Flora normal del cuerpo Objetivos • Determinar la importancia de la flora normal del cuerpo. • Describir algunos ejemplos de organismos que forman parte de la flora normal. • Aislar microorganismos del cuello, orejas, garganta y codo, utilizando medios de cultivo diferenciales y selectivos. Flora Normal Grupo de microorganismos mayormente comensales con un rol muy importante en la supervivencia de los humanos. Beneficios de la flora normal o microbiota 1. Provee factores de crecimiento esenciales 2. Protege contra infecciones de microorganismos altamente virulentos 3. Estimula las respuestas inmunes Factores que determinan el tipo de microbiota 1. 2. 3. 4. 5. Edad Dieta Estado hormonal Salud Higiene La piel: Contiene una flora normal que normalmente no causan enfermedades. v Dos tipos: v Microbiota residente v Microbiota transitoria (horas a meses) v Bacterias en células muertas o asociadas a glándulas de sudor u otras glándulas de la piel. La piel v Es un ambiente desfavorable para los microorganismos v Tiene periodos secos y con poca humedad v Es un poco ácida (secreciones y producción de ácido por algunas bacterias v Alta concentración de NaCl (sudor) à ambiente de estrés osmótico. v Secreciones de inhibidores lisozima (enzima que causa lisis a S. epidermidis) Flora Normal de la Piel v Algunos de los organismos que podrían formar parte de la microbiota de la piel son: v Bacterias gram - en lugares húmedos de la piel. v Staphylococcus spp. v Levaduras y hongos. v Ej.Candida albicans Entradas de patógenos al cuerpo Flora normal Piel Staphylococcus epidermis Micrococcus sp. Staphylococcus aureus Staphylococcus mutans Corynebacteria Pitrosporum ovale Staphylococcus spp. v Bacteria Gram + 27 especies y su mayoría son flora del ser humano. Las pruebas clínica para Staphylococcus son para separar éste género de otras Gram + v Especies de importancia clínica: Staphylococcus aureus * Puede aislarse de la piel y mucosas. Flora de la piel, nariz y perineo Causa impétigo, “scaled skin syndrome” y síndrome de choque tóxico S. aureus Staphylococcus epidermis Parte de la microbiota de la piel. Causa la mayoría de la endocarditis de válvulas artificiales Puede causar infección como oportunista Staphylococcus saprophyticus Puede causar infección urinaria, mayormente en mujeres jóvenes sexualmente activas. Técnica de Aislamiento de Piel Hisopado del área afectada Inocular en Mannitol Salt Agar Incubación a 37°C por 24 horas Selección y purificación de colonias positivas Positivo Flora normal de la garganta v El tracto respiratorio superior incluye boca, cavidad nasal, nasofaringe y garganta. v El tracto respiratorio inferior incluye traquea y pulmones. v Están protegidos de infecciones por la mucosa y la saliva. v A través de la nariz los microorganismos entran a nuestro sistema y algunos son expulsados por los cilios y por la mucosa, otros llegan a ser residentes. v La garganta es un ambiente caliente y húmedo, permitiendo que algunas bacterias se establezcan, pero el crecimiento de la microbiota suprime el crecimiento de otros microorganismos. v Ejemplos: v Streptococcus, Neisseria, Staphylococcus y Haemophilus se pueden encontrar como microbiota normal. ü Streptococcus spp. son las que predominan. Streptococcus spp. • Cocos gram + con arreglo en cadena. • Flora normal de piel, boca, intestino y aparato respiratorio • Aerotolerantes, no requieren de O2 para crecer • Identificados mediante su patrón de hemólisis • Se caracterizan por su resistencia a químicos y factores físicos. • Se pueden aislar en garganta y área nasofaringeal a S. pyogenes, S. salvarius y S. mutans. Hemolisis Beta, Alfa y Gamma (observar propiedades hemolíticas) Aislamiento v Muestra: Hisopado Faríngeo v Medio de Cultivo : Agar Sangre al 5% v Incubación a 37°C por 24 a 48 horas en aerobiosis o anaerobiosis MacConkey Agar • Medio selectivo y diferencial para la detección y aislamiento de microorganismos Gram – • Lactosa-­‐ carbohidrato fermentable (agente diferencial) • Bacilos entéricos que fermentan la lactosa de los que no la fermentan • Sales biliares y Cristal violeta-­‐ inhiben crecimiento de Gram + • “Neutral Red”-­‐ indicador de pH MacConkey Agar Bile Esculin Agar • Medio selectivo y diferencial para aislar e identificar miembros del género Enterococcus. • Diferenciar principalmente miembros de Enterococcus (+) de Streptococcus (-­‐). • Extracto de Carne-­‐ fuente de nutrientes • Oxgall (sales biliares)-­‐ componente selectivo. • Inhibe otros Gram + • Esculina-­‐ componente diferencial • Citrato férrico-­‐ indicador de hidrólisis de esculina. Bile Esculin Agar Enterococcus faecalis Brain Heart Infusion Agar with NaCl • BHI-­‐ medio en el que pueden crecer variedad de microorganismos. • Bacterias, hongos y levaduras. • Peptona e infusiones-­‐ fuente de nutrientes • Dextrosa-­‐ carbohidrato fermentable • Al añadirle sal lo hacemos selectivo a microorganismos que toleren grandes concentraciones de sal. Práctica v Cinco estudiantes se tomarán una muestra de alguna parte del cuerpo utilizando un swab: • Garganta, cuello, codo, oreja v Cada uno inocularán una placa en un medio de cultivo distinto selectivo y / o diferencial: • McConkey, MSA(Mannitol Salt Agar), BHI(Brain Heart Infussion), Diagrama Swab garganta, cuello, codo, oreja McConkey EMB MSA BHI 6.5%Nacl 37°C Recapitulación • ¿Cuál es la función de la flora normal del cuerpo? • ¿Cuál es la función de la piel? • ¿Qué tipos de bacterias habitan en la piel? • ¿Qué protege a la garganta y nariz de bacterias patógenas? • ¿Qué bacterias encontramos en la garganta?