Organizan: CRECIMIENTO DE PLÁNTULAS DE Acacia mangium Willd. EN RESPUESTA A APLICACIÓN DE MICORRIZA, RIZÓBIO Y FERTILIZACIÓN Sandra Patricia Montealegre Amézquita MSc. UNIVERSIDAD FEDERAL DE VIÇOSA INTRODUCCIÓN Rápido crecimiento en suelos pobres Producción de Biomasa Asociaciones simbióticas con micorrizas y bacterias fijadoras de N2. INTRODUCCIÓN • Las especies de acacia son altamente dependientes de micorrizas para absorber nutrientes minerales, para su crecimiento y fijación de N2. • Áreas destinadas para plantaciones son de baja fertilidad, ausentes de micorrizas compatibles y eficientes. INTRODUCCIÓN • Inoculación es una práctica poco común en viveros. • Interacciones complejas: Rizóbio - Micorriza Fertilización MICORRIZAS Asociaciones mutualísticas entre especies de hongos y las raíces de las plantas. MICORRIZA ARBUSCULAR CARBOHIDRATOS NUTRIENTES PLANTA MICORRIZA ARBUSCULAR Simbiosis más común: 80% de las plantas. Hongos del filo Glomeromycota. Colonización inter y extracelular. ECTOMICORRIZA CARBOHIDRATOS ESTRUCTURAS DE MICORRIZA ARBUSCULAR Fonte: www.cemarh.unifei.edu.br ECTOMICORRIZA Formada principalmente por basidiomicetos y algunos ascomicetos. Pisolithus tinctorius http://www.sfsu.edu/~sierra/Fungi.html Acacia mangium ENDOMICORRIZA – MA ASIA Gigaspora gigantica, Scutellospora calospora, Glomus mosseae, Glomus intraradices Glomus occultum Glomus aggregatum Glomus fasciculatum Glomus etunicatum BRASIL Glomus macrocarpum Glomus etunicatum Entrophospora colombiana ECTOMICORRIZA Thelephora ramaroides Pisolithus sp. Pisolithus tinctorius ASOCIACIÓN SIMBIÓTICA CON RIZOBIO Organismos diazotróficos reducción enzimática N2 NH3 Fijación biológica de nitrógeno FBN Diazotrofos simbióticos forman nódulos. Los rizóbios mas conocidos, bacterias de los géneros Rhizobium, Bradyrhizobium. La capacidad de FBN puede aumentar cuando la planta está colonizada por micorriza. FACTORES QUE AFECTAN LA SIBIOSIS TRIPARTE • • • • • • Genotipo de la planta hospedera Edad Sistema de plantación Compatibilidad funcional entre la bacteria y la micorriza. Propiedades físicas y químicas del suelo. Biota rizosférica ESTUDIOS DE CASO INTERACIONES SIMBIÓTICAS EN Acacia mangium Willd. CRECIMENTO DE MUDAS DE Acacia mangium Willd. EN RESPUESTA A NITRÓGENO, FÓSFORO Y MICORRIZA LOCAL Invernadero Departamento de Microbiologia de la UFV Junio-octubre de 2010. SUSTRATO Latossolo Rojo-Amarillo - con arena 3:1. Esterilizado: auto-clave 121 ºC e 101,32 kPa (1,0 atm) CRECIMENTO DE MUDAS DE Acacia mangium Willd. EN RESPUESTA A NITRÓGENO, FÓSFORO Y MICORRIZA CON SIN MA N (mg/dm3) 0 50 100 150 200 P (mg/dm3) 0 100 200 300 400 Diseño experimental : DBC en esquema fatorial 5x5x2 Unidad experimental: vaso de 1,5 dm3. CRECIMENTO DE MUDAS DE Acacia mangium Willd. EN RESPUESTA A NITRÓGENO, FÓSFORO Y MICORRIZA TRATAMIENTOS P (NaH2PO4) N (NH4NO3) : 40, 55, 70 e 85. SIEMBRA Plantación comercial de A. mangium en Boa Vista – Roraima. Inoculación BFN : Bradyrhizobium BR 3609 + 6009 Embrapa Centro Nacional de Pesquisa en Agrobiologia. CRECIMENTO DE MUDAS DE Acacia mangium Willd. EN RESPUESTA A NITRÓGENO, FÓSFORO Y MICORRIZA INOCULACION MA • Inóculo: Suelo de fragmento de Mata nativa. • Desinfección superficial. 200 esporos/vaso. • Evaluación preliminar de la micorrización (70 DS). • Re-inoculación. CRECIMENTO DE MUDAS DE Acacia mangium Willd. EN RESPUESTA A NITRÓGENO, FÓSFORO Y MICORRIZA CRECIMENTO DE MUDAS DE Acacia mangium Willd. EN RESPUESTA A NITRÓGENO, FÓSFORO Y MICORRIZA EVALUACIÓN DE LA COLONIZACIÓN (Phillips e Hayman, 1970). Segmentos entre 0,5 e 1,0 g de raíces finas/planta. Clarificación con KOH a 10% HCl a 1% Coloración con azul de tripano Evaluación en estereomicroscopio, método de intersección en placa cuadriculada (Giovannetti e Mosse, 1980). RESULTADOS % Colonización Micorrízica 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0.0 0 100 200 300 Dosis de P (mg/dm3) 400 Colonización micorrízica (%) en plántulas aplicación de P. de Acacia mangium Willd, en respuesta a RESULTADOS Raíces de Acacia mangium Willd, colonizadas por MA RESULTADOS • La colonización se encontraba en una fase inicial (50 días de la segunda inoculación). • Baja eficiencia y/o incompatibilidad de la MA usada. Glomus diaphanum, Acaulospora mellean y Acaulospora scrobiculata Trappe. • Poca viabilidad de los esporos. RESULTADOS N200 P0 N200 P100 N200 P200 N200 P300 N200 P400 P0 N2 M Plántulas de Acacia mangium Willd. en respuesta a aplicación de P y N. RESULTADOS P200 N0 P200 N50 P200 N100 P200 N150 P200 N200 Plántulas de Acacia mangium Willd. en respuesta a aplicación de P y N.. RESULTADOS E DISCUSSÃO Ŷ = 4,58833333 + 0,0531219N + 0,08797738P - 0,00025781N2 - 0,00018546P2 + 0,00009743NP 25 R2 = 0.684 Altura (cm) 20 15 10 5 0 0 100 200 300 400 Dosis de P (mg/dm3) N0 N50 N100 N150 N200 Altura de plántulas de Acacia mangium Willd. en respuesta a aplicación de P y N (p ≤ 0,05). 6 3.5 5 3.0 4 2.5 Diámetro (mm) Diámetro (mm) RESULTADOS E DISCUSSÃO 3 2 Ŷ = 0,428362 + 0,012923*N + 0,022044*P - 0,000049*N2 - -0,000044P2 + 0,000018*N*P R2 = 0,82 1 100 200 300 400 N50 N100 N150 0.5 0.0 Dosis de P (mg/dm3) N0 1.5 1.0 0 0 2.0 N200 C/FMA S/FMA Diámetro de plántulas de Acacia mangium Willd. en respuesta a aplicación de P, N y micorriza arbuscular (p ≤ 0,05). RESULTADOS SEM FMA MSR (g) 1.2 1 1 0.8 0.8 0.6 0.6 0.4 0.4 Ŷ = 0,005686*N + 0,005564*P - 0,000029*N2 - 0,000012*P2 + 0,000006*N*P R2 = 0,90 0.2 COM FMA 1.2 Ŷ = 0,006109*N + 0,004280*P 0,000031*N2 - 0,000010 *P2 + 0,000010*N*P R2 = 0,83 0.2 0 0 0 -0.2 100 200 300 N50 N100 N150 100 200 300 400 -0.2 Doses de P (mg/dm3) N0 0 400 Doses de P (mg/dm3) N200 N0 N50 N100 N150 N200 Materia seca de raíces (MSR) de plántulas de Acacia mangium Willd. en respuesta a aplicación de P, N y micorriza arbuscular (p ≤ 0,05). RESULTADOS SEM FMA MST (g) 6 (a) 5 5 4 4 3 3 2 2 R2 = 0,92 1 COM FMA 6 1 Ŷ= 0,025082*N + 0,018182*P - 0,000122*N2 - 0,000045*P2 + 0,000067*N*P R2 = 0, 87 Ŷ = 0,023367*N + 0,022859*P - 0,000112*N 0 0 -0,000054*P2 + 0,000057*N*P 100 200 0 300 400 0 100 Dosis de P (mg/dm3) N0 N50 (b) N100 N150 200 300 400 Dosis de P (mg/dm3) N200 N0 N50 N100 N150 N200 Materia seca total (MST) de plántulas de Acacia mangium Willd. en respuesta a aplicación de P, N y micorriza arbuscular (p ≤ 0,05). RESULTADOS 4.5 9 4.0 Nódulos totais Nódulos 3.0 2.5 Nódulos ativos 2.0 1.5 1.0 0.5 MS Nódulos mg/planta 8 3.5 7 6 5 4 3 2 1 0.0 0 50 100 150 Dosis de N (mg/dm3) 200 0 0 50 100 150 Dosis de N (mg/dm3) Nodulación en plántulas de Acacia mangium Willd. en respuesta a aplicación N. 200 Nodulación en plántulas de Acacia mangium Willd. en respuesta a aplicación N, P Y micorriza arbuscular. Nódulos totales (NT), nódulos activos (NA), matéria seca de los nódulos (MSN). FMA COM SEM DOSIS (mg/dm³ de P) 0 100 200 300 400 DOSIS (mg/dm³ de N) 0 50 100 150 200 NT NA MSN (mg/planta) 2,3 1,09 1,33 0,70 3,34 1,83 0 3,20 1,50 1,80 2,00 0 1,70 1,23 1,33 0,83 0 4,43 1,40 4,59 2,50 4,46 2,96 1,43 0,03 0 3,20 1,20 0,70 0 0 8,52 2,91 1,47 0,02 0 RESULTADOS 4 3.5 Teor de N % 3 Ŷ = 1,9272 + 0,000042*N 2 2.5 R2 = 0,70 2 1.5 Ŷ = 1,615 + 0,000024 *N2 R2 = 0,82 Com FMA 1 Sem FMA 0.5 0 0 50 100 150 200 Dosis de N (mg/dm3) Teor de N (%) en de plántulas de Acacia mangium Willd. en respuesta a aplicación de P, N y micorriza arbuscular (p ≤ 0,05). • La inoculación con MA no fue eficiente en promover la colonización de las plántulas de A. mangium, limitando el efecto en el crecimiento y nutrición. • La mayor producción de biomasa fue obtenida con aplicación de 307,83 mg/dm3 de P y 181,59 mg/dm3 de N sin inoculación de MA. • Para el tipo de suelo utilizado, dosis mayores de 100 mg/dm3 de N, no son recomendables para estimular la simbiosis con Bradyrhizobium en plántulas de A. mangium. PRODUÇÃO DE MUDAS DE ACÁCIA COLONIZADAS COM MICORRIZAS E RIZÓBIO EM DIFERENTES RECIPIENTES Schiavo y Martins (2003) Sustrato orgánico: Bagazo de caña y torta de filtro (Ingenio de azucar). (Compostados); vermiculita 3:1 . Recipientes: Blocos prensados y tubetes (250 cm3). Inóculo MA: Glomus macrocarpum Glomus etunicatum Entrophospora colombiana Inóculo de rizóbio: Br 3609, Br 6009 Growth and mycorrhizal dependency of Acacia mangium Willd. inoculated with three vesicular arbuscular mycorrhizal fungi in lateritic soil Ghosh and Verma (2006) Inóculo MA: Glomus occultum Glomus aggregatum Glomus mosseae No. de Esporos: 120/vaso + fragmentos de raíces colonizadas + micelio. Variations in the responses of Acacia mangium to inoculation with different strains of Bradyrhizobium sp. under nursery conditions Jayakumar and Tan (2006) Growth stimulation of Acacia mangium Willd by Pisolithus sp. in some Senegalese soils R. Duponnois; Bâ (1999) . Avaliação nutricional de mudas de Acacia mangium, Sesbania virgata e Eucalyptus camaldulensis inoculadas com fungos micorrízicos, em casade-vegetação e em cava de extração de argila Shiavo et al. (2009) CONSIDERACIONES FINALES Es importante utilizar la información ya generada, y aplicarla a las procedencias de A. mangium actualmente utilizadas, e incorporar esta tecnología a los protocolos de producción. Son necesarias mas investigaciones para la aplicación biotecnologica de los inoculantes endo y ectomicorrízicos en larga escala, seleccionando especies con elevada eficiencia simbiótica para las especies forestales. Agradecimentos