Resistencia de insectos a cultivos Bt Conferencia presentada en la CIBIOGEM (Comisión Intersecretarial de Bioseguridad de los Organismos Genéticamente Modificados) Mexico, D.F., Diciembre 6, 2013 David Mota-Sanchez, PhD Department of Entomology Michigan State University East Lansing, MI48824 Temas 1. Introducción 2. Resistencia 3. Importancia de la dosis 4. Resistencia en campo Retos en la producción global de Alimentos • 2050 duplicar la producción. • Población. 9,200 millones • Usar menos combustible, agua y nitrogeno. • Aliviar la pobreza, hambre y desnutrición (7,000 millones de personas en el 2011) • Como: Incrementar la productividad por la integración de las mejoras tecnologías convencionales y de la biotecnología agrícola incluyendo nuevos eventos. Prepared by Cholani 2013 GE crops in North America 86% - 93% HT Canola in Canada (US 95% & Canada 83%) 80% - 85% US maize Of this, 75% double/triple stacked IR and HT (US & Canada 99%) HT Soybean (US 92% & Canada 73%) 95% HT Sugar beet in US and Canada Canada Canola, maize, soybean, sugar beet VR Papaya – saves the industry in the US VR Squash 90% US IR Cotton Of this, 75% double stacked HT Alfalfa Por que les gustan a los agricultores los cultivos OGMs Si se consideran cultivos Bt y tolerancia a herbicidas; • Evitan perdidas causadas por plagas y malezas. • Alto retorno por hectarea. • Reducción en el uso de plaguicidas y costos. • Facilita la producción (menor tiempo de uso del tractor) Prepared by Cholani 2013 Economic benefits of Bt cotton - India • Bt Cotton with 10.8 million hectares – 93% adoption • Ingresos por Bt Cotton • US$12,600 millones from 2002 2012 (US$3,200 millones solamente en el 2011) • Bt cotton-primero en productividad y ganancias – Segundo exportador mundial – Segundo productor mundial Bt cotton ha transformado la producción de algodón en la India!!! Toxicidad en mamiferos ratas Comparison of LD 50 value for insecticides Cyhalothrin 79-144 mg/kg Carbosulphan 90-250 mg/kg cypermethrin 250-2000 mg/kg Si se compara Bt con otros insecticidas el Bt algunas veces se clasifica “practicamente no toxico” – ¿Por que? -El intestino humano tiene un pH muy bajo -Humanos no tienen los receptores de Bt Bt kurstaki > 5,000-24,000 mg/kg Source: Chris DiFonzo Mode de acción de Bacillus thuringiensis 11. Disruptores microbiales de las membranas del intestino medio (incluyendo OGMs que producen toxinas de Bt). 11A. Making GE crops better…. Gene stacking Gene pyramiding Multiple targets Same target Roundup Ready Cry 1F Cry 1F Cry3Bb1 Cry 2Ab2 Cry 1A.105 Source: Chris DiFonso SMARTSTAX Herbicide Tolerance Corn Borer Rootworm RR-(CP4 EPSPS) ; Liberty link (PAT) Roundup Ready Liberty Link Cry 1A.105 Cry 2Ab2 Cry 1F Cry3Bb1 Cry 34 Ab1 Cry 35 Ab1 Source: Chris DiFonso Retos con los OGMs 1. Resistencia a los OGMs Desarrollo de resistencia de malezas a herbicidas (glifosato). Desarrollo de resistencia de insectos a cultivos Bt. 2. Plagas secundarias Estos problemas no son únicos a los OGMs. Muchas malezas e insectos han desarrolado resistencia a plaguicidas en el pasado. Estos problemas no son unicos a los OGMs. Muchas malezas e insectos han desarrollado resistencia a plaguicidas. Total. 991 especies of plagas • 583 especies de arthropodos • 218 especies de malezas • 190 hongos fitopatogenos • Fuente: FRAC 2013, Heap 2013, Whalon et al. 2013) Emergencia de malezas resistentes a glifosato Causa: Incremento en la presión de selección!!! 2008 Can insects become resistant to sprays? Melander 1914 >100 años Productos a base de azufre Escama de San Jose Quadraspidiotus perniciosus 10000 8000 600 A. 583 species B. 11,403 cases of resistance C. 342 compounds) A 500 B C 400 6000 300 4000 200 2000 100 Arthropod species (A) and compounds (C) Cases of resistance (B) 12000 0 1910 1920 1930 1940 1950 1960 1970 1980 1990 2000 2010 years 0 Fig 1. Evolution of arthropod insecticide resistance (1914 to 2013). Whalon, M.E., Mota-Sanchez, D. and Robert M. Hollingworth. 2013. Arthropod Pesticide Resistance Database 2013. On-line at: www.pesticideresistance.org Evolucion de resistencia en campo Reduccion en la susceptibilidad de una población a una toxina, y es causada por la exposición de esta población a la toxina en el campo. Esta resistencia es atribuible a un factor genético. (Tabashnik y otros) Mode de acción de Bacillus thuringiensis 11. Disruptores microbiales de las membranas del intestino medio (incluyendo OGMs que producen toxinas de Bt). 11A. Se ha desarrollado resistencia en el laboratorio y campo Barrenador europeo del maiz Palomilla dorso de diamante Resistencia (% de casos por modo de acción) Percentage of Cases by Mode of Action 1B Acetylcholine esterase inhibitors; Organophophates 1% 1% 2% 3% 3 Sodium channel modulators; Pyrethroids, Pyrethrins, DDT 1% 6% 34% 7% 2A GABA-gated chloride channel antagonists; Cyclodiene organochlorines 1A Acetylcholine esterase inhibitors; Carbamates 15% 4A Nicotinic Acetylcholine receptor agonists / antagonists; Neonicotinoids UNK Unknown Mode of Action (general); Undetermined MOA 30% 8B Compounds of unknown or non-specific mode of action (fumigants); Chloropicrin 11 Microbial disruptors of insect midgut membranes (includes transgenic crops); Bacillus thuringiensis (variety unstated) 2B GABA-gated chloride channel antagonists; Fipronil or Phenylpyrazoles Other 11. Disruptores microbiales de las membranas del intestino medio (incluyendo OGMs); B. thuringiensis (variedad no especificada). Bt toxinas Bt toxinas Bt ts CryIC Cry1Da BtkHD-1 MVP II BtHD73 Cry2Aa Cry1Ba Btk Cry1Ca Cry2Ab Cry1F Cry1Ab mCry3A Cry3Bb1 Bta Cry1Ac Btk = Bt kurstaki Bta= Bt aizawaii Bt ts = Bt tenebrionensis 1986 1989 1992 1995 1998 2001 2004 2007 2010 2013 año toxinas de Bt * año Monitoreo de resistencia. Bioensayos 1) Incorporadas a la dieta 2) Sobre la dieta 3) Tejido vegetal Log dosis mortalidad 98 S Tamps PR 90 6 80 70 60 50 40 5 30 20 Probits Mortalidad(%) 95 7 4 10 5 3 2 LC 50 S= 1 LC50= Tamps =3 LC50=PR 1200 Dosis Radio de resistencia= LC50 S/LC5p poblacion de campo RR= 1 RR Tamps =3 RR PR=1200 F2 Screen Expected to reveal 1 resistance allele among 250 isofemale lines, when the resistance allele frequency is 10-3 Andow and Alstad, 1997, J. Econ. Entomol. 91: 572-578 Carlos Blanco et al several publications Importancia de la dosis Importancia de la dosis 98 SS SR RR 90 6 80 70 60 50 40 5 30 20 Probits Mortalidad(%) 95 7 4 10 5 3 2 Dosis R=Resistente S=Susceptible Importancia de la dosis Mortalidad(%) 95 SS SR RR 7 R=Resistente S=Susceptible 90 6 80 70 60 50 40 5 30 20 Probits 98 4 10 5 3 2 Dosis Redibujado de Hutchison et a. 2013 Concentracion de la toxina Importancia de la dosis 98 SS SR RR R=Resistente S=Susceptible 90 6 80 70 60 50 40 5 30 20 Probits Mortalidad(%) 95 7 4 10 5 3 2 Dosis Dosis alta: La resistencia es funcionalmente recesiva Concentracion de la toxina Redibujado de Hutchison et a. 2013 Heterozigotos son los mas abundantes (~50%) 98 SR RR R=Resistente S=Susceptible 90 6 80 70 60 50 40 5 30 20 Probits Mortalidad(%) 95 SS 7 4 10 5 Concentracion de 3 la toxina 2 Dosis Dosis alta: Resistencia es funcionalmente recesiva Dosis baja: Incrementa la seleccion de insectos que portan R Redibujado de Hutchison et a. 2013 Heterozigotos son los mas abundantes (~50%) 98 SR RR R=Resistente S=Susceptible 90 6 80 70 60 50 40 5 30 20 Probits Mortalidad(%) 95 SS 7 4 10 5 3 2 Dosis Concentracion de la toxina Dosis alta: Resistencia es funcionalmente recesiva Dosis baja: Incrementa la seleccion de insectos que portan R Redibujado de Hutchison et a. 2013 Table 1. Evaluacion de resistencia en campo en cultivos Bt Plaga B. fusca D. v. virgifera Cultivo Bt Toxina Maíz Cry1Ab Cry3Bb USA 7 No No Algodón Cry1Ac USA 6 No No P. gossypiella Algodón Cry1Ac India 6 No ? S. frugiperda USA 3 No ? H. zea Maíz Dosis País Años alta Freq inicial Sudafrica 8 No ? Maíz Cry1F >50% insectos resistentes y se observa una reduccion en la eficacia Modificado de Tabashnik et al. 2013 Nature biotechnology 31 (6): 510-521 2005 2010 Reduced efficacy 1–6% resistant <1% resistant Susceptible Figure 3 Resistance of major pest species to Bt crops in 2005 and 2010. For each pest species, the color indicates the status of the most resistant population. In 2005, the only pest with resistant field populations was H. zea; the other eight pests evaluated were susceptible. Data for 2005 (n = 9 species) Nature biotechnology 31 (6): 510-521. Resistencia de diabrotica a Maiz Bt Perdidas inesperadas 2009 ñ Picture from Dr. Ken Ostlie, Univ of Minnesota Minnesota field 2009 - Cry3Bb / Refuge strips CRW Bt Rows Doblados 35% Refuge Rows Doblados < 1% Ken Ostlie, Univ. of Minnesota refugio refuge CRW Bt Ken Ostlie, Univ. of Minnesota Factores: Ken Ostlie • Siembra continua de maiz • Uso de solo un tipo de BT-corn • No cumplimiento del refugio En 2012: Numero de casos sospechosos se incremento y distribuyo en 6 estados del Medio Oeste: IA, MN + MO, NE, SD, WI Collecta de huevecillos Iowa State University Bioensayos de resistencia Infestacion de plantas (huevecillos) Recuperacion & conteo larvae Pictures courtesy of A. Gassmann, ISU Resistance en gusano cogollero • • • • Menos sensible a Cry1F Aislamiento geografico Sitio de refugio Sequia. Migracion. Storer et al. 2010. J. Econ. Entomol. 103(4): 1031Ð1038 (2010) Blanco et al 2010. Southwestern Entomologist 35 (3). Conclusiónes 1) Muy pocos casos de resistencia desde 1996 a la fecha (420 millones ha). 2) El sitio de refugio es muy importante para retrazar el desarrollo de resistencia, y se debe poner un enfasis en el cumplimiento. 3) La determinacion de la frequencia initialde alelos de resistencia asi como un monitoreo constante de la resistencia es critico para el uso sostenido de esta tecnología. 3) Se deben diversificar los factores de mortalidad de las plagas. Agradecimientos CIBIOGEM Marco Antonio Ramírez Velázquez Rosa Inés González-Torres Sol Ortiz García USDA-FAS Adriana Otero, Khalika Meardry, Adam Branson y Julie Morin Department of State-Office of Science and Technology Cooperation. Kay Hairston SENASICA Marco Antonio Cervantes García WorldTAP team (Michigan State University) Karim Maredia, Hashini Galhena, Cholani Weebadde Questions?