ESTUDIOS QUIMICOS FORENSES DE HUMOR VÍTREO L.C Y T.C ZALATIEL SANTOS VÁZQUEZ El uso del humor vítreo en medicina forense a traído grandes resultados positivos ya que presenta ventajas significativas sobre otras pruebas cadavéricas, el estudio y análisis del humor vítreo en cadáveres nos puede ayudar a determinar el momento exacto en el que una persona falleció, así como nos proporciona información de sustancias toxicas y determinación de datos patológicos previos o relacionados con la causa de muerte, como método los investigadores comienzan su trabajo analizando las concentraciones de potasio, urea e hipoxantina un metabolito del ADN, mismos que se presentan en el humor vítreo del ojo del cadáver, la extracción de las mismas no significan un gran problema para los especialistas ya que se puede realizar por medio de una punción directa a la zona especifica de globo ocular, misma anatomía protege por un tiempo determinado de cualquier daño significativo como traumatismos en la zona ósea, así como de los efectos naturales de la descomposición del cuerpo. Luego se introducirán las cifras de las concentraciones de potasio y otras sustancias en programas computarizados como lo es el equipo (Viva Twin, cromatografía liquida y cromatografía de gases) utilizado en México en algunos Estados como Chihuahua, Aguascalientes y México D.F), mismo que nos arrojara los resultados que buscamos. Podemos señalar que el humor vítreo es confiable en cuanto este no se mezcle con otros líquidos o fluidos mismos que entorpecerían las muestras a analizar. La ciencia aplicada en la investigación forense ha significado en esta época uno de los grandes avances dentro de la colectividad, así mismo, es un componente esencial de la cultura contemporánea, el conocimiento científico en la criminalística ha permitido al investigador ser más racional y critico en las pesquisas forenses. L.C Y T.C ZALATIEL SANTOS VÁZQUEZ En este artículo abordamos la trascendencia que tiene la Medicina Forense apoyándose de la Toxicología mismas que logran grandes aportaciones dentro de los trabajos criminalísticos, proporcionando datos fidedignos, convincentes relacionados con la investigación o búsqueda de sustancias toxicas mismas que se pueden encontrar en el Humor Vítreo, por esto señalamos de una forma directa la importancia de las técnicas utilizadas para el análisis de las muestras y sus resultados favorables. El trabajo realizado nos permitirá identificar que el análisis del Humor Vítreo ha proporcionado resultados muy favorables para los toxicólogos forenses en la identificación de sustancias, así mismo estos exámenes nos dan a conocer si el cadáver analizado pudo haber padecido de diabetes y esta misma le ocasiono un paro diabético generando la muerte, de igual forma podemos encontrar en esta práctica la data de muerte mejor conocida como cronotanatodiagnostico precisando el tiempo que se encuentra sin vida el cadáver. La Toxicología Forense, permite la determinación de Sustancias como lo son los estupefacientes y psicotrópicos, con el objeto de ayudar a la investigación e impartición de justicia, por ejemplo en la investigación que realizan los médicos forenses, interviene al establecer la causa de muerte ya sea por envenenamiento o por el uso de algún tipo de droga. Todo esto través de la detección y cuantificación de las drogas de abuso (marihuana, cocaína, heroína, u otras) . Analizando diferentes tipos de muestras biológicas como lo es en (sangre, orina, tejidos u otros líquidos biológicos), así como también en sustancias desconocidas encontradas en el lugar de los hechos. La prueba de el humor vítreo es una de las más importantes y confiables para determinar la causa de muerte , encontrar si el cuerpo contiene algún tipo de sustancia toxica en el cuerpo y determinar un cronotanatodiagnostico de la muerte. Esta prueba es de extracción fácil, la muestra que se obtienen de el humor vítreo es muy limpia y difícilmente se contamina con otras sustancias, es fácil obtener L.C Y T.C ZALATIEL SANTOS VÁZQUEZ resultados utilizando concentraciones muy bajas de la muestra y coadyuva a determinar el tipo de metabolizo requerido en la investigación. La tanatoquimia es una rama auxiliar importante en medicina forense que se basa en el análisis de fluidos que no se alteran con tanta rapidez como los contenidos en el humor vítreo todo esto en el estudio post mortem. HUMOR VÍTREO Es una sustancia gelatinosa que se mantiene unida por una fina red de tejido intraocular misma que está compuesta fundamentalmente por largas moléculas de proteoglucanos. El colágeno representa tan sólo el 0,01% del volumen; el 99% es agua. En su interior no hay un flujo activo de líquido y las sustancias se desplazan lentamente ya que no hay un gran desplazamiento de las mismas. Con el envejecimiento normal, o por alguna enfermedad patológica, el humor vítreo se licúa, formándose masas o filamentos de gel compactado, siendo de utilidad para los fines toxicológicos. Podemos señalar que el humor vítreo tiene evidentes ventajas sobre algunas otras muestras que se pueden recabar de un cadáver ya que cuenta con un fácil acceso, permitiendo a los Médicos Forenses o Toxicólogos una sencilla toma de la sustancia gelatinosa (gel vítreo), cabe señalar que esta sustancia se puede encontrar eficazmente protegida por la posición anatómica que dispensan las orbitas, incluso ante traumatismos cefálicos considerables o muerte violenta, la menor concentración de células que contiene llega a proporcionar cambios líticos tranquilos mismos que permiten obtener una cantidad de muestra necesaria para sus estudios. Su aislamiento por su posición lo protege de la putrefacción derivada de la exposición natural así como de otros factores como lo son las bacterias, hongos, fauna cadavérica, sustancias contaminantes del subsuelo hasta las mismas cobijas, la ropa y la calefacción encontrándose en L.C Y T.C ZALATIEL SANTOS VÁZQUEZ lugares cerrados estos son elementos propios que a diferencia de otros fluidos u órganos tales como las visceras, sangre, orina entre otros que también sirven como medio de análisis y mas allá se ha puesto de manifiesto su conservación en el mismo proceso de embalsamiento, se puede utilizar el humor vítreo de una forma confiable hasta 20 días a temperaturas inferiores a 28 grados centígrados y si es mayor a este se reduce la cantidad de días. PRINCIPALES DATOS A ANALIZAR El uso del humor vítreo en medicina forense se puede fijar en tres principales preguntas que surgen derivado de la obtención de un problema llamado cadáver, las cuales atienden a responder: la precisión de la data de muerte o cronotanatodiagnostico (CTD), así como el estudio de sustancias toxicas como fármacos, estupefacientes, Barbitúricos, Benzodiazepinas, Antidepresivos, Anestésicos generales, Opiáceos, Cocaína, Cannabinoides, Anfetaminas, LSD, Alcohol etílico, Alcohol metílico, y la determinación de estados patológicos previos o relacionados con la muerte como lo es en algunos casos la determinación de glucosa en el humor vítreo en el diagnostico post mortem identificando la presencia de diabetes o estado hiperglicémico, misma practica nos puede ayudar a la detección post mórtem del coma diabético pero requiere de análisis químicos más exactos, debido al uso continuo de glucosa por las células que sobreviven cierto tiempo después de la muerte, y a que los niveles de glucosa sanguínea disminuyen rápidamente. Por lo tanto, el humor vítreo ha sido usado como un sustituto en la práctica forense, debido a su muy baja celularidad y por consiguiente los niveles de glucosa se mantienen estables durante un tiempo más prolongado después de la muerte. Podemos mencionar que de una manera frecuente en estudios de investigación que la cuantificación de glucosa en el humor vítreo puede ser usada para determinar niveles aproximados de glucosa sanguínea ante mórtem. L.C Y T.C ZALATIEL SANTOS VÁZQUEZ TÉCNICAS PARA OBTENCIÓN DE MUESTRAS Existen diferentes técnicas para la obtención de muestras para analizar el humor vítreo en cadáveres: Química Analítica (pruebas con desarrollo de color), que consisten en poner una pequeña cantidad de muestra en un tubo de ensayo, añadir una disolución confirmando un positivo si cambia de color. Potenciometría, Inmunoensayo por interacción cinética de macropartículas, Cromatografía de gases. (ECD, NPD, FID). consta de de la cuantificación de analitos por medio del voltaje. Cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). permite la separación, identificación cualitativa y determinación cuantitativa de especies en una variedad de materiales complejos orgánicos, inorgánicos, biológicos y otros. Espectrometría de masas (GC/MS), La espectrometría de masas es una técnica analítica de gran potencial que nos permite elucidar estructuras químicas, se basa en la medición de la relación masa/carga de especies moleculares. Las determinaciones requieren de la generación de especies cargadas eléctricamente, lo cual se logra por diferentes metodologías como pueden ser el impacto electrónico, el bombardeo de átomos rápidos (FAB), el análisis directo en tiempo real (DART) y la generación de iones enlazados. La medición de la relación masa/carga nos permite también saber el peso molecular exacto de la molécula. Espectrofotometría visible/ultravioleta. Nos permite la medición de la cantidad de energía radiante que absorbe o transmite un sistema químico en función de la longitud de onda; es el método de análisis más usado en las investigaciones. L.C Y T.C ZALATIEL SANTOS VÁZQUEZ INSTRUMENTALES PARA ANÁLISIS DE LAS MUESTRAS Para la obtención de muestras se realiza una punción detrás del cristalino del ojo extrayendo la sustancia o gel vítreo del cadáver. Química Analítica tubos de ensayo reactivos Cromatografía líquida Potenciometría Espectrometría de masas Espectrofotometría visible/ultravioleta. L.C Y T.C ZALATIEL SANTOS VÁZQUEZ A lo largo de los estudios forenses que se han realizado utilizando como medio el humor vítreo de los cadáveres, nos hemos ido dando cuenta de la importancia que tiene dentro de la medicina y la toxicología forense, ya que los resultados arrojados han sido contundentes en la demostración de vínculos probatorios que permiten esclarecer diferentes procesos judiciales. Esta es una técnica muy confiable debido a que la contaminación de la muestra es muy difícil que se dé en el cadáver, por la protección que tiene gracias a la ubicación con la que cuenta, permitiendo conocer de manera eficaz la causa de muerte ya sea por envenenamiento o por el abuso de algún tipo de droga y además el poder identificar el tiempo determinado de la muerte. Las conclusiones surgen de la determinación de los elementos bioquímicos post mórtem del humor vítreo constituyen un elemento por demás importante en el campo de la medicina forense, ligada a los dictámenes periciales en materia judicial. Eso es debido a que este tipo de análisis representan un elemento que permite esclarecer entre otras cosas la hora probable de muerte, el estado metabólico ante mórtem del individuo, y relacionarlo con las causas la muerte, es por ende que recalcamos de la importancia que tiene el análisis del humor vítreo dentro de la química forense. L.C Y T.C ZALATIEL SANTOS VÁZQUEZ