2.1 Estudios sobre la organizaci6n genetica de Entamoeba

2.1 Estudios sobre la organizaci6n genetica de Entamoeba
histolytica.
2.2 Estudios sobre el DNA repetitivo de Trypanosoma
cruzi y Plasmodium ..
2.3 Estudios de algunos determinantes antigenicos de Mycobacterium leprae.
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Programa 2.1 Estudios sobre la organizaci6n genetica de
Entamoeba histolytica.
Entamoeba histolytica es un protozoario de interes cientffico no solo por ser el agente causante de disenterfa amibiana, sino ademas por sus propiedades biol6gicas. Muestra
un gran polimorfismo tanto al nivel morfol6gico como al
nivel bioqufmico, pues en diferentes cultivos de una misma
cepa se encuentran variaciones considerables en los niveles
de enzimas especfficas. Entre distintos aislados (cepas), se
observan grandes diferencias en la aparente "patogenicidad" para un huesped experimental (el hamster). Nos interes~ estudiar a fonda el genoma de este organismo, con el
prop6sito de poder describir algunas de sus propiedades al
nivel de expresi6n genetica. Hemos logrado identificar protefnas especfficas que interaccionan con el episoma ribosomal y que pudieran tener algun rol funcional. Hemos secuenciado la regi6n promotora de los genes ribosomales, y
hemos mapeado con precisi6n el lugar de iniciaci6n de la
transcripci6n de estos genes. Hemos clonado, y estamos en
vias de caracterizar algunos genes que codifican para protefnas involucradas en la vfa secretoria (genes SEC) de la amiba. En colaboraci6n con el Dr. Antonio Gonzalez del Instituto de parasitologfa L6pez Neyra en Granada, Espana, se
ha iniciado un ambicioso proyecto que cuya met:1 es
construir vectores que permitan la transformaci6n genetica
estable de Entamoeba histolytica.
Caracterizaci6n de DNA de elementos repetitivos de
tamoeba histolytica.
A. Olvera, G. Estrada, A. Alag6n y P.M. Lizardi
En-
1989/P/S/DBQ
Caracterizaci6n de, promotores y facto res de transcripci6n de los genes ribosomales de Entamoeba histolytica.
B, Michel, M, Zurita, A, Alag6n y P,M, Lizardi
1987/P/S/DBQ
creci6n (genes SEe) en Entamoeba histolytica.
R. Sanchez, R. Hernandez, G. Mercado, A. Alag6n, y P.M.
Lizardi
1992/P/DBQ
Clonaci6n y secuenciaci6n de los genes u6 y 7L(SRP) de
Entamoeba histolytica.
L.M. Salgado, A. Alag6n, y P.M. Lizardi
1989/P/DBQ
Construcci6n de un vehfculo molecular para transformaci6n estable de Entamoeba histolytica.
A. Alag6n, A. Gonzalez, y P.M. Lizardi
1989/PIDBQ
Programa 2.2 Estudios sobre el DNA repetitivo de Trypanosoma cruzi y Plasmodium.
Se sabe que en el genoma de varias especies de parasitos
se encuentra DNA de secuencia repetitiva que representa
un porcentaje considerable del DNA del nucleo. La secuencia del DNA repetitivo suele ser especffica para la especie,
10 cual permite la identificaci6n taxon6mica del organismo.
Recientemente se ha demostrado la detecci6n de diez a
treinta ceIulas de T. cruzi usando una sonda de DNA de secuencia repetitiva del nudeo de los parasitos, obtenido por
metodos de donaci6n en bacterias.
En un proyecto iniciado por el Dr. Lizardi en la Universidad de Rockefeller, fueron secuenciados cuatro elementos
de DNA repetitivo de P. falciparum. Estas secuencias mostraron hibridaci6n especffica para la especie, es decir, no
forman hfbridos con DNA de otras especies de plasmodia
como P. vivax y P. malariae. La utilidad de estas donas de
DNA repetitivo en ensayos diagn6sticos de malaria se ha demostrado en pruebas de hibridaci6n con sangre de monos
infectados con el parasito. Se continua este proyecto de investigaci6n en el Instituto, y ademas se ha iniciado un proyecto paralelo cUyv fin es aislar y caracterizar donas de
DNA repetitivo de P. vivax, que es la especie de plasmodia
mas frecuente en focos de infecci6n de paludismo en Mexico. Se espera que para este parasito tambien se puedan obtener donas de secuencia especffica para la especie, con similar aplicaci6n practica en ensayos diagn6sticos.
Clonaci6n de DN,Ade elementos repetitivos de P. vivax
y su utilizaci6n para el mapeo de cromosomas.
1. Tussie, A. Alag6n, M.H. Rodriguez y P.M. Lizardi
1986/P IS/DBQ
Secuenciaci6n de genes ribosomales de P. vivax.
1. Tussie, A. Alag6n, M. H. Rodriguez, y P. M. Lizardi
1988/P/S/DBQ
Programa 2.3 Estudios de algunos determinantes
nicos de Mycobacterium leprae.
antige-
La lepra es una enfermedad causada por microorganismos parasitarios intracelulares (M. leprae), de proliferaci6n
muy lenta y para el cual todavia no se ha podido, hasta la
fecha, obtener un cultivo "in vitro". Hay muy pocos modelos experimentales disponibles para el estudio de la lepra;
entre ellos esta la posibilidad de cultivar el bacilo en el armadillo, mamifero americano de pequeno porte, que puede
ser afectado por el bacilo de la lepra. Es una enfermedad importante en ciertos paises, induyendo Mexico, que cuenta
con mas de 18 000 pacientes registrados. La Organizaci6n
Mundial de la Salud (OMS) estima que par cada paciente registrado debe haber de dos a tres veces mas individuos partadares. La lacra social que acompana al portador de lepra
explica, en parte, la carencia exacta de datos estadisticos sobre los enfermos. Si bien existe cura mediante aplicaci6n de
antibi6ticos especfficos, los programas nacionales de varios
paises no han po dido erradicar la enfermedad; al contrario,
el tratamiento inadecuado ha generado bacilos resistentes a
algunos de los antibi6ticos eficaces para su tratamiento. Recientemente, en el ultimo Simposio Latinoamericano sobre
Lepra, realizado en Caracas, Venezuela, en septiembre de
1991, varios participantes, entre ellos algunos expertos de
la Organizaci6n Mundial de la Salud, han presentado datos
indicativos de que el uso de la terapia con distintos antibi6ticos simultineos, conocido por tratamiento multidroga
(MDT),ha disminuido a nivel mundial la incidencia de esta
enfermedad. Sin embargo, no la ha podido erradicar. Como
en una poblaci6n normal puede haber portadores sanos, es
muy importante desarrollar una prueba que facilite la identificaci6n inequfvoca del portador de M. leprae. La clonaci6n de genes obtenida de bancos de cDNA del parasito ha
permitido conocer la secuencia nucleotfdica y, por ende, la
secuencia de aminoacidos de algunas protefnas del M.
leprae. Parte de este trabajo, asf como el mantenimiento de
una colonia de armadillos han sido realizados por mexicanos de la Escuela de Ciencias Bio16gicasdel IPN. EI grupo
de trabajo de L. Possani ha propuesto un proyecto conjunto con los colegas del IPN en el sentido de desarrollar un
sistema de diagn6stico que permita identificar la lepra en
sus fases tempranas de desarrollo, mediante el uso de peptidos sinteticos, disefiados de acuerdo alas secuencias de
aminoacidos conocidas.
Sfntesis de homopolfmeros y heteropolfmeros de peptidos sinteticos para diagn6stico de lepra.
A. Licea, M.C. Gutierrez, 1. Estrada-Garda y L.D. Possani
1991/T/S/DBQ