Universidad Nacional del Nordeste FACULTAD DE AGROINDUSTRIAS Microbiología General- Carrera de Farmacia Trabajo Práctico Nº 10 Flora Humana Normal Año 2006 Trabajo Práctico Nº 10 FLORA HUMANA NORMAL Introducción. Definiciones El cuerpo humano presenta una gran superficie cutánea y mucosa por la que entra en contacto con el medio ambiente. En esta superficie existen diversos sectores, donde residen microorganismos con diferentes características de humedad, temperatura, pH y disponibilidad de nutrientes. La flora humana normal es el conjunto de gérmenes que conviven con el huésped en estado normal, sin causarle enfermedad. Su composición es característica para la especie humana, tanto en los gérmenes que la componen como en su número y distribución en el organismo. Sitios colonizados y sitios estériles La flora normal coloniza las superficies cutáneomucosas. Por otro lado, en el organismo existen sectores que son estériles en condiciones normales: por ejemplo, pleura, meninges, cavidad peritoneal, pericardio, etc. Flora basal y flora transitoria La flora basal es la característica de cada sector del organismo y está constituida por gérmenes que siempre están presentes en ese sector. Por ejemplo: Staphylococcus epidermidis en la piel o E. coli en el intestino. En cambio, la flora transitoria es variable de un ser humano a otro y está compuesta por gérmenes que colonizan en forma intermitente un determinado sector. Esta flora transitoria puede incluir bacterias potencialmente patógenas para el propio individuo u otras personas que entran en contacto con él. Importancia de la flora normal La flora humana normal desde diversos puntos de vista representa un importante mecanismo de defensa del huésped. La flora además ayuda a evitar la colonización de la piel o las mucosas por bacterias que pueden ser patógenas. Los gérmenes para iniciar la infección deben, en general, comenzar por colonizar los epitelios. Allí seguramente compiten con los integrantes de la flora por factores tales como receptores celulares y nutrientes. IMPORTANCIA DE LA FLORA NORMAL Efectos directos • Producción de bacteriocinas • Producción de metabolitos tóxicos • Reducción del potencial redox • Consumo de nutrientes esenciales • Competencia por receptores Efectos indirectos • Aumento de la producción de anticuerpos. • Estímulo de la fagocitosis • Aumento de la producción de interferón. • Deconjugación de ácidos biliares. López Tevez, Leonor; Torres, Carola Universidad Nacional del Nordeste FACULTAD DE AGROINDUSTRIAS Microbiología General- Carrera de Farmacia Trabajo Práctico Nº 10 Flora Humana Normal Año 2006 ACTIVIDADES OBJETIVO - La práctica consistirá en la demostración, por parte de los estudiantes, de la existencia de microorganismos que residen en diversos sectores de la superficie cutáneo-mucosa, constituyendo la flora normal humana. MATERIALES - Placas de agar sangre, hisopo de algodón estéril, asa bacteriológica, baja lengua, soporte de tinción, portaobjetos. 1- Seguir el procedimiento cómo se indica a continuación para comprobar la existencia de microorganismos en distintas áreas del cuerpo a. Exudado faríngeo: con la ayuda del baja lengua se realiza la toma de la muestra con el hisopo, se toca la pared posterior de la faringe y la región tonsilar. Se realiza la descarga del hisopo en un extremo de la placa de agar sangre, luego se continúa con el asa estéril, volviendo a pasar ésta sobre la zona de descarga, se estría la placa en 3 o 4 direcciones. De esta manera el inóculo de bacterias arrastrado por el asa disminuye progresivamente a medida que se avanza sobre la superficie de la placa, y puede obtenerse el desarrollo de colonias aisladas. Se incuba a 37 ºC durante 24 horas. Se analizarán los resultados de la siguiente manera: 1. observación macroscópica: morfología colonial; 2. observación microscópica (tinción de Gram): forma, agrupación, comportamiento frente al Gram. b. Exudado nasal: se introduce el hisopo de algodón estéril en una de las narinas rotándolo. La muestra obtenida se procesará y analizará siguiendo el mismo procedimiento que en el caso anterior. c. Flora de la piel: para investigar la flora de la piel, se toca la placa de agar sangre con la mano de un voluntario. Se incuba a 37ºC durante 24 horas. d. Se entregarán frotis de hisopado vaginal y rectal, teñidos con Gram, donde se observará la morfología microscópica de la flora normal de dichas regiones. PRINCIPALES INTEGRANTES DE LA FLORA NORMAL DE COLON Y VAGINA Bacterias Gram negativas anaerobia Bacteroides spp Fusobacterium spp Veillonella Bacterias Gram positivas anaerobias Peptostreptococcus Bifidobacterium Actinomyces Clostridium spp Bacterias Gram negativas aerobias anaerobias facultativas Enterobacteriaceae E.coli Klebsiella Proteus López Tevez, Leonor; Torres, Carola COLON VAGINA +++ ++ ++ + ++ - ++ ++ ++ ++ ++ + +++ ++ ++ ++ - Universidad Nacional del Nordeste FACULTAD DE AGROINDUSTRIAS Microbiología General- Carrera de Farmacia Trabajo Práctico Nº 10 Flora Humana Normal Año 2006 Enterobacter Bacterias Gram positivas aerobias Enterococcus spp Streptococcus spp Staphylococcus spp +++ + + + + + PRINCIPALES INTEGRANTES DE LA FLORA NORMAL DE PIEL, OROFARÍNGE Y FOSAS NASALES PIEL BOCA FARINGE FOSAS NASALES +++ + +++ ++ + +++ + ++ +++ +++ +++ + + +++ + +++ + + - +++ + + ++ ++ ++ ++ + + + + ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ + + + + + c. Bacterias Gram negativas aerobias Neisserias spp Haemophylus spp + - + - + + + + d. Bacterias Gram negativas anaerobias Fusobacterium Bacteroides - + + + + - e. Otros Treponema (T.pallium) - ++ - - a. Bacterias Gram negativas aerobias Staphylococcus spp aureus epidermidis Streptococcus α-hemolíticos ß-hemolíticos (no es grupo A) pneumoniae Corynebacterium spp b. Bacterias Gram positivas anaerobias Peptococcus, Peptostreptococcus Bifidobacterium spp Actinomyces spp Lactobacillus López Tevez, Leonor; Torres, Carola Universidad Nacional del Nordeste FACULTAD DE AGROINDUSTRIAS Microbiología General- Carrera de Farmacia Trabajo Práctico Nº 10 Flora Humana Normal Año 2006 2- Responda el siguiente cuestionario 1. ¿A qué se denomina flora humana normal? Destaque su importancia 2. ¿A qué se denominan patógenos oportunistas? 3. ¿Cuáles son los factores que pueden alterar la flora normal? 4. ¿En qué consiste la placa bacteriana? 5. Detallar la flora normal de: piel, boca, vagina, aparato respiratorio, conjuntiva y aparato urinario. 6. Definir: mutualismo, comensalismo y parasitismo 7. Explique cómo se prepara el agar sangre. 8. ¿Qué significa que un microorganismo sea betahemolítico y cómo se manifiesta? 9. Diferencie entre flora humana normal y patógena 10. Mencione la importancia de la flora digestiva López Tevez, Leonor; Torres, Carola