RECONOCIMIENTO DE ENFERMEDADES VIRALES DE PLATANO Y BANANO EN LA GRANJA MONTELINDO, MUNICIPIO DE PALESTINA (CALDAS) John Jairo Alarcón Restrepo, Centro Diagnóstico Vegetal ICA Manizales, carrera 30 No 65-15 John.alarcón@ica.gov.co INTRODUCCIÓN El plátano y el banano se cultivan en más de 120 países (FAO, 1992) y son una fuente valiosa de carbohidratos para más de 400 millones de personas en países tropicales (Swennen et al., 1995). En Colombia, se cultivan aproximadamente 400.000 ha en plátano ( la mayoría para consumo local) y 48.000 ha en banano Cavendish para exportación; el país es el segundo exportador de banano en América del sur, después del Ecuador (Belalcazar et al., 1998). El plátano es considerado uno de los principales cultivos de la zona cafetera central, la cual aporta cerca del 32% de la producción nacional. En esta zona se cultiva entre los 900 y 2000 m de altitud. Intercalado con café en un 81%, con otros cultivos en un 4% y como monocultivo en el 15% del área cultivada (Belalcazar et al., 1998). Las Sigatokas amarillas (Mycosphaerella musicola Leach) y negra (M. fijensis Morelet) y el Moko del plátano [Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al.] son las enfermedades más limitantes para la producción de plátano en la zona cafetera central; sin embargo, en los últimos años se han incrementado los reportes sobre ocurrencia de síntomas similares a los causados por enfermedades virales, lo cual constituye un problema potencial para el futuro del cultivo en la zona. De las enfermedades virales que afectan el género Musa (Mosaico de abacá, Mosaico de las brácteas del banano. Arrepollamiento de cogollos, Mosaico del banano y Rayado del banano), en Colombia se han reportado el virus del Mosaico del pepino (Cucumber mosaic cucumovirus - CMV), el virus del Rayado del banano (Banana streak badnavirus – BSV) y el virus del Mosaico de las brácteas del banano (Banana bract mosaic potyvirus - BBrMV) (Belalcazar et al., 1998). Las plantas atacadas por el CMV presentan clorosis, mosaico foliar, deformación de hojas, amarillamiento, pudrición del pseudotallo y necrosis de la hoja cigarro. Es más fácil observar los síntomas en las planta hijas, ya que los desarrollan rápidamente, algo que no ocurre en plantas mayores de 9 meses de edad. El BSV produce un rayado clorótico en las hojas, que posteriormente se torna necrótico. Inicialmente se forman rayas pequeñas y aisladas que adquieren distintas tonalidades desde amarilla pálida hasta anaranjada, por último se produce la necrosis (Lockhart, 1991). El BBrMV se asocia con la presencia de mosaicos de color café oscuro en las brácteas de la inflorescencia, el cual constituye el síntoma diferencial con respecto a otras enfermedades virales del banano. Los síntomas incluyen estrías de color verde o café rojizo ( dependiendo del cultivar) o lesiones fusiformes en los pecíolos de las hojas y una tendencia a la obstrucción foliar (Thomas et al., 1998). En un estudio previo, Escobar y Martínez (1997) describieron los síntomas de campo en plantas afectadas por CMV, BSV, BBTV y BBrMV, pero sin haber confirmado las observaciones de campo con pruebas de laboratorio; por tal razón el objetivo del presente trabajo fue determinar la presencia e incidencia mediante sintomatología y pruebas de ELISA de los virus BSV, CMV, BBrMV y el virus del Arrepollamiento del collogo (Banana Bunchy Top nanavirus - BBTV) en materiales de plátano y banano. MATERIALES Y MÉTODOS El reconocimiento se realizó en los lotes experimentales y en la colección de banano y plátano establecidos en la granja Montelindo de la Universidad de Caldas, municipio de Palestina (Caldas), Vereda Santágueda, latitud 5º 05’ N, longitud 75º 40’ O. La granja se encuentra a 1010 msnm, con temperatura promedio de 23ºC, precipitación anual de 1800 mm y húmedad relativa del 76%. Se hicieron muestreos en 13 materiales de banano y plátano, en tres fechas diferentes, cubriendo entre el 6% y 100% de la población total dependiendo de la cantidad de plantas; Calcuta-4 y FHIA-20, tenían el menor y mayor número de plantas, respectivamente (Tabla1). Basados en los síntomas característicos descritos en la literatura, se identificaron en el campo las plantas que presentaban síntomas asociados con posibles virus y se determinó la incidencia de plantas sintomáticas, los valores obtenidos se confrontaron con los resultados de las pruebas serológicas de laboratorio. Tabla 1. Materiales muestreados en la granja Montelindo de la Universidad de Caldas. Fecha de muestreo Julio 23, 2001 Julio 30, 2001 Agosto 8, 2001 Material Africa (P) Hondureño enano (P) Dominico hartón blanco (P) Calcuta-4 (B) FHIA-01 (B) FHIA-17 (B) FFHIA-21 (P) Gros michel (P) FHIA-03 (B) FHIA-18 (B) FHIA-20 (P) FHIA-23 (B) SH 36-40 (B) No de plantas Porcentaje por muestra evaluado 60 25 20 25 40 30 14 100 20 100 20 100 20 100 20 100 20 60 20 52 300 6 20 20 20 60 * P: Plátano; Banano: Banano De las plantas identificadas con síntomas en el campo, se tomaron porciones al azar de la lámina foliar de la parte media de la hoja 4 y se empacaron en bolsas de papel, tamaño oficio, y se identificaron para ser llevada al laboratorio de Sanidad Vegetal del ICA –Manizales, donde fueron procesadas y sometidas a la prueba serológica DAS-ELISA “Enzyme Linked Inmonoasorbent”, en un lapso de 2 días, utilizando reactivos y protocolos del Agdia Incorporated (http://www.agdia.com). Se analizaron 20 placas de ELISA, correspondientes a 1000 pruebas de virus, 250 para cada virus BBTV, BBrMV, CMV y BSV. Las plantas muestreadas fueron marcadas con el fin de repetir las pruebas en casos de dudas, o para identificar material positivo para los virus de tal forma que se pudiera hacer seguimiento a través del tiempo. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Se detectaron síntomas virales visuales en ocho de los 13 materiales estudiados. El porcentaje de plantas afectadas estuvo entre 0 y 23 %. Los valores de incidencia más altos se encontraron en la variedad África y el híbrido FHIA -21 y los más bajos en Dominico hartón blanco, FHIA-03 y FHIA-20. En los bananos Gros michel, FHIA-18, FHIA-23, SH 36-40 y en Calcuta-4 no se detectaron síntomas visuales para ninguno de los virus estudiados (Tabla 2); no obstante Belalcazar et al. (1.996) reportaron la ocurrencia del CMV en banano Gros michel, con una incidencia del 24% en lotes comerciales. En general, los síntomas encontrados correspondieron a la sintomatología típica de BSV y CMV. Se encontraron combinaciones de CMV y BSV en Hondureño enano, con incidencia menor al 5% y en Dominico hartón blanco en un 5%. Cuando los ataques del CMV producen necrosamiento de la hoja cigarro, al menos uno de los hijos de la planta afectada inicia la formación de hojas funcionales. Esta respuesta se debe posiblemente a que desaparece la dominancia apical de la planta madre sobre los hijos, a causa de la muerte del punto de crecimiento en la primera (Swennen (1974). Similar a lo reportado por Belalcazar et al, (1996), en plantas afectadas por el BSV se observó engrosamiento, deformación y rompimiento de las calcetas en la base del pseudotallo; sin embargo, éste último síntoma también es producido por deficiencias severas de magnesio (Martínez, 1997). Tabla 2. Porcentaje de plantas con síntomas virales en campo. Materiales África FHIA-21 Hondureño enano Dominico hartón blanco Gros michel FHA-20 FHIA-01 FHIA-03 FHIA-17 FHIA-18 FHIA-23 SH 36-40 Calcuta-4 Materiales con síntomas visuales (%) 23 20 9 2 0 2 4 2 12 8 0 0 0 Según los resultados de la prueba de ELISA, los porcentajes más altos de pruebas positivas correspondieron al BSV, que fue detectado en 10 materiales con las incidencias más altas en los plátanos Hondureño enano, Dominico hartón blanco, y África y en el banano FHIA-23. Este virus no fue detectado en los bananos Gros Michel, FHIA-01, FHIA-17, SH 36-40 y Calcuta-4 (Tabla 3). El CMV se detectó en seis materiales, con incidencia entre el 7 y 15%, correspondiendo el porcentaje de pruebas positivas más alto al plátano Dominico hartón blanco, seguido por los bananos Gros michel y FHIA-17. El BBTV y VBrMV no fueron detectados en ningún material. Gros michel, FHIA-23, FHIA-18 no presentaron síntomas visuales en el campo pero en las pruebas serológicas fueron positivos para BSV, CMV o ambos; al contrario, FHIA-01 mostró síntomas visuales en el campo pero resultó negativo en las pruebas serológicas. Los bananos Calcuta-4 y SH 36-40 no mostraron síntomas ni fueron positivos en la prueba ELISA. La alta incidencia del BSV, detectado por primera vez en Colombia en 1995 por Reichel et al. (1996) , indica que puede constituirse en factor limitante de la producción de banano y plátano en Colombia, tal como está sucediendo en algunas áreas de África (Nweke et al., 1988; Swennen y Langhe, 1989). El presente estudio no incluyó el plátano Dominico hartón, no se descarta la ocurrencia de enfermedades virales en dicho material, como se deduce de los estudios realizados por Reichel et al. (1996). Tabla 3. Incidencia de virus mediante la prueba serológica de ELISA Material Hondureño enano FHIA 23 Dominico hartón blanco África Gros michel FHIA 18 FHIA 20 FHIA 3 Calcuta-4 FHIA 21 FHIA 17 FHIA 01 SH 36-40 BSV 70 40 20 16 10 8 7 7 5 5 0 0 0 CMV 5 0 25 0 10 7 7 0 0 0 10 0 0 BSV + CMV <5 0 5 5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Agradecimientos: Los autores agradecen al Organismo Internacional de Energía Atómica, OIEA, por el suministro de los reactivos. BIBLIOGRAFÍA BELALCAZAR, C .S. L., ARCILA, P. M. I., VALENCIA, M. L. A., REICHEL, H., NARVAEZ, V. J. 1996. Efecto del virus del Mosaico del pepino, CMV, sobre los parámetros de crecimiento, desarrollo y producción del clon de banano Gros Michel. Tecnología del eje cafetero para la siembra y explotación rentable del cultivo del plátano. Comité de Cafeteros del Quindío, Armenia. Pp. 88-94. BELALCAZAR, S., REICHEL, H., MUNERA, U. G. E., ARÉVALO, P. E., NAVAREZ, V. J. 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