Diagnóstico general de las enfermedades infecciosas

Diagnóstico General de las
Enfermedades Infecciosas
¿Qué debe esperar un clínico del laboratorio
de Microbiología?
• Información para una decisión clínica.
• Normas de recogida y transporte de
muestras.
• Identificación de microorganismos.
• Sensibilidad a los antimicrobianos.
• Control de antibioterapia.
• Procesamiento y respuesta rápida.
• Información actualizada.
Diagnóstico Microbiológico
• Confirmar o excluir un diagnóstico clínico
• Relevancia: Actividades a ejercer en el
paciente en función del resultado
– Clínica:
• Tratamiento antimicrobiano precoz y
adecuado
• Gravedad del proceso
– Epidemiologica:
• Declaración obligatoria
• Quimioprofilaxis
Diagnóstico Microbiológico: Fases
1. Recogida de muestras clínicas
•
•
Importancia.
Normas generales.
2. Transporte de muestras clínicas
•
•
•
Viales.
Condiciones de transporte.
Medios de transporte.
3. Diagnóstico:
•
•
Directo.
Indirecto.
Diagnóstico Directo/Indirecto
• Directo. Implica la demostración del agente
o componentes en los fluidos orgánicos.
• Indirecto. Implica la demostración de la
huella que el agente ha dejado en su
contacto con el sistema inmune (RI
adquirida celular o humoral).
Diagnóstico Directo
1.
2.
3.
4.
5.
Visualización de microorganismos.
Cultivo.
Identificación y antibiograma.
Detección de antígenos microbianos.
Técnicas moleculares.
Diagnóstico Directo
1. Visualización de microorganismos
1. Examen Directo
–
–
–
Examen en fresco.
Microscopía de campo oscuro.
Microscopía electrónica.
2. Tinciones:
–
–
–
–
Gram.
Ziehl: micobacterias.
Tinciones fluorescentes.
Giemsa: parásitos.
Microscopía óptica
Examen en Fresco
Hifas
Microscopía de campo oscuro.
Treponema pallidum
Tinción de Gram
Tinción de Gram
Uretritis
gonocócica
Streptococcus mitis
Tinción de Gram
Bacillus anthracis
Tinción de Ziehl Neelsen
B.A.A.R
Tinciones fluorescentes
Auramina rodamina (MTB)
Tinción de Giemsa
Filarias
Diagnóstico Directo
2. Cultivo
1. Medios artificiales
Tipos.
Condiciones de incubación.
1. Animales de experimentación.
Medios de Cultivo
Medios de Cultivo
Jarra para bacterias anaerobias
Diagnóstico Directo
3. Identificación y antibiograma
Diagnóstico Directo
4. Detección de antígenos
Aglutinación con partículas de látex
(Ag capsular de Cryptococcus neoformans)
Diagnóstico Directo
4. Detección de antígenos
Inmunofluorescencia directa (IFD)
Pneumocystis jiroveci
Legionella pneumophila
Diagnóstico Directo
4. Detección de antígenos
Inmunocromatografía
Ag de Legionella y S.pneumoniae en orina, toxinas de Clostridium
difficile en muestras de heces
D. Directo. 5. Técnicas moleculares
1. Análisis de material genético microbiano
– Técnicas de hibridación (sondas de ADN).
(Identificación)
– Técnicas de amplificación (PCR). (Diagnóstico e
identificación)
– Técnicas de tipado epidemiológico molecular
(PFGE, RFLP,...).
– 2. Análisis de proteínas microbianas:
– MALDI-TOF (identificación)
Diagnóstico Directo
5. Técnicas moleculares
Diagnóstico Directo
5. Técnicas moleculares
Diagnóstico Directo
5. Técnicas moleculares
MALDI-TOF
Técnicas moleculares
PFGE
Diagnóstico Indirecto
Detección de RI específica humoral
(Anticuerpos):
Detección de RI específica celular:
– Mantoux
Fundamento. D. indirecto
Fundamento. D.indirecto
Fundamento. D. indirecto