruddle, L.J., Saranah, J.B. and Langdon, P.W., 1995. Changing sink strengths influence translocation of Phosphonate in avocado (Persea americana Mill.) trees. Aust. J. Agric. Res. Velocidad de traslocación del Fosfimax Inyectado al tronco en aguacate. Leaves - day 2 Fruit - day 2 Shoots - day 2 DESDE EL FOLLAJE A LAS RAÍCES 4 DÍAS Bark - day 4 Wood - day 2 Injection - day 0 Roots - day 16 Adaptado de: Whiley, A.W., Hargreaves, P.A., Pegg, K.G., Doogan, V.J., Ruddle, L.J., Saranah, J.B. and Langdon, P.W., 1995. Changing sink strengths influence translocation of Phosphonate in avocado (Persea americana Mill.) trees. Aust. J. Agric. Res. Movilidad sistémica ascendente y descendente. • Los fungicidas fosfonados, entre los que se encuentra el FOSFIMAX, son traslocados vía xilema y floema, por lo tanto, tienen alta movilidad dentro de la planta. • El término fosfonato es utilizado para referirse a las sales y ésteres del ácido fosforoso (H3PO3). • Al ser introducidos a los tejidos vegetales, los fosfonatos son rápidamente hidrolizados en anión fosfito o fosfonato (HPO3-2). De aquí que el FOSFIMAX (fosfito) tenga mayor penetración y eficiencia que ácido fosforoso aplicado. Sistemia de los principales fungicidas para control de Oomicetos. Producto Local Fosfimax Fosetil-Aluminio Propamocarb Metalaxil Oxadixil Dimetomorf ++ ++ ++ ++ ++ ++ SISTEMIA Acropétala ++ ++ + ++ ++ ++ Basipétala ++ ++ +/+/- ++ muy activo;+ moderadamente activo; +/- errático; - sin actividad sistémica Schwin and Urech ( 1986 ) ; Albert ( 1991 ) Comparación entre fosetil-Al y Fosfimax O (CH3-CH2-O-P-O-)3Al H Fosetil-Aluminio O OH - P - OH + K+ (-) FOSFIMAX O 3 H 2O 3 CH3CH2OH + 3 OH-P-OH + Al+3 (-) Fosfito de Aluminio FOSFIMAX contiene la forma activa inmediata por lo que su efecto curativo es mucho más rápido. Equivalencias entre FOSFIMAX, Aliette Concentración de i.a ( H2PO3-) Dosis equivalentes Costo dosis por 100 lt de agua ( gr. o cc./100 lts) ($) FOSFIMAX 40-20 639 gr/litro 300 cc. $57.00 Fosetil-Al 80 % 556 gr/kilo 342 gr. $153.90 Producto Supuestos para el Cálculo: P2O5 x O,43 = P H2PO3- x 0,378 = P P2O5 x 1,14 = H2PO3Fosetil-Al x O,695 = H2PO3- $ 190/litro para Fosfimax $ 450/ Kg para Fosetil-Al Reacción controlada. • Equilibrio dinámico de todas las moléculas. • 100% del fósforo como fosfito (monopotásico principalmente) • No hay descomposición térmica. • No hay oxidación a fosfatos (estabilizado con antioxidantes). Fosfitos: QUE SON ? - Sales formadas por neutralización del ácido fosfóroso ( H3PO3 ) a través de una base ( KOH ). - formas iónicas: H2PO3- y KOH H3PO3 ACIDO FOSFOROSO HPO3-2 KOH KH2PO3 FOSFITO( FOSFONATO ) MONOPOTASICO K2HPO3 FOSFITO ( FOSFONATO ) DIPOTASICO Reacción del ácido fosforoso en presencia de hidróxido de potasio KOH H3PO3 ACIDO FOSFOROSO pH < 2,0 KH2PO3 FOSFITO MONO POTASICO H2O 2,0 – 3,0 KOH K2HPO3 FOSFITO DI-POTÁSICO H2O 3,0 – 4,0 Cantidades de ión fosfito en productos Producto Acido Fosforoso gr/lt Hidroxido de potasio gr/lt Fosfito monopotasico gr/lt Fosfito dipotasico gr/lt pH Mezcla Casera 100 200 0 100 6-7 Fosfimax 40-20 638 325 476 162 2-3 Fosfito 30-20 478 325 316 162 3-5 Ion fosfito Activo Reacción controlada. 2 H3PO3 + KOH ACIDO FOSFOROSO KH2PO3 + H2PO3- + H2O FOSFITO( FOSFONATO ) MONOPOTASICO FOSFITO ( FOSFONATO ) Tº CONTROLADAS Y ANTIOXIDANTES MEZCLA “CASERA” 2 H3PO3 + KOH ACIDO FOSFOROSO Tº KH2PO3 + PH3 + H2O MÁS DE 120 ºC FOSFITO( FOSFONATO ) OXIDACIONES MONOPOTASICO FOSFINA ( VOLATIL y MUY TÓXICO ) Manchas por aplicaciones de Ac. Fosforoso mezclado con KOH. Diferencia fundamental entre fosfitos y fosfatos: Un átomo de oxigeno menos. FOSFITO FOSFATO ( NO ES NUTRIENTE ) ( NUTRIENTE ) “FUNGICIDA” O O - O P OH ( H2PO3- ) H - O P OH OH ( H2PO4- ) Transformación de fosfitos a fosfatos OXIDACIÓN ENZIMÁTICA HPO3 HPO4 Los fosfitos son utilizados como fuente de energia (oxidación) por algunos hongos y bacterias que estan presentes en el suelo. Esta transformación, en el suelo, puede tomar dias a algunas semanas. Klebsiella aerogenes, Agrobacterium tumefaciens, Pseudomonas spp. Mc Donald et al ( 2.001) ; Imazu et al. (1998) Espectro de Acción Frutales: • Pudrición Parda en cítricos ( Phytophthora citrophthora y P. parasitica) • Pudrición del cuello en aguacate (Phytophthora cinnamomi) • Ojo de buey en manzana (Neophabrea alba) • Pudriciones de raíz y cuello en frutales (Phytophtora spp) • Mildiú de la vid (Plasmopara vitícola , Wicks, 1990; Pontiroli et al, 2001 ) Espectro de Acción Frutales, además: • FOSFIMAX tiene actividad sobre otros hongos, que se desarrollan en los frutos de cítricos: Geotrichum candidum, Penicillium italicum, Penicillium digitatum, Diplodia natalensis, Alternaria citri ( Gutter,1981 ; Soler et al, 1997 ). • Aplicaciones de precosecha y tratamientos en post cosecha, en forma de inmersión permiten controlar muy eficientemente estas enfermedades. • Por otro lado, existen reportes de actividad sobre el corazón mohoso de la manzana (Alternaria alternata, Reuveni et al 2.003 ), de Black foot o Enfermedad de Petri (Sedaf, 2005). Espectro de Acción Hortalizas: • Tizón tardío en papas (Phythophthora infestans). • Mildiú en cebolla y ajos (Peronospora destructor). • Tizón tardío en tomate (Phytophthora infestans). • Marchitez en pimiento (Phytophthora capsici). • Falso oídio en crucíferas (Peronospora parasitica). • Falso oídio en lechuga (Bremia lactucae). • Tizón del cuello en pimentones (Phytophthora nicotianeceae var. parasitica, P. capsici). Espectro de Acción Tizón tardío de la papa Phytophthora infestans Tizón tardío del tomate Phytophthora infestans Espectro de Acción Marchitez del chile Phytophthora capsici Espectro de Acción Pudrición de la raíz de fresa Phytophthora fragariae Efectividad de Fosfimax Efecto de Fosfimax sobre el Tizón tardío de la papa (P hytophthora infestans ) Antes de aplicación 72 horas después Efectividad de Fosfimax Antes de aplicación 48 horas después Efectividad de Fosfimax VIVO !! Antes de aplicación FOSFIMAX 3 LT/HA, 2007 Después de aplicación Efectividad de Fosfimax Porcentaje de severidad del efecto de Fosfimax para el control de Tizón tardío (Phytophthora infestans) en cultivo de papa. Tangancícuaro Mich. 07´ 60 Severidad 50 1. T.A. 2. FOSFIMAX 2.0 LT/HA 3. FOSFIMAX 2.5 LT/HA 4. FOSFIMAX 3.0 LT/HA 5. CYMOXAL+MANCOZEB 3.0 KG/HA 40 30 20 10 0 1 Eval. 2 Eval. 3 Eval. 4 Eval. 5 Eval. 6 Eval. 7 Eval. Programa de aplicaciones de fungicidas. Protección contra Tizón Tardío Crec. Vegetativo Inicio Tuberización Crecimiento del Tubérculo Perfil ambiental. Formulación líquida de alta calidad: • Libre de metales pesados. • 100% soluble. • Gran estabilidad en solución. • Compatible con la mayoría de los fitosanitarios. • Se puede aplicar durante todo el ciclo del cultivo. • Apropiado para inclusión en programas de Control Integrado de Enfermedades. Sin restricción de uso (EPA) ENVIRONMENTAL PROTECTION AGENCY 40 CFR Part 180 [OPP-301030; FRL-6599-1] RIN 2070-AB Phosphorous Acid; Exemption from the requirement of a tolerance [Federal Register: October 5, 2000 (Volume 65, Number 194)] [Rules and Regulations] [Page 59346-59350] From the Federal Register Online via GPO Access [wais.access.gpo.gov] [DOCID:fr05oc00-5] SUMMARY: This regulation eliminates the need to establish a maximum permissible level for residues of phosphorous acid and its ammonium, sodium and potassium salts. Exento de tolerancias 2007 Florida Citrus Pest Management Guide: Pesticides Registered for Use on Florida Citrus Nombre Genérico o comercial Tolerancia en la fruta (ppm) Días a cosecha Otros requerimientos Fosfitos Exento 0 Ninguno Incompactibilidad No mezclar con: • Aceite Mineral. • Dimetoato. • Organo-Clorados. • Cúpricos. • Aceite Vegetal. • Productos en base a estaño. Recomendaciones de Uso DOSIS Cultivo Enfermedad L/Ha ml / L Tomate Tizón Tardío Phytophthora infestans 2.0-3.0 5.0 a 7.5 Chile Marchitez o secadera Phytophthora capsici 2.0-3.0 5.0 a 7.5 Papa Tizón Tardío Phytophthora infestans 3.0-4.0 7.5 a 10.0 Melón, Sandía, Pepino Mildiú Phytophthora sp. 2.0-3.0 5.0 a 7.5 Lechuga Falso oidio Peronospora parasitica 2.0-3.0 5.0 a 7.5 Cebollo y Ajo Mildiw Peronospora destructor 2.5-4.0 6.25 a 10.0 Coliflor, Brócoli, Repollo Mildiw Peronospora parasitica 3.0-4.0 7.5 a 10.0 Recomendaciones de Uso Cultivo Aguacate Frambuesa, fresa, zarzamora Cítricos Enfermedad Marchitez permanente Phytophthora cinnamomi 3.0 A 5.0 300-500 Secadera Phytophthora magasperma; Phytophthora fragariae 3.0-4.0 750 A 1000 Pudrición parda Phytophthora citrophthora; Phytophthora parasitica 3.0 - 4.0 750 A 1000 Plasmopara viticola 3.0-4.0 300 a 400 Phytophthora sp. 4.0-5.0 400 A 500 Phytophthora sp. 3.0 A 4 300 a 400 Armillaria mellea 3.0 A 5.0 300-500 Phytophthora sp. 3.0-5.0 300-500 Phytophthora sp. 4.0-5.0 400-500 Pudrición del Phytophthora citrophthora; cuello y/o Gomosis Phytophthora parasitica Uva de mesa Piña Papaya y guayaba Durazno Manzano Mango DOSIS ml / 100 L L/Ha Agua Mildiú Pudrición de la corona Pudrición de cuello y raíz Pudrición de cuello y raíz Pudrición de cuello y raíz Gomosis Preguntas ¿? Gracias Ing. Luis Eduardo González Cepeda Director Comercial.