MEDIO DE CULTIVO Bacteriología General _ Catálogo 1048 ___________________________________________________ CALDO VERDE BRILLANTE BILIS AL 2% USO Medio selectivo recomendado para la prueba confirmatoria en la detección del grupo coliforme en aguas, leche, derivados lácteos y otros productos de importancia sanitaria, mediante la determinación del NMP. PRINCIPIO La bilis y el verde brillante inhiben el desarrollo indeseable de la flora acompañante de los coliformes e incluso suprimen el crecimiento de los anaerobios fermentadores de la lactosa como es el caso de Clostridium perfringens. La presencia de gas después de incubar 24 – 48 h a 35ºC se considera como prueba positiva para la presencia del grupo Coli – Enterobacter. Transferir individualmente de cada tubo de Caldo Lactosado positivo (prueba presuntiva con desarrollo bacteriano y presencia de gas en cualquier cantidad) de 2 a 3 asadas a un tubo de Caldo Verde Brillante Bilis al 2%. Incubar 48 h a 35ºC. La formación de gas en cualquier cantidad dentro de la campana de Durham, hace positiva la prueba. Determinar el NMP de organismos coliformes en la muestra de acuerdo a la Tabla establecida. FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA 20.0 Peptona de gelatina Bilis de buey deshidratada Lactosa 10.0 Verde brillante pH 7.2 ± 0.2 10.0 0.0133 PREPARACION Rehidratar 40 g del medio en un litro de agua destilada agitando frecuentemente para disolverlo por completo. Distribuir en tubos de ensayo con campana de Durham. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lbs de presión) durante 15 minutos. Conservar en refrigeración de 2º a 8ºC. Las concentraciones necesarias del medio deshidratado para mantener la concentración equivalente de los ingredientes es la siguiente: INOCULO CANTIDAD DEL MEDIO EN EL TUBO VOLUMEN DEL MEDIO INOCULADO 1 ml 10 ml 10 ml 10 ml 20 ml 30 ml 11 ml 30 ml 40 ml MICROORGANISMO Escherichia coli Enterobacter aerogenes Staphylococcus aureus Enterococcus faecalis CONTROL DE ACTIVIDAD CEPA RESULTADO RECUPERACION ATCC 25922 Muy buena ATCC 13048 Buena ATCC 25923 Inhibido ATCC 29212 Inhibido DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. CALDO VERDE BRILLANTE AL 2 % UTILIZADO PARA 1000 ml 40 g 60 g 53 g GAS + + - 3 MEDIO DE CULTIVO Bacteriología General _ Catálogo 1048 ___________________________________________________ BIBLIOGRAFIA Standard Methods for the Examination of Water and Sewage 9th Edition APHA, Inc. New York, 1960 Standard Methods for the examination of Dairy Products. 9th Edition 152 : 1948 PRESENTACION No. Cat. 1048 1048-E 1048-A 1048-B Deshidratado 1000 g Deshidratado 500 g Deshidratado 500 g Deshidratado 100 g No. Cat. 1048-TM 1048-TMP 1048-TMC 1048-TMCP Preparado tubo 16x125 mm individual Preparado paquete con 10 tubos Preparado tubo 16x125 mm individual con campana Preparado paquete con 10 tubos con campana DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. 3