Revista Electrónica Granma Ciencia. Vol. 4, No. 3, Septiembre-Diciembre del 2000. ISSN 1027-975X TITULO: EL CLORHIDRATO DE ACRIFLAVINA EN EL TRATAMIENTO DE LA PIROPLASMOSIS, ANAPLASMOSIS Y TRIPANOSOMIASIS AUTORES: FELIPE PÉREZ FREEMAN EMILIO MONTEJO CUENCA JORGE DUVERGER ROUSSEAUX ISIDRO REYES AVILA INSTITUCION: FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA. UNIVERSIDAD DE GRANMA. RESUMEN De un total de 500 animales con síntomas de anemia, se seleccionaron 47 afectados de piroplasmosis, 44 de anaplasmosis y 24 de tripanosomiasis que presentan el cuadro puro de cada enfermedad, con el objetivo de demostrar la posible efectividad del clorhidrato de acriflavina al 2,5% en el tratamiento de estas patologías. Se demostró que con dosis de 2 mg/Kg. de masa corporal en concentración del 2,5 % se logra la recuperación total de los enfermos con una sola aplicación del medicamento. ABSTRACT Out of a total of 500 animals with anemia symptoms 47 of them affected by piroplasmosis, 44 by anaplasmosis and 24 by trypanosomiasis were chosen in order to show the possible effectiveness of the Acriflavine chlorhidrate at 2.5% in the treatment of these pathologies. It was shown that a single dose of 2 mg/Kg of acriflavine chlorhydrate in concentration of 2.5% is effective for the total recovery of sick animals. INTRODUCCIÓN Las enfermedades hemoparasitarias están ampliamente distribuidas en el mundo, afectan especies de animales domésticos y salvajes, ocasionan grandes daños en la salud animal y humana, ya que algunas constituyen zoonosis, sobre todo en los países subdesarrollados donde conviven animales y hombres en estrecha relación (Cordovés [et al.], 1988). En Cuba, ocasionan grandes pérdidas económicas y perturban los planes de producción pecuaria. El ganado que es afectado por Anaplasmas, lo es también por Babesias y Tripanosomas (Espaine [et al.], 1979). En general, son enfermedades febriles agudas y a veces crónicas que afectan principalmente al tejido hematopoyético, produciendo anemia e ictericia con la consiguiente depauperación del animal. Estas enfermedades transmisibles por ixódidos y otros vectores, revisten desde el punto de vista epizootiológico una especial importancia por las pérdidas económicas que ocasionan a la masa ganadera (Rodríguez [et al.], 1977; Callow, 1984) y Bramw, 1995). El tratamiento de esta enfermedad resulta engorroso y en muchos casos inefectivo, con lo cual aumentan las pérdidas económicas debido al personal que requiere, a los repetidos movimientos del rebaño y al uso de medicamentos tan caros como los antibióticos. Ante esta situación y tomando en cuenta la alta incidencia de estas enfermedades en la provincia Granma, se decide ensayar con un producto que si bien no es nuevo, en el caso de la Piroplasmosis y Anaplasmosis, había sido desterrado su uso en los dos primeros casos por la falta de personal técnico que lo aplicara, pues es de uso endovenoso estricto y en el caso del tripanosoma no se tienen noticias de que halla sido utilizado en bovinos anteriormente. Partiendo de la hipótesis de que este medicamento debía resolver esta situación de forma más efectiva y económica y atacando a la vez a los tres agentes causales, pues con frecuencia aparecen juntos; se persigue con este trabajo el siguiente objetivo: Demostrar la posible efectividad del clorhidrato de acriflavina en el tratamiento de la Babesiosis, Anaplasmosis y Tripanosomiasis en el bovino. MATERIALES Y MÉTODOS El trabajo fue realizado en cinco unidades pecuarias, para su realización se muestrearon 500 animales mestizos HxC, por el método tradicional, sospechosos de la enfermedad, por presentar procesos febriles, mucosas pálidas o ictéricas y mal estado general del animal, de los cuales se desecharon los procesos mixtos para independizar los cuadros clínicos, la evolución y recuperación de la enfermedad, tomándose 115 animales positivos puros y con diferentes estados de gravedad, distribuidos de la siguiente forma: TABLA 1 Distribución de los animales por patología y gravedad Menos Graves Graves Muy Graves Total Babesia Anaplasma 25 13 9 47 30 10 4 44 Tripanosoma 19 5 24 Total 74 28 13 115 El criterio seguido para la clasificación estuvo en dependencia del número de parásitos por campo (las cruces de la enfermedad), además, por la mayor o menor severidad de afectación de los principales indicadores fisiológicos evaluados. A los 115 animales enfermos se le aplicó una inyección endovenosa, por vía yugular, de Clorhidrato de Acriflavina al 2,5%, disuelto en S.S.F. a razón de 2 mg/kg. de peso (Pérez Freeman, 1988). Se recogió la sintomatología clínica antes del tratamiento y durante la evolución (7, 15 y 30 días postratamiento), para la cual se determinaron los valores de la triada y los niveles de Hb. y V.G.A por el método de Phillips y Van Slyke modificado por Palencia y Pérez Freeman, (1988). El cuadro clínico de cada entidad fue estadificado para ulteriores comparaciones. Los datos se procesaron por un análisis de varianza de clasificación simple para datos no pareados. RESULTADOS Cuadro sintomático En la Tabla 2 se recoge un resumen de la sintomatología observada en los animales afectados de Babesia antes del tratamiento y 7 días después del mismo, es de destacar, que la presencia de edemas manifiestos, fundamentalmente en la región subglosiana y una ascitis moderada sólo fue observada en los animales clasificados de muy graves, resalta el hecho de que los procesos diarreicos incrementaron su incidencia según se agravaba el cuadro, aunque éste se mantuvo como una diarrea moderada. Es notorio que en los casos graves, el 26 % de los animales se encuentra afectado de estreñimiento, manifestándose en deposiciones escasas, poco frecuentes, muy oscuras y de consistencia semi-sólida. A los siete días posteriores al tratamiento había desaparecido toda la sintomatología clínica, excepto en los muy graves, que todavía en tres de ellos se apreciaba ligera emaciación. En la Tabla 3 se presenta el mismo análisis con respecto a la anaplasmosis. La presencia de edemas en este proceso fue mucho más numerosa e intensa que en el caso anterior, aunque su recuperación postratamiento fue espectacular, los procesos diarreicos fueron menos numerosos que en la babesiosis, presentaban sus mismas características, aunque las heces eran notablemente más oscuras. El estreñimiento sé presentó con más frecuencia y severidad en los tres grupos de animales con Anaplasmosis, las heces fecales tenían una coloración muy oscura, casi negra y en ocasiones fue necesario extraerlas manualmente del recto, pues en más de 24 horas de observación no se produjeron deposiciones. En todos los casos el grado de deshidratación de los excrementos era muy evidente, el análisis en su conjunto de la sintomatología y evolución, sugieren que la Anaplasmosis afecta mucho más severamente al animal y hace su recuperación más tardía, puesto que en los casos más graves a los 7 días posteriores al tratamiento, el estado general, aspecto del pelo, las mucosas y el grado de emaciación, aunque habían experimentado notable mejoría, aún no era del todo satisfactorio, no siendo así los procesos digestivos, la presencia de edemas y apetito, que evolucionaron satisfactoriamente en este tiempo, a los 15 días postratamiento, ya que todas estas secuelas habían remitido por completo. En la Tabla 4 se observan los síntomas de los animales afectados de Tripanosomas, antes del tratamiento y 15 días después del mismo, en relación con esta enfermedad se evidencia que su sintomatología fue la menos severa, destacándose solamente que los procesos diarreicos fueron más bien ligeros, de color más claro que los anteriores, aunque con una notable fetidez, no observada en los dos procesos antes descritos, aquí también a los 15 días posteriores al tratamiento no existía el menor síntoma clínico. En ningún caso se observaron residivas hasta 30 días posteriores al único tratamiento impuesto. No fue utilizada ninguna medicación coadyuvante, limitándose sólo a un adecuado régimen de alimentación y tenencia. Indicadores clínicos - hematológicos antes del tratamiento En la Tabla 5 se presentan los valores de la triada y los indicadores sanguíneos de los animales afectados por los tres procesos descritos antes de poner ningún tratamiento, donde puede observarse, que el criterio de clasificación clínica según el grado de afectación viene avalado por diferencias significativas entre grupos, en la casi totalidad de los indicadores, es de destacar que el notable descenso promedio de la frecuencia respiratoria (FR) y frecuencia cardíaca (FC) de los animales clasificados como muy graves en la Anaplasmosis es debido precisamente a la extrema gravedad de los casos que en ocasiones, el gráfico de la triada amenazaba con presentar la llamada cruz de la muerte*. Evolución de los casos de piroplasmosis En las Tablas 6 (A, B y C) se observan tres fases en la evolución de la piroplasmosis (antes del tratamiento, 15 y 30 días postratamiento). En la 6B se observa paradógicamente, que los animales más gravemente afectados se recuperan más rápido que los otros dos grupos, mientras que 30 días después del tratamiento (Tabla 6C) no existen diferencias entre los tres grupos; aunque a pesar de las diferencias matemáticas, los valores de la Tabla 6 (B y C) se encuentran dentro de los rangos fisiológicos de variación (Dukes, 1966; Langley, 1982; Pino, 1984; Martinez y Palencia, 1997.) Lo anteriormente expuesto demuestra la respuesta positiva de los animales afectados de Piroplasmosis al tratamiento de Clorhidrato de Acriflavina. Anaplasmosis En las Tablas 7 (A, B y C) se observan tres fases de evolución de la Anaplasmosis (antes del tratamiento, 15 y 30 días postratamiento). Cabe destacar que los animales más gravemente afectados por esta enfermedad no presentan el mismo fenómeno indicado anteriormente; su recuperación es más lenta que la de los otros dos grupos, de este hecho se desprende que es el proceso que más severamente afecta la salud animal y el de más difícil recuperación. Tripanosomiasis En las Tablas 8 (A ,B y C) se observaron 3 fases de la evolución de la Tipanosomiasis (antes del tratamiento, 15 y 30 días postratamiento), en las cuales pueden observarse que esta enfermedad no alcanzó la clasificación de muy grave y su recuperación fue rápida y total. Al analizar la evolución de cada grupo se advierte que todos los indicadores excepto el V.G.A. se normaliza en 15 días, el cual en los animales graves, alcanza su valor máximo a los 30 días posteriores al tratamiento. Del análisis de lo anteriormente expuesto, se evidencia la gran efectividad del Clorhidrato de Acriflavina en el tratamiento del Tripanosoma. DISCUSIÓN La sintomatología de la Babesiosis corresponde a las formas agudas y crónicas descritas por Borchert, (l968); Dalglish, (l984); Espaine [et al.], (l987 y Carta Ganadera, (1987). En el caso de la Anaplasmosis, la sintomatología también se correspondió con las formas agudas y crónicas descritas por Hutyra y Marek, (l973); Planas, (l979); Ajayi y Fabyl, (1986); Alonso y Bladino, (l988), resaltando que en esta entidad los animales clasificados como muy graves tienen una temperatura de 39,6º C, se aclara que esto es un promedio que en ningún modo es representativo de las temperaturas realmente observadas, pues éstas o eran superiores a 4lº C o inferiores a 37º C. La sintomatología que caracteriza a la Tripanomiasis corresponde a las formas crónicas descritas por Jubb y Kennedy, (l973); Hutyra y Marek, (l973); Espaine [et al.], (l987). La fetidez que acompañaba las deposiciones diarreicas no se han encontrado con anterioridad, se cree que la ausencia de formas agudas y sub-agudas descritas por otros autores se deba a las características propias del foco, ya que estos animales en su totalidad padecían procesos residivantes y habían sido tratados uno o dos meses antes con Beriven. * Cuando en un gráfico se superponen las 3 curvas de la triada y la de la temperatura cruza las otras dos, bien porque éstas dos últimas descienden mientras que la otra asciende, o viceversa. Al analizar la evolución postratamiento de la Hb y Hto. se observa una evolución más satisfactoria para el primero de estos indicadores, en los tres procesos observados; lo cual es atribuible a la mayor facilidad del organismo para formar un pigmento que una célula. Con respecto al alto número de estreñimientos observados en los tres procesos, sobre todo en los animales clasificados como más graves, se explicarían, no sólo por los trastornos digestivos presentados con frecuencia en estas enfermedades (Borchert, l968; Delgado, l974; Espaine [et al.], l987 y Bram, l995), sino también porque en estos animales coincidía el síntoma inapetencia, lo que trae como consecuencia un estreñimiento por falta de volumen fecal. Se demuestra en este trabajo que el proceso que más severamente afecta a los animales es la Anaplasmosis, esto puede deberse a que esta rikettsia ejerce un efecto depresor sobre la médulas ósea, deprimiendo, tanto la hematopoyesis como la inmunorespuesta (Rodríguez y Rivas, l97l; Hutyra y Marek, l973 y Teplova y Likhoroz, l996). Otro factor coadyuvante de esta situación, sería el que se desprende del análisis de los períodos de incubación de 7-l8 días en el caso de la Babesia (Borchert, l968; Jubb y Kennedy, l973; Hutyra y Marek, l973; Espaine [et al.], l987) y del agente productor del Anaplasma es mucho más largo de 30 días o más ( Jubb y Kennedy, l973; Hutyra y Marek, l973; Marek y Mocsy, l98l y Teflova y Likhoroz, l996) con lo cual sería perfectamente posible que los animales exhibieran la sintomatología de la Anaplasmosis pocos días después de haber rebasado la Babesiosis, manifestándose la primera sobre un organismo ya debilitado por un proceso anterior (Valerino, 1996). CONCLUSIONES 1. El Clorhidrato de Acriflavina ha demostrado ser un quimioterapéutico de efectiva acción contra los protozooarios y Rikettsias productores de las hemosporidiosis. 2. Concentraciones al 2,5% aplicadas en dosis de 2 mg/kg de masa corporal, resultaron ser eficaces terapéuticamente, sin producir efectos indeseables en el animal. 3. Con un solo tratamiento se logró la eliminación de los parásitos de la sangre en 7 días, con la posterior recuperación clínica del animal, antes de los 30 días como máximo en los casos más graves. ANEXOS Babesia Tabla 2 MENOS GRAVES ANTES 7 DÍAS ESTADO GRAL. REGULAR BUENO ANOREXIA MUCOSAS **** ---PELO ERIZADO NORMAL EDEMAS EMACIACIÓN DIARREA 8% 0% ESTREÑIMIENTO 0% 0% FROTIS + - GRAVES ANTES 7 DÍAS MALO BUENO + #### ---ERIZADO NORMAL + + 14 % 0% 4% 0% ++ - A MUY GRAVES ANTES 7 DÍAS > MALO BUENO + #### ---ERIZADO NORMAL + ++ +23 % 0% 26 % 0% +++ - B C * * * * = CONGESTIONADA # # # # = ICTÉRICA - - - - = NORMAL Anaplasma Tabla 3 MENOS GRAVES ANTES 7 DÍAS ESTADO GRAL. BUENO BUENO ANOREXIA MUCOSAS *** ---PELO NORMAL NORMAL EDEMAS EMACIACIÓN DIARREA 4,6 % 0% ESTREÑIMIENTO 12 % 0% FROTIS + - GRAVES ANTES 7 DÍAS MALO BUENO + #### ---ERIZADO NORMAL + 9% 0% 23 % 0% ++ - MUY GRAVES ANTES 7 DÍAS > MALO BUENO + #### ---*** ERIZADO NORMAL + + + ++ + 2% 0% 36 % 0% +++ - B C A * * * * = CONGESTIONADA # # # # = ICTÉRICA - - - - = NORMAL Tripanosoma Tabla 4 ESTADO GRAL. ANOREXIA MUCOSAS MENOS GRAVES ANTES 7 DÍAS BUENO BUENO #### ---- GRAVES ANTES 7 DÍAS REGULAR BUENO +#### ---- MUY GRAVES ANTES 7 DÍAS PELO NORMAL EDEMAS EMACIACIÓN DIARREA 6% ESTREÑIMIENTO 0% FROTIS + NORMAL 0% 0% - ERIZADO +22 % 4% ++ A NORMAL 0% 0% - B * * * * = CONGESTIONADA # # # # = ICTÉRICA - - - - = NORMAL Babesia-anaplasma- tripanosoma Tabla 5 N FROTIS T.C. F.R. F.C. ANTES DEL TRATAMIENTO BABESIA - GRAVES 25 + 40a 45a 91a a b GRAVES 13 ++ 40,3 62 96b +GRAVES 9 +++ 42b 81c 120c ANTES DEL TRATAMIENTO ANAPLASMA - GRAVES 30 + 39,6a 50a 88a GRAVES 10 ++ 41a 80b 117b b ab +GRAVES 4 +++ 39,6 66 70c ANTES DEL TRATAMIENTO TRIPANOSO MA - GRAVES 19 + 40,1a 65a 88a B b GRAVES 15 ++ 41 69 92b +GRAVES SUPERINDICES DIFERENTES p< 0,01 Hb VGA 80a 60b 45c 0,25a 0,22b 0,18c 40a 39b 36c 0,21a 0,20a 0,11b 70a 62b - 0,24a 0,20b - T.C. F.R. F.C. Hb ANTES DEL TRATAMIENTO + 40a 45a 91a 80a ++ 40,3a 62b 96b 60b +++ 42b 81c 120c 45c 15 DÍAS DESPUÉS DEL TRATAMIENTO 38,3 40a 72a 94 ª 38,8 39 75 92 38,6 42b 98b 96 30 DÍAS DESPUÉS DEL TRATAMIENTO VGA Babesia Tabla 6 N A - GRAVES GRAVES +GRAVES B - GRAVES GRAVES +GRAVES C 25 13 9 25 13 9 FROTIS 0,25a 0,22b 0,18c 0,29a 0,28a 0,31b - GRAVES GRAVES +GRAVES 25 13 9 38,3 32 68 38,5 30 70 38,6 28 71 SUPERÍNDICES DIFERENTES p > 0,01 100 105 96 0,32 0,34 0,32 T.C. F.R. F.C. Hb ANTES DEL TRATAMIENTO + 39,6a 50a 88a 40a b b b ++ 41,O 60 117 39a +++ 39,6a 56ab 70c 36b 15 DÍAS DESPUÉS DEL TRATAMIENTO 38,6 35a 69a 91 38,8 35a 70a 92 b b 39,2 40 80 89 30 DÍAS DESPUÉS DEL TRATAMIENTO 38,6 34a 43a 131a a a 38,7 32 50 121a 38,9 41b 60b 93b SUPERÍNDICES DIFERENTES p > 0,01 VGA Anaplasma Tabla 7 N A - GRAVES GRAVES +GRAVES B - GRAVES GRAVES +GRAVES C - GRAVES GRAVES +GRAVES 30 10 4 30 10 4 30 10 4 FROTIS 0,21a 0,20a 0,11b 0,29a 0,30a 0,36b 0,32 0,30 0,29 Tripanosoma Tabla 8 A - GRAVES GRAVES +GRAVES B - GRAVES GRAVES +GRAVES C - GRAVES GRAVES +GRAVES N FROTIS 19 5 + ++ T.C. F.R. F.C. ANTES DEL TRATAMIENTO 40,1ª 65a 88 b b 41,O 69 92 Hb VGA 70a 72b 0,24a 0,20b 19 5 15 DÍAS DESPUÉS DEL TRATAMIENTO 38,7 33 50 100 38,7 33 55 99 0,33 0,31 19 5 - 30 DÍAS DESPUÉS DEL TRATAMIENTO 38,6 25a 48 102 b 38,7 29 45 100 0,37 0,37 SUPERÍNDICES DIFERENTES p > 0,01 BIBLIOGRAFÍA Ajayi, S.A., J.P. Fabyil. 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