Universidad de Pamplona Laboratorio de Bacteriología Manual de Funcionamiento Equipo: Microscopio Marca Motic 1. Objetivo Conocer el funcionamiento y manejo del microscopio 2. Descripción 1 2 17 3 16 15 13 6 4 10 11 12 7 8 5 4 14 18 Descripción de sus Partes: 1. Oculares: Están colocados en la parte inferior del tubo insertados en una pieza metálica, denominada revolver, que permite cambiarlos fácilmente. Generan una imagen real, invertida y aumentada. Los mas frecuentes son los de 4, 10, 40, y 100 aumentos. Este último se llama de inmersión ya que para su utilización se necesita utilizar aceite de cedro sobre la preparación. En la superficie de cada objetivo se indican sus características principales, aumento, apertura numérica, y llevan dibujado un anillo coloreado que indica el número de aumentos (rojo 4X, amarillo 10X, azul 40X y blanco 100X). 1. Tubo binocular: Es una cámara oscura unida al brazo mediante una cremallera. Tiene el revolver con los objetivos en su parte inferior y los oculares en el extremo superior 2. Brazo: Es una columna perpendicular al pie. Puede ser arqueado o vertical y une al pie con el tubo. 3. Botón Regulador: Regula la intensidad de iluminación. 4. Interruptor ON/OFF: Para encender o apagar el microscopio 5. Botón de enfoque mando micrométrico y macrométrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina hacia arriba y hacia abajo. El macrométrico lo hace de forma rápida y el micrométrico de forma lenta. Llevan incorporado un mando de bloqueo que fija la platina a una determinada altura. 6. Mando coaxial para desplazar la platina en dirección X 7. Mando coaxial para desplazar la platina en dirección y 8. Condensador y diafragma: El condensador es un sistema de lentes situadas bajo la platina su función es la de concentrar la luz generada por la fuente de iluminación hacia la preparación. En el interior del condensador existe un diafragma (iris) cuya función es limitar el haz de rayos que atraviesa el sistema de lentes eliminando los rayos demasiado desviados (regula la cantidad de luz y ajusta la Apertura Numérica). 9. Diafragma de campo luminoso 10. Porta condensador 11. Palanca para regular el diafragma de apertura 12. Tornillos para centrar el condensador 13. Fuente de iluminación: Se trata de una lámpara halógena de intensidad graduable. Esta situada en el pie del microscopio. Se enciende y se apaga con un interruptor y en su superficie externa puede tener una especie de anillo para colocar filtros que facilitan la visualización. 14. Platina: Donde se suspenden la laminilla porta objetos a observar. 15. Objetivos: Están colocados en la parte inferior del tubo insertados en una pieza metálica, denominada revolver, que permite cambiarlos fácilmente. Generan una imagen real, invertida y aumentada. Los mas frecuentes son los de 4, 10, 40, y 100 aumentos. Este último se llama de inmersión ya que para su utilización se necesita utilizar aceite de cedro sobre la preparación. En la superficie de cada objetivo se indican sus características principales, aumento, apertura numérica, y llevan dibujado un anillo coloreado que indica el número de aumentos (rojo 4X, amarillo 10X, azul 40X y blanco 100X). 16. Revolver: Es un sistema que coge los objetivos, y que rueda para utilizar un objetivo u otro. 17. Pinza: sostienen las láminas de porta objetos. 3. Funcionamiento 3.1 conectar el cable a la conexión eléctrica de 110 voltios 3.2 Accionar el interruptor (SWITCH), pruebe que la lámpara encienda, mueva de izquierda a derecha el regulador de intensidad de luz, y compruebe su funcionamiento. 3.3 Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas. 3.4 Comenzar la observación por medio de los oculares, con el objetivo de 4x (ya está en posición) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparación es de bacterias. 3.5 Para realizar el enfoque, utilice el tornillo micrométrico para acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación y cuando de observe algo nítida la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino. 3.6 Pasar al siguiente objetivo (40X) La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo de 10X 3.7 Empleo del objetivo de inmersión: 3.7.1 Bajar totalmente la platina. 3.7.2 Subir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habrá que echar el aceite. 3.7.3 Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino entre éste y el de x40. 3.7.4 Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre el círculo de luz. 3.7.5 Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de inmersión. 3.7.6 Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente. 3.7.7 Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersión y la preparación es mínima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande. 3.7.8 Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se mancharía de aceite. 3.8 Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento girando el revólver. En este momento ya se puede retirar la preparación de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersión en posición de observación. 3.9 Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial para óptica. Comprobar también que el objetivo 40x está perfectamente limpio