12.3 APÉNDICE C Tinción Gram Se coloca una pequeña muestra de una colonia bacteriana en un porta-objetos, se fija al calor. Se añade una pequeña gota de cristal violeta durante un minuto, se lava. Se añade una gota de lugol durante un minuto, se lava. Se añade una gota de alcohol-cetona por 7 segundos, se lava y por último se cubre la muestra con safranina o fascina durante 1 minutos, se lava, se seca y se observa al microscopio. La tinción de color rosa corresponde a gram negativas, mientras que la tinción morada corresponde a gram positivas. Prueba oxidasa Se coloca la bacteria en una tira de papel Whatman No. 1 mojado de reactivo de Kovacks para la identificación de la oxidasa. La aparición de un color violeta intenso sobre las colonias en un minuto, indica resultados positivos. Prueba Catalasa Se hace una emulsión de una colonia con una gota de agua oxigenada (peróxido de hidrógeno) sobre un portaobjetos. Esta prueba es positiva si se observa la aparición de burbujas Prueba Ureasa Se siembra una colonia de la bacteria en caldo urea. La prueba es positiva cuando hay un cambio de color amarillo a rosado. Este cambio significa que hubo un cambio a pH alcalino por la producción de amoniaco a partir de la urea, a través de la ureasa.