HIERRO COLOIDAL Método utilizado para mostrar

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HIERRO COLOIDAL
Método para mucinas ácidas
Ref: 180809
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Número mínimo de test realizables ................................... 12 ensayos x 50 ml
Tiempo de ejecución ........................................................ 1 hora 30 min.
Caducidad del producto .................................................... 1 año
Temperatura de almacenamiento ...................................... 15-25 ºC
Equipo complementario…. Jarra Coplin 50 ml, probeta graduada y varilla de vidrio
APLICACIÓN
Método utilizado para mostrar hierro reactivo en secciones de tejidos
PRINCIPIO
Este método esta basado en la interacción del hierro coloidal con los grupos ácidos a pH bajo. El hierro
forma una sal quelada de acido mucopolisacarido; esto se demuestra por la reacción de azul de Prusia:
El ferrocianuro potásico reacciona con los iones férricos de la hemosiderina en medio ácido para formar una
sal coloreada: Prussiar tiene lugar en forma iónica de la siguiente manera
4Fe+++ + 3K4FE(CN)6 = Fe4(Fe(CN)6)3 + 12K+
REACTIVOS
A- solución acido acético .................................................... 30
B- solución buffer acido ...................................................... 18
C- solución acido coloidal.................................................... 18
D- solución acido acético .................................................... 30
E- Solución acido acético .................................................... 30
F- solución ferrocianuro potásico ......................................... 12
G- ácido hidroclorhidrico 5M ............................................... 50
H- solución rojo rápido nuclear............................................ 30
ml
ml
ml
ml
ml
x 10 ml
ml
ml
MÉTODO
1- Lavar el porta con agua destilada
2- Ponga en el porta 10 gotas del reactivo A: deje actuar durante 2 minutos
3- Prepare el recipiente de incubación: ponga en el fondo 10 ml de agua destilada, introduzca el
porta y ponga sobre el porta 5 gotas del reactivo B y 5 gotas del reactivo C. cierre el recipiente
y deje incubar durante 60 minutos.
4- Sin lavar, escurra el portaobjetos y pinga sobre la muestra 10 gotas del reactivo D: deje actuar
durante 1 minuto. Escurra el portaobjetos y repita el paso 4.
5- Sin lavar, escurra el portaobjetos y ponga sobre la muestra 10 gotas del reactivo E. deje actuar
durante 1 minuto. Escurra el portaobjetos y repita el paso 5
6- Escurra el portaobjetos.
Partita IVA - VAT Number: IT06754140157
Tribunale di Milano REA n. 1118800 – c.c.i.a.a. di Milano
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7- Vierta todo el contenido del recipiente de la botella F en una jarra Coplin de 50 ml. Añadir 30 ml
de agua destilada y 4 ml del reactivo G. Agite brevemente y sumerja el portaobjetos durante 10
minutos.
8- Ponga sobre la muestra 10 gotas del reactivo H. Deje actuar durante 5 minutos
9- Lavar en agua destilada
10- Deshidratar en soluciones ascendentes de alcoholes, xileno y montaje
RESULTADOS
Mucinas ácidas ....................................................................................................azul
Núcleos .............................................................................................................. rojo
PRECAUCIÓN:
Los iones férricos contaminan el vidrio en contacto con el baño de flotación. Para evitarlo, nunca toque
la solución con objetos metálicos.
Para mayor información sobre los riesgos, y medidas de precaución en la manipulación de los reactivos, están
disponibles las fichas de seguridad de los mismos.
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