Método 9 DETERMInACIón DE MATERIA ORgánICA DIsuELTA

Método 9
Determinación de Materia Orgánica Disuelta Coloreada
Laurencia Guzmán y Ramón Varela
Introducción
La materia orgánica disuelta coloreada (MODC
o CDOM por sus siglas en ingles) es producto de la
descomposición de compuestos orgánicos, principalmente de origen vegetal, aportados por los ríos y la
degradación del fitoplancton en el mar. La MODC se
define como el material que pasa por un filtro de 0,2
µm y se cuantifica en unidades de absorción (m-1) para longitudes de onda específicas. El espectro de
absorción de la MODC con su máximo de absorción
en el ultravioleta disminuye exponencialmente hacia
longitudes de onda mayores. Este procedimiento
describe el método para determinar MODC, utilizando
un método espectrofotométrico con el cual se calcula
el coeficiente de absorción del material disuelto (ag),
basándose en Bricaud et al. (1981), Nelson y Siegel
(2002) y Nelson et al. (2007).
Fundamentos del método
La absorbancia de la MODC se mide en la región del
ultravioleta y el azul empleando un espectrofotómetro.
El coeficiente de absorción del material disuelto se
calcula a partir de estos valores para la(s) longitud(es)
de onda deseada(s).
Advertencias analíticas
1. Usar agua recién destilada para el blanco y almacenar al resguardo de la luz bajo refrigeración para
prevenir alguna alteración. Un blanco contamina-
do puede afectar el coeficiente de absorción de la
MODC.
2. La línea base en las mediciones espectrofotométricas debe ser constante. Una línea base fluctuante puede afectar el coeficiente de absorción de la
MODC.
3. Filtrar lentamente para evitar la rotura del filtro (y
el paso de partículas a través del mismo) o que las
células se rompan (lo que libera los componentes
intracelulares).
4. La exposición de las muestras a la luz por periodos
prolongados puede resultar en una pérdida de color lo cual afecta el coeficiente de absorción de la
MODC.
Materiales
Emplear guantes de polietileno en todo momento
para manipular los materiales y las muestras.
1. Filtros de jeringa de nylon, de 25 mm de diámetro y
0,2 µm de tamaño de poro.
2. Jeringas plásticas de 60 mL sin émbolo de goma
negra (Figura 9.1).
3. Jeringa de vidrio de 60 mL, con aguja de acero inoxidable de 10,2 cm de largo, lavada con agua recién
destilada y etanol (Figura 9.2).
4. Celdas de cuarzo, 10-cm paso de luz, con tapas de
Teflon®, lavadas con agua recién destilada y etanol.
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5. Botellas de vidrio ámbar de 60 mL con tapa de
Teflon®.
Reactivos
1. Acido clorhídrico (HCl), al 10%.
2. Etanol (C2H6O), grado reactivo o mejor.
Equipo
1. Espectrofotómetro para mediciones espectrales
con un ancho de banda de 200 – 850 nm. Es
conveniente realizar un barrido, a una resolución
de 2nm.
Captación de muestras
1. Pretratamiento del material de recolección
a. Sumergir las botellas ámbar, sus tapas y las
jeringas en una solución de HCl al 10% por una
noche a temperatura ambiente y luego enjuagar
con agua destilada.
2. Captación de muestra
a. Captar la muestra con una jeringa plástica utilizando guantes de polietileno. Antes de captar la
muestra, retirar el émbolo y lavar la jeringa tres
veces con la muestra.
b. Conectar el filtro de nylon a la punta de la jeringa
y llenarla. Filtrar la muestra directamente dentro
de la botella ámbar. Enjuagar la botella ámbar 3
veces con la muestra filtrada. Dejar un espacio
de aire en la botella de aproximadamente 1
mL (10% del volumen total de la botella) para
permitir la expansión del agua al congelar.
c. Congelar la muestra a -20 °C.
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Análisis de muestras
1. La adecuada preservación de la muestra permite
que la misma permanezca sin alterar varios meses,
siempre y cuando se mantenga congelada y
resguardada de la luz.
2. Descongelar las muestras y permitir que alcancen
temperatura ambiente.
3. Extraer la muestra de la botella utilizando una
jeringa de vidrio con aguja metálica.
4. Retirar la aguja y colocar un filtro de jeringa de 0,2
µm. Filtrar directamente en la celda, enjuagando
tres veces con la muestra. Llenar completamente
la celda sin que queden burbujas. Limpiar y secar
el exterior de la celda.
5. Preparar una celda con agua recién destilada
(blanco) a temperatura ambiente.
6. Realizar la medición espectral de la muestra
(absorbancia, A(λ)) entre 230 y 700 nm, ajustando el espectrofotómetro con el blanco. Al finalizar,
las muestras no pueden congelarse nuevamente,
pero si pueden permanecer refrigeradas en sus
botellas ámbar por no más de 3-4 días.
7. Si es necesario corregir fluctuaciones de la línea
base, sustraer de cada longitud de onda el valor de
absorbancia a 700 nm.
Cálculo y Expresión de Resultados
El calculó del coeficiente de absorción del material
disuelto (ag) se realiza mediante la siguiente expresión
(Bricaud et al., 1981):
ag(λ)= 2,303 A(λ)/L (1)
donde
A(λ) =absorbancia a una determinada longitud
de onda (m-1).
L
= longitud de la celda (0,1 m)
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