Resultados 3 - arriazu agro srl

7.3. Estudios microbiológicos
Con el propósito de estudiar el posible efecto fungistático o bacteriostático in vitro de los
fosfitos sobre cultivos de hongos y bacterias, respectivamente, todos ellos patógenas de la
papa, medios de cultivos con aislamientos de Phytophthora infestans, Fusarium eumartti,
Rhizoctonia solani, Streptomyces scabies y Erwinia caratovora, fueron adicionados con Fosfitos
de K, Fosfito de Ca o Fosfito de Cu a concentraciones equivalentes a las dosis utilizadas en
ensayos en plantas, tales como 2 y 3 lts ha-1, una dosis 10 veces mayor ( 30 lts.ha-1) y 10 veces
menor (300 ml.ha-1).
Los cultivos fueron incubados a las condiciones óptimas para el
crecimiento de cada aislamiento patogénico.
En la Fig. 36 se observan 3 sets de cajas de Petri, cada uno corresponde a un patógeno fúngico
específico (P. infestans, F. eumartii o R. solani). Sobre la línea izquierda de cada set de
patógeno se encuentra el cultivo control sin adición de fosfito, estas cajas muestran el mayor
crecimiento de cada colonia.
Si analizamos individualmente cada cultivo con respecto al efecto de los fosfitos podemos
concluir que:
Ø P. infestans, es inhibida por el Fosfito de K y Fosfito de Ca en un 100% a las dosis de 2 y
3 lts/ha-1. A las dosis menor inhibe un 70% el Fosfito de K y con un menor efecto el Fosfito de
Ca (50% de inhibición)
Ø F. eumartii, es inhibida por el Fosfito de K, Fosfito de Ca y Fosfito de Cu en un 100% a las
dosis de 30 lts.ha-1 y a la dosis de 3 y 2 lts.ha-1 por el Fosfito de Cu. El Fosfito de Ca inhibe un
80 y 50 % a las dosis de 3 y 2 lts.ha-1, respectivamente. El Fosfito de K muestra menor efecto
inhibitorio que el Fosfito de Ca a las mismas concentraciones (30% de inhibición). La dosis
menor 300 ml.ha-1 no tiene efecto inhibitorio.
Ø R. solani, es inhibida por el Fosfito de K, Fosfito de Ca y Fosfito de Cu en un 100% a las
dosis de 30 lts.ha-1 y a la dosis de 3 y 2 lts.ha-1 por el Fosfito de Cu. El Fosfito de Ca inhibe un
80 y 50 % a las dosis de 3 y 2 lts.ha-1, respectivamente. El Fosfito de K muestra menor efecto
inhibitorio que el Fosfito de Ca a las mismas concentraciones (50% de inhibición). La dosis
menor 300 ml.ha-1 no tiene efecto inhibitorio.
Por lo tanto, los fosfitos poseen actividad fungistática a la dosis utilizada en plantas, 3 lts.ha-1,
con mayor efecto sobre P. infestans, y menor efecto sobre F. eumartii y R. solani.
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Fusarium eumartii
Phytophthora infestans
PhiCa
PhiK
Control 3 l/ha 2 l/ha 300 ml/ha
PhiCu
Control
10 X
1X
2:3 X
1:10 X
Control 30 l/ha 3 l/ha 2 l/ha 300 ml/ha
PhiCa
PhiK
1:50 X
1:100 X
1:200 X
PhiCu
Control
10 X
1X
2:3 X
1:10 X
Rhizoctonia solani
Fig 36. Efecto inhibitorio de compuestos Fosfitos sobre el crecimiento de hongos
patógenos de papa in vitro
Con respecto al efecto bactericida, medios de cultivo líquido fueron adicionados con los
diferentes Fosfitos y se midió la curva de crecimiento exponencial de cada bacteria en cultivos
control, sin Fosfitos y en cultivos con Fosfitos de K o Fosfito de Ca o Fosfito de Cu. También se
realizaron curvas de pH, esto significa que el medio de cultivo fue llevado al pH de cada
concentración de Fosfito de K, Ca o Cu, sin adicionar Fosfitos a los fines de probar si el efecto
de los Fosfitos fuera por el pH en el medio de cultivo o por el Fosfito en sí mismo.
El Ph de cada fosfito se determinó en:
v Phi K, 3 lts ha-1= 5,8
v PhiK, 2 lts ha-1= 5,9
v PhiCa, 3 lts ha-1= 5,3
v PhiCa, 2 lts ha-1= 5,6
v PhiCu, 3 lts ha-= 1,5
v PhiCu, 2 lts ha-1= 1,7
La Fig. 37 muestra que le Fosfito de Cu inhibe en un 100 % el crecimiento de la bacteria
Streptomyces scabies. El Fosfito de K y Fosfito de Ca a la dosis de 3 y 2 lts.ha-1 inhiben entre un
70 y 80% el crecimiento de la bacteria.
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El grafico de la curva de pH indica que en el rango de pH que se encuentran los Fosfitos de K y
Ca a las dosis utilizadas (5,8-5,3), el pH solo es responsable de un 20% de inhibición del
crecimiento bacterial. Sin embargo un pH de 2,6 inhibe totalmente el crecimiento Streptomyces
scabies. En consecuencia, el efecto 100% inhibitorio del Fosfito de Cu se debe a su pH (1,51,7)
5
Control
OD (600 nm)
4
PhiK 3 l.ha
PhiK 2 l.ha
3
PhiCa 3 l.ha
PhiCa 2 l.ha
2
PhiCu 3 l.ha
1
PhiCu 2 l.ha
0
0
2
4
6
8
10
12
Tiempo (hs)
pH
5
2,6
OD (600 nm)
4
5
5,6
3
6,3
2
Control
1
0
0
2
4
6
8
10
12
Tiempo (hs)
Fig. 37. Efecto inhibitorio de compuestos Fosfitos sobre el crecimiento de Streptomyces
scabies, bacterias patógena de papa in vitro
La Fig. 38 muestra que le Fosfito de Cu inhibe en un 100 % el crecimiento de la bacteria
Erwinia caratovora. El Fosfito de K y Fosfito de Ca a la dosis de 3 y 2 lts.ha-1 inhiben un 70 %
el crecimiento de la bacteria.
El grafico de la curva de pH indica que en el rango de pH que se encuentran los Fosfitos de K y
Ca a las dosis utilizadas (5,8-5,3), no inhibe el crecimiento de Erwinia caratovora.
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3
Control
PhiK 3 l.ha
PhiK 2 l.ha
PH: 5,6
PhiCa 3 l.ha
PhiCa 2 l.ha
Phi Cu 3 l.ha
PhiCu 2 l.ha
PH: 5
OD (600 nm)
2,5
2
1,5
1
0,5
0
0
2
4
6
8
10
12
14
Tiempo (hs)
pH
3
5
OD (600 nm)
2,5
5,6
2
6,3
1,5
Control
1
0,5
0
0
2
4
6
8
10
Tiempo (hs)
12
14
16
Fig. 38. Efecto inhibitorio de compuestos Fosfitos sobre el crecimiento de Erwinia caratovora,
bacterias patógena de papa in vitro
Por ultimo, se comparó el efecto inhibitorio in vitro del Fosfito de K, Fosfito de Ca y Fosfito de
Cu con respecto a funguicidas comerciales específicos para cada patógeno, a las dosis
comerciales recomendadas. En la Fig. 39 podemos observar que el para P. infestans el Fosfito
de K y Fosfito de Ca que poseen el mismo efecto inhibitorio que el fungicida comercial, y que a
dosis menores decae dicha actividad. Para Fusarium el Fosfito de Ca posee un efecto inhitorio
del 60% a la dosis 3 lts.ha-1 y el Fosfito de K un 20%. Para Rhizoctonia, el fosfito de Ca inhibe
un 80% y el Fosfito de K un 50%.
El Fosfito de Cu inhibe un 100 % a las dosis de 3 y 2 lts.ha-1 para los tres patógenos.
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Phytophthora
Inhibición (%)
100
CaPhi
KPhi
Acrobat
80
60
40
Fusarium
20
100
CaPhi
KPhi
CuPhi
Maxim
Vitavax
10,00
1,00
0,10
0,01
0,00
Concentración (log)
Rhizoctonia
80
60
40
20
100
Inhibición (%)
Inhibición (%)
0
0
CaPhi
KPhi
CuPhi
Celest
80
60
10,00
1,00
0,10
0,00
Concentración (log)
40
Dosis equivalentes
20
10,00: 30 lts/ha
1,0: 3 lts/ha
0
10,00
0,01
1,00
0,10
0,01
0,00
0,10: 30 ml/ha
0,01: 3000 ml/ha
Concentración (log)
Fig. 39. Efecto inhibitorio in vitro de Fosfitos comparado con fungicidas comerciales a las
dosis recomendadas en el mercado
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