(2<j) N U E V O S PROTOZOOS PARÁSITOS 221 preferencia absoluta ai GIEMSA, q u e p r a c t i c a m o s siempre, utilizando alguna v e z el LEISHMANN á título de rápido y e x p e d i t i v o . Nunca nos c a n s a r e m o s de repetir las e x c e l e n c i a s del primero. Si queremos estudiar la distribución del LeisMnania en el interior de los órganos, c o r t a r e m o s p e q u e ñ o s b l o q u e s que, fijados y endurecidos p o r los p r o c e d i m i e n t o s clásicos (formol, alcohol, etcétera), serán s o m e t i d o s á la encastración parafínica y cortados en tenues laminillas de c i n c o mieras de grosor. L a tinción se hará por los m é t o d o s anteriores ó por el violeta de g e n c i a n a ( W E I GERT), azul alcalino (LOEFFLER), azul fenicado (KUHNE), Ó la doble coloración (GRAM y eosina) ó por la triple (GRAM, ácido pícrico y picrocarmín de ORTH), etc., etc. V El Leishmania infantum es difícilmente cultivable y requiere siempre medios especiales. E l agar común, el glicerinado, a g a r ascitis, agar preparado con caldo de bazo de perro, agar de N i COLLE, caldo c o m ú n , caldo glicerinado, caldo de bazo, etc., han sido utilizados sin o b t e n e r resultados favorables. ROGERS, de Calcutta, consiguió por primera vez el cultivo, utilizando la sangre esplénica citratada. LONGO, de Catania, reprodujo en seguida el e x p e r i m e n t o , y l o mismo LEISHMANN, MACKENSIE, CHRISTOPHERS y STATHAN, y r e c i e n t e m e n t e Di CRISTINA y CANNATA sembraron en sangre d e conejo adicionada con citrato de sosa y colocada en matraces de anaerobios. PONSELLE, en 1 9 1 3 , r e c o m i e n d a una mezcla, á partes iguales, d e sangre desfibrinada de conejo y el agar siguiente: Gelosa no lavada Agua r. 20 gramos. 1.000 c e . MATHIS mezcla una parte de agar nutritivo á una ó dos de sangre desfibrinada de caballo ó b u e y , calentando el conjunto varias O o veces á 7 5 ó media hora á 1 2 0 . Novv y MAC-NEAL, resolvieron el problema del cultivo de, los tripanosomas utilizando un medio nutritivo c o m p u e s t o de Mem, R. Soc. esp. Hist. nat., x, 1916.