Reglas para el uso del microscopio

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS
CARRERA DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA I
Profesor:
Dr. Carlos Rodríguez Ph.D.
Práctica # 2
Ayudante: Gabriela Vinueza
Semestre: Tercero Bioquímica
1.
INTRODUCCIÓN
Uno de los avances que han permitido el desarrollo de las ciencias biológicas, es la
invención y desarrollo del microscopio óptico. Este instrumento aumenta el tamaño de
objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio de tipo compuesto posee
dos juegos de lentes, conocidos como ocular y objetivos. Al final se obtiene una imagen
virtual e invertida. Las propiedades físicas que permiten que esto sea posible son el poder
de resolución y el poder de magnificación.
El desarrollo de la Microbiología como ciencia se ha basado en los descubrimientos
hechos con la ayuda de éste instrumento. Antonie van Leeuwenhoek, en el siglo XVII, fue
el primero en observar microorganismos, específicamente bacterias. Desde allí, hasta la
actualidad, se han construido instrumentos cada vez más precisos, que incluso han
permitido aumentar el tamaño real de los microorganismos más de 200000 veces.
2. MATERIALES Y MÉTODOS
Portaobjetos y cubreobjetos
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Microscopio óptico
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Agua destilada
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Cultivo puro de Aspergillus sp.
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Agua empozada con algas filamentosas
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Cultivos puros de bacterias
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Tijeras, cuchillo.
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Colorantes
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Aceite de inmersión
Reglas para el cuidado del microscopio.
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Siempre transportar el microscopio óptico con las dos manos.
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Nunca inclinar el microscopio o quitar los lentes.
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Nunca tocas los lentes. Si están sucios se deben limpiar con un papel especial
(papel para lentes).
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Nunca observar un objeto sin cubreobjetos (excepto con el lente de inmersión)
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Siempre empezar la observación con el lente de menor aumento.
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Siempre quitar la placa portaobjetos luego de realizada la observación y regresar
al objetivo de menor aumento.
Reglas para el uso del microscopio
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Conectar el microscopio y encender la lámpara.
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Asegurarse que el objetivo que esta sobre la platina es el de menor aumento.
Colocar el objeto a observar.
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Mover la platina hacia la posición mas baja posible con ayuda del tornillo
macrométrico.
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Observando por el lente ocular, y mediante el tornillo macrométrico enfocar la
imagen del objeto.
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Aclarar la imagen usando el tornillo micrométrico.
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Ubicar el objeto a ser observado y en caso de usar otros objetivos de mayor
aumento solamente aclarar la imagen usando el tornillo micrométrico.
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Regresar al objetivo de menor aumento y quitar la placa portaobjetos. Apagar la
lámpara, desconectar el microscopio, cubrirlo y guardarlo.
Procedimiento
Poder de resolución y magnificación
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Calcular el poder de resolución y magnificación de cada uno de los lentes
objetivos.
Agua empozada
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Tomar una gota de agua empozada, incluyendo las algas filamentosas, y
colocarla sobre un portaobjetos limpio.
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Colocar el cubreobjetos, sin dejar burbujas sobre la muestra.
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Colocar la muestra sobre la platina del microscopio.
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Tomando en cuenta las reglas y cuidados para el uso del microscopio, proceder a
observar con el lente objetivo de mayor aumento y dibujar. No dibujar el campo
visual.
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Tratar de identificar:

Algas unicelulares

Algas pluricelulares

Protozoos
Dibujar al menos CUATRO microorganismos diferentes
Cultivo puro de Aspergillus sp.
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Colocar una gota de agua en el centro de un portaobjetos.
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Con la ayuda de un asa en punta, transferir parte del cultivo a la gota de agua.
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Añadir el cubreobjetos.
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Observar y dibujar con los objetivos de 10X y 40X. No dibujar el campo visual.
Cultivo puro de bacterias
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Colocar un portaobjetos con un frotis de bacterias, el mismo que se encuentra teñido con
cristal violeta.
3.
Observar y dibujar con ayuda del lente de inmersión (100X).
RESULTADOS
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Calcular el poder de resolución de los cuatro objetivos del microscopio.
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Para cada muestra dibujar lo observado, tal como se describe en el procedimiento. Tomar en
cuenta el tamaño de los objetos para guardar congruencia y de esa manera poder establecer
una comparación. Todos los dibujos deben ser realizados a lápiz y etiquetados de la manera
correspondiente.
4.
DISCUSIÓN
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Explicar las diferencias entre los objetivos secos y el lente de inmersión.
-
Discutir las características de los diferentes grupos de microorganismos observados durante la
práctica.
-
Explicar las diferencias tanto en el poder de resolución, como en el poder de magnificación.
¿Cómo se demuestran éstas características del microscopio, con los experimentos realizados?
5.
CUESTIONARIO
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Si tuviera esferas de vidrio de 0.1 m, ¿Podría observarlas con ayuda del microscopio utilizado
en esta práctica? Explique su respuesta.
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Indique las características principales del microscopio electrónico de transmisión y microscopio
electrónico de barrido.
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Indique la característica más importante de cada uno de los grupos de microorganismos
observados durante la práctica.