1. 2. 3. 4. Introducción Formas acelulares: los virus, viroides y priones Los procariotas: bacterias, cianofíceas y micoplasmas Métodos y técnicas microbiológicas 1. Introducción Diversidad y Clasificación Desde que Pasteur demostró experimentalmente que la generación espontánea era falsa y que existían multitud de seres microscópicos flotando en el aire, comenzó la ciencia de la microbiología, es decir la ciencia que estudia los microbios, que solo pueden verse con el uso del microscopio, ya sea óptico o electrónico. Los microorganismos se encuentran dentro de tres de los cinco reinos de la naturaleza: Moneras............ Bacterias, Cianofíceas y micoplasmas. Protoctistas....... Algas unicelulares y Protozoos Hongos............. Levaduras y Mohos Fuera de los reinos también se incluye el estudio de los Virus, viroides y priones que son formas acelulares. Protoctistas Los organismos pertenecientes a este reino son eucariotas unicelulares, como algunas algas y todos los protozoos. Las algas se clasifican según el tipo de pigmento, y en conjunto las englobaríamos dentro de lo que se conoce con el nombre de fitoplancton. Estos son los principales productores en los ecosistemas acuáticos. Los protozoos se consideran como el origen de los primeros animales. Su clasificación se realiza atendiendo a su tipo de locomoción. Flagelados, Ciliados, Rizópodos y Esporozoos (parásitos) 1 Hongos Son organismos heterótrofos saprofitos, que gracias al proceso de descomposición que realizan, al igual que muchas bacterias, permiten reciclar la materia orgánica muerta para una posterior utilización por los productores. De interés microbiológico cabe destacar a los mohos y las levaduras. Los mohos forman filamentos denominados hifas y se reproducen formando esporas. Los más conocidos son el moho del pan (Rhizopus) y el productor de la penicilina (Penicillium). Las levaduras son unicelulares y se reproducen por gemación. Son utilizadas en procesos fermentativos como Saccharomyces cerevisiae en la fermentación alcohólica. 2 2. Formas acelulares: los virus, viroides y priones VIRUS: Características generales: o o o o o o o o Son formas acelulares Formados por un ácido nucleico y proteínas A veces llevan envoltura Carecen de metabolismo No se nutren ni se relacionan Parásitos obligados de células vivas (fuera de la célula se denominan viriones) Tamaño menor que las bacterias (sólo 0,25 Están especializados en atacar a un solo tipo de células Estructura o Levan ADN o ARN, nunca los dos juntos o Una cubierta proteica, la CÁPSIDE, formada por proteínas globulares, los capsómeros. La cápside puede ser helicoidal o icosaédrica. o Pueden llevar envolturas externas similares a las membranas de las células, así como estructuras especiales que facilitan su infección. Clasificación HELICOIDALES: TMV (ARN desnudo), rabia (ADN desnudo), viruela (ADN envoltura). POLIÉDRICOS: Polio (ARN desnudo), SIDA (ARN envoltura), Herpes labial( ADN envoltura) MIXTOS: Bacteriófagos (siempre desnudos) Ciclo vital de un virus Comprende las siguientes fases: 1. Fijación: Es el contacto con la célula huésped. Varia según el tipo de virus. 2. Penetración: Lo normal es por un proceso de endocitosis, pero los bacteriófagos rompen la pared y sólo penetra su Ácido nucleico. 3. Eclipse: Una vez que el Ácido nucleico está en el interior de la célula pueden ocurrir dos procesos: Ciclo lisogénico: El Ácido nucleico de virus se une al ADN celular. En este momento al 3 virus se le denomina profago o virus atenuados, y a la célula que lo lleva lisógena. Este ácido nucleico permanece latente y va pasando de generación en generación al mismo tiempo que la célula se divide. Un estímulo externo puede hacer que se separe y comience el ciclo lítico. Ciclo lítico: El ácido nucleico vírico sintetiza ARNm que se traducirá para formar los capsómeros, y se duplicará formando muchas copias de sí mismo. 4. Ensamblaje: El ácido nucleico se une a los capsómeros, formando el virus. 5. Salida: En animales y vegetales por exocitosis. Los bacteriófagos producen la lisis. VIROIDES: son pequeñas moléculas de ARN circular de cadena simple que se localizan en el núcleo de las células a las que infectan. Principalmente infectan a vegetales como los cítricos y la patata. PRIONES: son proteínas infecciosas, que modifican a otras proteínas sanas convirtiéndolas en infecciosas. Un ejemplo es la que produce la enfermedad de las vacas locas o encefalopatía espogiforme bovina 3. Los procariotas: bacterias, cianofíceas y micoplasmas a. BACTERIAS Las bacterias tienen un tamaño de entre 1,3 a 10 . Se clasifican por su forma externa en: cocos, bacilos, espirilos y vibrios (solitarios) y estreptococos, estreptobacilos, estafilococos, estafilobacilos y sarcinas. 4 En una bacteria podemos distinguir las siguientes estructuras: Membrana plasmática Mesosoma Pared celular Cápsula Ribosomas Inclusiones Moléculas de ADN Flagelos Pili Las bacterias como el resto de los seres vivos realizan las tres funciones fisiológicas: 1. Función de nutrición Realizan todo tipo de metabolismo existente, además de existir las aerobias y las anaerobias tanto estrictas como facultativas. 2. Función de relación Son capaces de reaccionar al medio mediante movimientos, de reptación contracción dilatación y por flagelos, y formar esporas de resistencia ante las condiciones desfavorables. 3. Función de reproducción El modo normal de reproducción bacteriana es la bipartición. Es un proceso muy rápido ya que a partir de una bacteria, se obtienen 250.000 en tan solo 14 horas. Todas las bacterias que se obtienen son idénticas. Existen unas formas de que las bacterias reciban información genética de otras bacterias, es lo que se conoce como reproducción parasexual. Este es un proceso horizontal, ya que la información se transmite dentro de la misma generación. Hay tres formas: Conjugación, en la que la información pasa a través de los pili desde una bacteria donadora a una receptora. Transducción, en la que el material se transmite a través de virus. 5 Transformación, en la que la bacteria introduce fragmentos de ADN del medio. La existencia de estos procesos explica la gran variabilidad y poder de adaptación al medio, que pueden presentar las bacterias, como por ejemplo la resistencia a los antibióticos. b. MICOPLASMAS Tienen un tamaño menor que el de las bacterias, 0,2 No poseen pared, por lo que pueden cambiar de forma. Su ADN es doble y lineal. Son causantes de enfermedades. c. CIANOBACTERIAS También denominadas algas azules. Viven aisladas o en colonias unidas mediante una vaina viscosa. Se encuentran flotando en las aguas de ríos y mares. Poseen membranas internas de forma radial, los cromatóforos, en los que se encuentran los pigmentos fotosintéticos (Clorofilas, Carotenoides, Ficocianina y Ficoeritrina). No tienen flagelos, se reproducen por bipartición y algunas son capaces de fijar el nitrógeno atmosférico. 4. Métodos y técnica microbiológicas Para su estudio los microorganismos deben aislarse. Esto se consigue sembrando la mezcla de microorganismos en un medio de cultivo en una placa en la que se desarrollaran los microorganismos formando colonias. Se tomará una muestra de la colonia que nos interese y se volverá a sembrar en otro medio de cultivo que favorezca el crecimiento en mayor medida este microorganismo. Para el análisis e identificación de microorganismos se utilizan diversas técnicas como las tinciones. Cabe destacar la tinción simple con colorante azul de metileno, que colorea todas las bacterias y que se utiliza para poder conocer su forma a través del microscopio óptico. Otra tinción interesante es la GRAM que nos permite distinguir a las bacterias según su tipo de pared celular. Es importante señalar que el material debe estar esterilizado. Los métodos más utilizados son el calor húmedo con autoclave y el calor seco en horno Pasteur. También son utilizados diversos métodos químicos, así como por radiaciones, este último utilizado para mantener estériles recintos cerrados como salas de operaciones. 6