DEL DNA HASTA LA PROTEINA ¿Qué es la transcripción? SINTESIS DE ARN ARN policistrónico= varios polipéptidos Transcripción y traducción acoplados ARN polimerasa única ARN monocistrónico= único polipéptido Transcripción y procesamiento acoplados 3 ARN polimerasas diferentes CARACTERISTICAS DE LA TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTA Proceso conservativo (ADN usado conserva intacto) y selectivo (usa parte de información genética), selecciona gen y cadena transcribir Independiente del ciclo celular Estrictamente regulado Unidireccional 5 3 Usa RNA polimerasas y FT ARN POLIMERASAS EUCARIOTAS ETAPA DE INICIO SECUENCIAS CONSENSO DE INICIO DE LA TRANSCRIPCION Core promotor: mínima región continua de DNA suficiente para dirigir la iniciación precisa de la trascripción Reconocimiento del promotor: factores generales de transcripción Promotores de regulación ENHANCER: secuencias del encendido de la transcripción FENOMENOS MOLECULARES PREVIOS 1º Cromatina de secuencia promotora accesible 2º Factor de transcripción deben unirse a promotor 3º Secuencias cercanas a promotor a las q se unen factores proteicos y estimulan la transcripción FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN ACTIVACIÓN DEL COMPLEJO DE INICIACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN Requiere de: ENSAMBLAJE DEL COMPLEJO DE INICIACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN Eventos en la iniciación: 1) TFIID: subunidad TBP: en la región de TATA Box del DNA y TAFs 2) TFIIB que asegura posicionamiento correcto de RNA pol II 3) Uniones de TFII E y TFII H y RNA pol II unida + TFIIF 4) TFII H: helicasa 5) TFIIH: quinasa fosforilación CTD de RNA pol II libera del promotor y estable complejo transcripción estable. CTD=Dominio carboxilo terminal con 52 repeticiones ricas de aa Ser y Thr en humanos. ETAPA DE ELONGACION ADICION DEL CAP Sintetizados 30 nt Fosfatasa elimina grupo fosfato 5 RNA naciente Guanidil transferasa añade G a 5’ del RNA unión 5’-5’ Guanosina transferasa añade grupo metilo a guanina posición 7 REACCION DE MADURACION DEL RNA Ensamblado secuencial de partículas riboproteícas (SNURPs) Apareamiento de bases con el mRNA Corte y empalme Liberación del intrón SECUENCIAS CONSENSO DE NUCLEOTIDOS QUE INDICAN EL INICIO Y TERMINO DEL SPLICING MECANISMO DE SPLICING REORDENAMIENTOS EN EL SPLICEOSOMA ETAPA DE TERMINO TERMINO DE LA TRANSCRIPCION CPSF= factor de especificidad de escisión y poliadenilación y estimulador de clivaje o escisión. CstF= factor • Endonucleasa : CFI y CFII Clivaje para generar nuevo 3’ • Poly A polimerasa (PAP) : RNA polimerasa independiente de molde Cola de poly A (~250 A)