CONCENTRACIÓN URINARIA EN GANADO VACUNO SANO DE RAZA HOLSTEINFRIESIAN EN EL PERIODO POST-PARTO URINE CONCENTRATION IN POST-PARTURIENT HOLSTEIN-FRIESIAN HEALTHY COWS Alcántara Isidro GJ, García Rodríguez MB, Diez Prieto I, Gutierrez Montes AM1, Cano Rábano MC, Ríos Granja MA, Pérez García CC. Dpto. Medicina Veterinaria. Facultad de Veterinaria. ULE. Campus de Vegazana s/n, 24007. León Phone: 34-987291206; Fax: 34-987291270; e-mail: dmvbgr@unileon.es 1 Facultad de Veterinaria de Murcia Palabras clave: orina, vacuno, densidad, osmolalidad Resumen The measurement of urine concentration provides information concerning the kidney's ability to appropriately respond to variations in fluid homeostasis and assists in the interpretation of other tests performed in the urianalysis, but limited data on these variables are available for healthy cows. Objective: To determine the reference range for osmolality, and specific gravity (SG) measured by refractometry and by N-Multistix reagent strips in post-parturient Holstein-Friesian cows. Materials and methods: At different moments during the first month after parturition 135 healthy Holstein cows from different farms were catheterised to obtain urine. The urinary samples were analysed by NMultistix reagent strip immediately after collection, and then were freeze until analysis of specific gravity by refractometry and osmolality by freezing-point method [Fiske One-Ten Osmometer, Needham Heights, Massachusetts, USA]. Results and conclusion: The mean ± SD osmolality and SG by refractometry and N-Multistix were 776,5 ± 205,5; 1024 ± 6,8 and 1008 ± 4,3 respectively. As was expected, because of the alkaline urine, there were not correlation between reagent strip SG with the other two methods of measuring urine concentration. Nevertheless, there was a high correlation between the osmolality and refractometry SG (r=0,89; p<0,05) values. We discuss the reference range of osmolality and specific gravity obtained and the correlations between different methods Introducción La medida de la concentración urinaria es una parte integral del urianálisis, proporciona información con respecto a la capacidad renal para responder apropiadamente a las variaciones en la homeostasis hídrica además de permitir interpretar adecuadamente otras determinaciones realizadas en la misma muestra (Miller, 1983). Por ejemplo, la búsqueda de tóxicos, drogas o cualquier sustancia química en una orina diluida puede dar resultados negativos, así mismo el significado de la presencia de proteínas en orina varía si se encuentra en una orina diluida o concentrada. El método más adecuado para la valoración de la concentración urinaria es la determinación de su osmolalidad, sin embargo este procedimiento no resulta fácilmente disponible para el veterinario clínico, de forma que en la práctica suele evaluarse la concentración urinaria en base a la gravedad específica o densidad, ya sea mediante método directo (gravimetría) o indirecto (refractometría, tira reactiva). Todos estos métodos de análisis presentan limitaciones relacionadas con los principios físicos de la técnica utilizada. La osmolalidad es la medida de la concentración de solutos y solamente se ve afectada por el número de partículas presentes. La densidad relativa de la orina es la relación entre la densidad de la orina y la de agua pura a una temperatura constante y depende del número y la masa de las partículas en suspensión (Burckhardt, 1982). El objetivo del presente trabajo fue determinar los valores normales en orina de osmolalidad y densidad medida por refractometría y tira reactiva en hembras bovinas sanas de raza Holstein-Friesian en el periodo post-parto, y evaluar la correlación existente entre los diferentes parámetros utilizados para valorar la capacidad de concentración urinaria. Material y métodos Para la realización del presente trabajo fueron utilizadas 162 vacas sanas de raza Holstein-Friesian, pertenecientes a un total de 7 granjas localizadas en las provincias de Avila, León, Salamanca y Valladolid. Se trataba de animales de diferentes edades en producción lechera intensiva. Los animales recibían alimentación a base de mezcla “uni-feed” (silo de maíz, maíz, alfalfa, cebada, soja, pulpa de remolacha y corrector vitamínico-mineral) y disponían de agua “ad libitum”. La muestra de orina fue obtenida mediante cateterismo vesical en diferentes momentos a lo largo del primer mes post-parto. La muestra así obtenida fue analizada inmediatamente mediante tira reactiva [N-Multistix, Bayer, Tarrytown, USA] para, posteriormente, ser congelada hasta al momento de determinar la densidad mediante refractometría y la osmolalidad mediante valoración del punto de congelación [Fiske One-Ten Osmometer, Needham Heights, Massachusetts, USA]. Previamente a la determinación de la osmolalidad la muestra fue centrifugada para eliminar todo resto de partículas que podrían iniciar la cristalización antes de que se alcance el grado necesario de enfriamiento (Weissman y Pileggi, 1980). Resultados y discusión El valor normal de la osmolalidad urinaria en vacuno según Rosenberger (1994) es 1000 mOsm/kg, sin embargo la media obtenida en nuestro estudio en ganado vacuno lechero en periodo post-parto fue de 776 ± 205 mOsm/kg, valor ligeramente inferior con un rango que va desde 239 a 1200 mOsm/kg (Tabla 1). Por lo que respecta a la densidad medida por refractómetro ocurre algo similar, pues Rosenberger (1994) proporciona como rango de normalidad entre 1.020 a 1.040, y en el presente trabajo hemos obtenido una media de 1.024 con valores entre 1.008 y 1.040. Pudimos observar una elevada correlación (r=0,89; p>0.05) entre la osmolalidad y la densidad medida por refractometría en las muestras analizadas. Este hecho ya había sido constatado en terneros con diarrea (Thornton y English, 1976) aunque obtuvieron una correlación inferior a la obtenida en nuestro estudio (r=0,724). El hallazgo de elevada correlación puede tener que ver, al tratarse de vacas sanas, con la ausencia de proteinuria significativa y de glucosuria, dos elementos que han sido asociados con alteración de la densidad medida por refractometría. La proteinuria altera la densidad de forma que por cada incremento de 10 g/l en el contenido en proteína se ha observado un incremento en la densidad de 0.003 y se ha detectado un incremento de 0.002 por cada 10 g/l de glucosa en relación a la osmolalidad (Chadha y col, 2001). En cuanto a los valores medios de la densidad medida mediante tira reactiva (Tabla 1) no mostraron correlación con la osmolalidad ni con la densidad obtenida por refractometría. La valoración de la densidad mediante tira reactiva se basa en la fuerza iónica de la orina y por tanto se ve afectada por la composición iónica de la orina y por el contenido en proteínas que presentan carga eléctrica en solución (Kirschbaum, 1983). En el caso del ganado bovino la falta de correlación puede ser atribuída al pH alcalino de la orina, puesto que se ha observado que el método de análisis utilizado por N-Multistix disminuía la densidad 0.01 unidad a medida que el pH urinario se incrementaba de 5 a7 (Kirschbaum, 1983). En este estudio, de las 162 muestras de orina, sólo 6 presentaban un pH urinario inferior a 8, mientras que 146 presentaban un pH de 8,5, con una media de 8,4 ± 0,38, cifra superior al rango levemente alcalino (7-8) considerado normal por Rosenberger (1994) en el bovino con una alimentación correcta. En medicina humana se obtuvo una correlación muy similar entre la densidad urinaria mediante NMultistix y un refractómetro automático tras descartar las muestras con pH mayor de 7 y aquellas conteniendo glucosa o proteína, sugiriendo un papel insignificante en esos parámetros en la discrepancia observada entre métodos (Dorizzi y Caputo, 1998). Sin embargo, la magnitud de las diferencias observadas en este estudio establece importantes limitaciones a la hora de utilizar las tiras reactivas para medir la densidad urinaria en vacas, posiblemente relacionadas con el pH urinario. Tanto los valores de osmolalidad como la densidad medida por n Media ± SD min max refractometría fueron valores N-Multistix 162 1008,8 ± 4,27 1000 1030 inferiores a los obtenidos en perro, Refractometría 135 1024,9 ± 6,86 1008 1040 con un rango de osmolalidad de 161 a Osmolalidad 135 776,53 ± 205,5 239 1200 2830 mOsm/kg y un rango de Tabla 1. número de muestras (n), media ± desviación estándar (SD), densidad de 1.006 a 1.050 (van valor mínimo (min) y máximo (max) para cada uno de los parámetros analizados. Vonderen y col, 1997). La aparente menor necesidad de concentración urinaria observada en vacuno puede tener relación con la capacidad de los rumiantes de almacenar líquidos de reserva en rumen. De hecho los rumiantes de áreas tropicales y desérticas pueden soportar elevados grados de deshidratación (18-40% del peso corporal inicial) lo que excede de manera importante la capacidad de los monogástricos (Silanikove, 1994). En conclusión, la medida de la densidad urinaria por refractometría se presenta como un método muy adecuado para su uso en la práctica clínica en ganado vacuno mientras que no se recomienda la valoración de la densidad medida mediante tira reactiva y el rango de normalidad de la densidad urinaria en ganado vacuno parece ser ligeramente inferior al establecido para un monogástrico como el perro. Bibliografía Burkhardt AE. Urine concentration: history, measurements and uses. American Society for Medical Technology. Conference Proceeding 1982,1-8. Chadha V, Garg U, Alon US. Measurement of urinary concentration: a critical appraisal of methodologies. Pediatr Nephrol 2001, Apr 16:374-82 Dorizzi RM, Caputo M. Measurement of urine relative density using refractometer and reagent strips. Clin Chem Lab Med 1998, 36 (12): 925-28 Kirschbaum BB. Evaluation of a colorimetric reagent strip assay for urine specific gravity. Am J Clin Pathol 1983, 79:722-5 Miller RB. Urinalysis, In: Massry SG, Glassock RJ (eds) Textbook of nephrology, chap 81. Williams and Wilkins: Baltimore, 1983, pp 11,3-11,24. Rosenberger G. Exploración clínica de los bovinos. 3ª ed. Hemisferio Sur: Buenos Aires, 1994. Silanikove N. The struggle to maintain hydration and osmoregulation in animals experiencing severe dehydration and rapid rehydration: the story of ruminants. Exp Physiol 1994, 79(3): 281-300. Thornton JR, English PB. Specific gravity and osmolality as measures of urine concentration in the calf. Aust Vet J 1976, Jul 52:335-7 van Vonderen IK, Kooistra HS, Rijnberk A. Intra- and interindividual variation in urine osmolality and urine specific gravity in healthy pet dogs of various ages. J Vet Intern Med 1997, Jan-Feb 11:30-5 Weissman N, Pileggi VJ. Iones Inorgánicos. In: Henry RJ, Cannon DC, Winkelman JW. Química Clínica. Bases y técnicas. 2ª ed, Editoral Jims: Barcelona 1980, 643-748.