Laboratorio de Toxicología Forense El laboratorio de toxicología forense debe dar respuesta a una gran variedad de determinaciones solicitadas en el marco de la investigación judicial. Esta tarea resulta sumamente compleja, sobre todo por la cantidad de sustancias potencialmente toxicas y también por la diversidad de muestras a analizar. Dependiendo, de la naturaleza y la concentración de la sustancia buscada, de las características de la muestra, del tipo de análisis, será el procedimiento analítico empleado, para lo cual es fundamental contar con recursos tecnológicos y humanos apropiados. De la misma forma es necesario efectuar una adecuada actualización del equipamiento de los laboratorios para poder satisfacer las numerosas y cambiantes demandas de estudios toxicológicos, y poder adecuarlas a las recomendaciones efectuadas por organismos internacionales. Toxicologia “Ciencia que estudia las sustancias químicas y los agentes físicos en cuanto son capaces de producir alteraciones patológicas a los seres vivos, los mecanismos de producción de tales alteraciones y los medios para contrarrestarlos, así como los procedimientos para detectar, identificar y determinar tales agentes y valorar su grado de toxicidad” Repetto-2009 Concepto actual de tóxico: Sustancia que puede producir algún efecto nocivo sobre un ser vivo, alterando sus equilibrios vitales. Veneno: esa misma sustancia cuando su empleo es intencionado. Cualquier sustancia, ya sea endógena (propia del organismo) o exógena (xenobiótico) puede actuar como tóxico. Todo depende de la condición del sujeto, dosis, ambiente, etc. (Paracelso, siglo XVI: “Todo depende de la dosis”) A modo de ejemplo y a fin de comprender la complejidad de los estudios toxicológicos, mencionamos diferentes ramas de la toxicología: Toxicología clínica Toxicología industrial Toxicología ambiental Toxicología bromatológica y farmacéutica Toxicología forense Toxicología analítica Toxicología descriptiva Toxicología reglamentaria Debido a la variedad y complejidad de los estudios toxicológicos, muchas veces el laboratorio de toxicología forense no podrá dar respuesta al problema planteado, es por eso que en determinados casos será necesario recurrir a algún centro especializado, siendo lo recomendable realizar esa determinación en laboratorios de facultades o bien institutos dependientes de organismos estatales. Toxicología Forense La Toxicología Forense ha sido definida como "conjunto de conocimientos aplicables a la resolución de los problemas toxicológicos que plantea el Derecho" (Gisbert-Calabuig, 1958); es por tanto una Rama Aplicada de la Toxicología (Repetto, 1981 y 1997), íntimamente relacionada con la Química Analítica, a cuyo desarrollo ha contribuido, pero también ligada a la Bioquímica, la Farmacología y la Patología. Podríamos decir resumidamente que la Toxicología Forense corresponde al estudio y la práctica del uso de la toxicología a los propósitos de la ley. Sistemática analítica Toxicológica Al momento de comenzar a realizar un peritaje toxicológico, surgen los siguientes interrogantes: Que buscar? Donde buscar? Como efectuar la búsqueda? Para poder efectuar una determinación científica y racional es necesario contar con la mayor cantidad de datos posibles referidos a la muestra, a las condiciones particulares de la víctima y/o efecto, recordar que al laboratorio de toxicología llegan únicamente muestras y oficios con datos de la causa, no la causa completa. Para poder responder las preguntas antes planteadas se efectúa una sistemática analítica toxicológica, y en los casos en los que no se cuenta con ninguna orientación previa se realiza una “búsqueda toxicológica general” donde se aplican metodologías de búsqueda general o “screening” para abarcar el mayor número posible de sustancias tóxicas, pero se pierde “sensibilidad” en la búsqueda, es decir sustancias por debajo de cierto valor no serán detectadas por estas técnicas. En general los pasos a seguir son: Orientación- Datos Previos Búsqueda general Búsqueda específica Pretratamiento de las muestras Extracción/purificación Análisis instrumental Técnicas analíticas confirmatorias- cuantificación Es necesario aclarar que de no mediar indicación en la solicitud del peritaje, se realizará la búsqueda de compuestos de mayor relevancia toxicológica, por lo que si se desea realizar un análisis clínico de rutina como por ejemplo: “glucosa” éste no corresponde a una determinación de “rutina” en un laboratorio de toxicología, por lo que deberá consultarse, previamente al envío de las muestras, si el laboratorio en cuestión realiza dicha cuantificación y de ser así en que condiciones deberá ser remitida la muestra, o bien a que lugar se pude enviar la misma para su análisis. Ésto es fundamental para evitar demoras innecesarias o bien evitar el deterioro irreversible de la muestra y la imposibilidad de realizar el estudio solicitado. Determinaciones Toxicológicas Con motivo de ordenar los estudios y al solo fin de su comprensión podemos agrupar los análisis toxicológicos, de acuerdo al origen de las muestras en: 1. Muestras provenientes de sujetos vivos 2. Muestras postmortem 3. Efectos Determinaciones más comunes efectuadas en los diferentes casos 1. Muestras provenientes de sujetos vivos Consumo de sustancias prohibidas Seguimiento de tratamientos Intoxicaciones accidentales Intoxicaciones laborales Intoxicaciones Suicidas Estudios de contaminación ambiental 2. Muestras Postmortem a) En humanos Tóxicos inorgánicos: arsénico, plomo, mercurio, talio, cromo Tóxicos gaseosos: monóxido de carbono Tóxicos volátiles: etanol, metanol, acido cianhídrico Tóxicos orgánicos fijos: cocaína, anfetaminas, benzodiazepinas, antidepresivos, estricnina, barbitúricos, analgésicos, THC. plaguicidas: organoclorados, organofosforados, carbamatos. Estimación data de muerte (determinación de potasio en humor vítreo) b) En animales Plaguicidas Anticoagulantes (rodenticidas warfarínicos) 3. Efectos Medicamentos Mercaderías, alimentos, solventes Rastros: jeringas, manchas, etc. Contaminantes ambientales Análisis de restos de deflagración en manos y ropas Dentro de este último grupo (efectos) incluiremos la parte referida a la química legal sobre todo al análisis de tintas de documentos Como se puede observar, el número de determinaciones y su naturaleza es muy variado, por lo que no es el objetivo de la presente guía entrar en detalles técnicos referidos a cada una en particular, pero sí es necesario resaltar que existen numerosas técnicas, con diferentes características y las mismas poseen límites de detección propios de cada una, lo que en algunos casos puede llevar a situaciones particulares en las cuales, muestras analizadas por diferentes laboratorios arrojan resultados relativamente distintos. A fin de clarificar esto, es necesario siempre que se comparen resultados, conocer las técnicas analíticas que se han aplicado y la metodología utilizada. Por otra parte también merece la pena mencionar que en general, dependiendo del análisis, de la cantidad de muestra, del tipo de muestra, etc., el ensayo puede ser destructivo o puede alterar la muestra de forma tal de no poder realizarse nuevamente. Es por este motivo que se aconseja, frente a casos que no suelen ser determinaciones de rutina, efectuar la consulta previamente, acerca de la factibilidad de la realización del peritaje, las condiciones en que debe ser remitida la muestra, el tiempo transcurrido desde la toma de la misma y el análisis, y cualquier duda al respecto. Asimismo un dato importante es mantener las condiciones apropiadas en las que se envía la muestra, más específicamente la conservación de las mismas, recordar que el estado de putrefacción imposibilita (en general) la determinación de tóxicos. Variables que influyen en los resultados analíticos En ciertos casos se informan resultados de laboratorio que no son los “esperados”, es importante tener en cuenta las variables que afectan las determinaciones como ser: Momento de la toma de muestra. Tipo de muestra. Conservación de la muestra. Homogeneidad de la muestra. Concentración del analito en la muestra. Estabilidad del compuesto en la muestra. Método analítico empleado. Remisión de material objeto de peritaje Necesariamente para llegar a obtener resultados coherentes y para evitar un gasto innecesario de tiempo, de recursos humanos, de insumos y de dinero, se debería informar en la solicitud del peritaje los siguientes datos: Organismo que solicita el peritaje Oficio original, firmado por el Fiscal Carátula de la causa, número de IPP Antecedentes del caso Nombre y apellido de la víctima o imputado Informe de autopsia o historia clínica Puntos de pericia Datos de interés: tiempo del último consumo, ocupación, conductas, etc. Y respecto a la muestra, la misma debe estar en condiciones adecuadas, perfectamente etiquetada, con nombre, apellido, fecha y hora de la extracción. Elementos Importantes a considerar: - El examen toxicológico debe ser realizado por un toxicólogo experimentado - Mantener estrecha colaboración entre los peritos - En el diagnostico de intoxicación es fundamental la concordancia de los antecedentes preliminares, cuadro clínico, lesiones anatomopatológicas y la identificación del tóxico Debido a la cantidad actual de sustancias tóxicas y a la complejidad en su análisis, resultan de suma importancia los antecedentes que puedan aportarse al perito toxicólogo, datos que facilitarán la plena tarea de hallazgo, identificación y cuantificación del o los tóxicos involucrados.