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LXXXI Congreso Nacional de Urología
Sesión: SP-09 Cáncer de próstata y vejiga. Investigación básica.
Moderadores: C. Vera Donoso, C. Olivier Gómez
Sala: Sala Greco D1; Día: Jueves 16 de junio; Hora: 16:00-17:30
P-81: Sobreexpresión de HER2 en el carcinoma urotelial de vejiga T1G3
Castro Iglesias, A.M. (1); Ortiz Rey, J.A. ( 2); López Díez, E. (1); San MIguel Fraile, M.P.
(2); Gándara Cortés, M. (2); Rodríguez Socarrás, M. (1); Gómez de María, C. ( 2)
Servicios de Urología (1) y Anatomía Patológica (2), Complexo Hospitalario Universitario de
Vigo
P-82: lncRNAs y Cáncer de vejiga. Expresión de mala T1 en tumores de bajo y
alto riesgo
Virseda Rodríguez, A.J.; Garcia Hernández, J.L.; Salvatierra Pérez, C.; Nuñez Otero, J.J.;
Coderque Mejia, M.; Hernández Sánchez, T.; Garcia Garcia, J.; Martín Parada, A.;
Hernández Rivas J.M.; Antunez Plaza, P.; Cruz, J.J.; Gómez Veiga, F.
Servicios de Urología, Oncología Médica y Anatomia Patológica del Complejo Hospitalario
Universitario de Salamanca. Grupo de Investigaciones traslacionales en Urología GITURIBSAL y CSIC Salamanca.
P-83: Análisis comparativo de dos métodos de detección de sobreexpresión de
HER2 en carcinomas de vejiga T1G3
Castro Iglesias, A.M. (1); San Miguel Fraile, M.P. (2); López Díez, E. (1); Ortiz Rey, J.A. (2);
Gándara Cortés, M. (2); Tortolero Blanco, L. (1); Gómez de María, C. (2); Barbosa, M.J. (3);
Antón Badiola, J. (3); Gonzalez-Carreró Fojón, J. (2)
Urología (1) y Anatomía Patológica (2), Complexo Hospitalario Universitario de Vigo. (3) AP
POVISA
P-84: Evaluación de la expresión de p21 (Cip1/Waf1), FGFR3, PI3K, AKT y
ciclinas D1 y D3 en tumores de vejiga T1: implicaciones clínicas y significado
pronóstico.
Sánchez González, A.; Blanca Pedregosa, A.M.; Carrasco Valiente, J.; Campos Hernández,
J.P.; Gómez Gómez, E.; Ruíz García, J.; Regueiro López, J.C.; Requena Tapia, M.J.
UGC Urología Hospital Universitario Reina Sofía - IMIBIC.
P-85: Papel de la uroplaquina 3C (UPK3C) como posible factor pronóstico en el
tumor vesical.
Serra Deola, Arnau; Ugarte Chicote, Javier; Ascaso Til, Helena; Santillana Altimira, Josep
Maria; Ruiz Plazas, Xavier; Canudas, Silvia; Badenes Gallardo, Almudena; Fabià Mayans,
Ariadna; Centeno Alvarez, Clara; Sagristà Vidal, Rosa,; Prados Saavedra, Manel; Vila Barja,
Jose; García-España, Antonio; Segarra Tomas, Josep
Hospital Universitari Joan XXIII, Unidad de Investigación Biomédica u departamento de
Urología, Tarragona.
P-86: Ingieneria tisular basada en la descelularización y recelularización de una
matriz vesical murina con células madre mesenquimales adultas de tejido
adiposo Humano
Marzullo Zucchet, L.J.; Delgado Oliva, F.J.; Vera Donoso C.D.; Bahílo Mateu, M.P; Mellado
Lopez, M; Campos, J; Moreno Manzano, V; Boronat Tormo, F
Hospital Universitari i Politecnic La Fe. Laboratorio de Regeneración Tisular y Neuronal Centro de Investigación Príncipe Felipe
P-87: Exosomas en orina como biomarcadores para el cáncer de vejiga
Otta Oshiro, R.J.; Acosta Reveles, M.A.; Andreu Martínez, Z; Redruello, A; Yañez-Mó, M.;
Olivier Gómez, C.
Hospital Universitario de La Princesa
P-88: Roles opuestos de PIK3CA y EZH2 en cáncer vesical no músculo invasivo
Benítez Sala R. 1; Villacampa Aubá F. 1; Pérez Cadavid S. 1; Duarte Ojeda J.M. 1; Martínez
Fernández M. 2; Dueñas M. 2; García Muñoz H. 1; Castellano Gauna D. 1; Paramio J.M. 2;
De la Rosa Kehrmann F. 1; Passas Martínez J.B. 1
1. Hospital Universitario 12 de Octubre, Unidad de Urooncología, Madrid, España. 2.
Hospital Universitario 12 de Octubre y CIEMAT, Unidad de Investigación Biomédica I+12,
Madrid, España.
P-89: Relación entre factores de riesgo y sobreexpresión de HER2 en el
carcinoma urotelial de vejiga T1G3
Castro Iglesias, A.M. (1); López Díez, E. (1); Ortiz Rey, J.A. (2); San Miguel Fraile, M.P. (2);
Gándara Cortés, M. (2); Almuster Domínguez, S. (1); Gómez de María, C. (2); Ojea Calvo,
A. (1)
Servicios de Urología (1) y Anatomía Patológica (2). Complexo Hospitalario Universitario de
Vigo
P-81
LXXXI Congreso Nacional de Urología. Toledo. 15 al 18 de junio de 2016
Presentación: Poster Virtual
RESUMEN DE COMUNICACIÓN
Sobreexpresión de HER2 en el carcinoma urotelial de vejiga T1G3
Castro Iglesias, A.M. (1); Ortiz Rey, J.A. ( 2); López Díez, E. (1); San MIguel Fraile, M.P. (2); Gándara Cortés, M. (2);
Rodríguez Socarrás, M. (1); Gómez de María, C. ( 2)
Servicios de Urología (1) y Anatomía Patológica (2), Complexo Hospitalario Universitario de Vigo
INTRODUCCIÓN
El carcinoma urotelial de vejiga, como ocurre en cáncer de mama y estómago, sobreexpresa HER2, con
trascendencia terapéutica y pronóstica.
El objetivo de este estudio ha sido determinar la prevalencia de la sobreexpresión de HER2 en el carcinoma
urotelial de vejiga (CUV) T1G3.
MATERIAL Y METODOS
Se estudiaron 45 pacientes que presentaron CUV T1 alto grado (G3) primarios, intervenidos en los últimos 5
años. Todas las preparaciones fueron valoradas por dos patólogos expertos. Se realizó técnica de
inmunohistoquímica para HER-2 en cortes de parafina de cuatro macromatrices tisulares (MTs) compuestas de
85 cilindros tumorales. Se utilizó el anticuerpo 4B5 de Ventana®, método de visualización Ultraview, en
inmunoteñidor automático Bench Mark Ultrasystem. La tinción se valoró de acuerdo con las guías del CAP
(Colegio Americano de Patólogos), puntuándose como negativo (0 o 1+), equívoco (2+) o positivo (3+).
También se determinó p53 y Ki67, considerando positivo p53 >10% y Ki67>20%. Valoración estadística
mediante análisis de regresión lineal.
RESULTADOS
●
●
●
Sobreexpresión de HER-2 en 45 pacientes-CUV:
❍ (3+): 18 (40%),
❍ (2+): 15 (33,3%),
❍ (0/1+): 11 (24,4%),
❍ no valorables: 1
p53(+): 26 casos (57,7%) y de éstos 12 (46.2%) fueron HER(3+). Un 66.7% de los HER2(3+) fueron
p53(+).
Ki67(+): 32 casos (71.1%) y de los mismos 11 (34.4%) fueron HER2(3+). Un 61.1% de HER2(3+)
fueron Ki67(+)
No se encontró significación estadística entre HER2 (3+) con p53 (p=0.239) o Ki67 (p=0.198)
CONCLUSIONES
●
●
●
Los casos HER2(3+) son evidentes al microscopio incluso a bajo aumento.
La sobreexpresión de HER2 en el CUV T1G3 demuestra una relevancia en la prevalencia como en mama
o estómago
En nuestra experiencia ha habido un porcentaje relativamente elevado de resultados 2+ que recomienda
estudio con técnica de amplificación del gen mediante hibridación in situ.
(Estudio financiado con beca de FIU-AEU)
P-82
LXXXI Congreso Nacional de Urología. Toledo. 15 al 18 de junio de 2016
Presentación: Poster Virtual
RESUMEN DE COMUNICACIÓN
lncRNAs y Cáncer de vejiga. Expresión de mala T1 en tumores de bajo y alto riesgo
Virseda Rodríguez, A.J.; Garcia Hernández, J.L.; Salvatierra Pérez, C.; Nuñez Otero, J.J.; Coderque Mejia, M.;
Hernández Sánchez, T.; Garcia Garcia, J.; Martín Parada, A.; Hernández Rivas J.M.; Antunez Plaza, P.; Cruz, J.J.;
Gómez Veiga, F.
Servicios de Urología, Oncología Médica y Anatomia Patológica del Complejo Hospitalario Universitario de Salamanca.
Grupo de Investigaciones traslacionales en Urología GITUR-IBSAL y CSIC Salamanca.
INTRODUCCIÓN Y OBJETIVOS
Los RNA largos no codificantes (lncRNAs) han sido investigados recientemente como una nueva generación de
reguladores del proceso celular relacionados con el crecimiento y apopstosis y por ende en la carcinogénesis.
lncRNAs han sido involucrados en la iniciación del cáncer, su desarrollo y potencial mestastásico. lncRNAs
transcriptores tipo I (MALAT1) ha sido identificado en numerosos cánceres. El papel de MALAT1 en el cáncer
de vejiga es incierto.
Analizamos mediante técnicas de RNA-FISH la presencia, localización y cuantificación individual de lncRNAsMALAT1 en pacientes con cáncer de vejiga.
MATERIAL Y MÉTODO
35 varones y 6 mujeres con cáncer de vejiga no musculo invasivo (CVNMI) son reclutados y clasificados de
acuerdo a las clasificaciones TNM 2009 y WHO 2004.
El análisis de las muestras se realiza con el set Stellaris RNA-FISH y capturados con un microscopio Nikon-Ti
invertido de fluorescencia con objetivo Plan Apochromat 63X y cámara CCD. En 38 casos se realiza
determinación genómica con el sistema UroVysionTM.
RESULTADOS
Todos los casos mostraron expresión celular de MALAT1 al analizar más de 300 células por caso. La mediana
de células MALAT1 por caso fué del 14%; 17% en casos de CVNMI de alto riesgo y 10.8% en caso de
CVNMI de bajo riesgo (p menor de 0.05, tabla 1.)
CONCLUSIONES
El análisis RNA-FISH permite detectar y cuantificar la expresión de lncRNAs a nivel subcelular. La expresión de
MALAT1 es mayor en los tumores de alto riesgo; este dato puede sugerir un papel en la tumorogenesis de
CVNMI alto riesgo y se postula como posible diana futura de estrategias terapeúticas dirigidas.
PALABRAS CLAVE: CVNMI, lncRNA, MALAT1.
Expresión MALAT1
Casos totales
(n=40)
Alto
grado
Bajo grado
(n=18)
Deleción 9p21
Sin cambios
Total Alto Bajo
14 8 6
Total Alto Bajo
6
4 2
(n=22)
Casos con menos del
21
14%
Casos con más del 14% 19
Casos con más del 30% 7
10
11
9
5 4
1
- 1
11
3
7
3
5
1
4 1
1 -
5
2
3 2
1 1
P-83
LXXXI Congreso Nacional de Urología. Toledo. 15 al 18 de junio de 2016
Presentación: Poster Virtual
RESUMEN DE COMUNICACIÓN
Análisis comparativo de dos métodos de detección de sobreexpresión de HER2 en carcinomas de vejiga
T1G3
Castro Iglesias, A.M. (1); San Miguel Fraile, M.P. (2); López Díez, E. (1); Ortiz Rey, J.A. (2); Gándara Cortés, M. (2);
Tortolero Blanco, L. (1); Gómez de María, C. (2); Barbosa, M.J. (3); Antón Badiola, J. (3); Gonzalez-Carreró Fojón, J.
(2)
Urología (1) y Anatomía Patológica (2), Complexo Hospitalario Universitario de Vigo. (3) AP POVISA
INTRODUCCIÓN
Actualmente existen dos métodos de determinación inmunhistoquímica (IHQ) de sobreexpresión de HER2
aprobados por la US Food and Drug Administration (FDA): el HercepTest de Dako (Glöstrup, Dinamarca) y el
anticuerpo monoclonal 4B5 de Ventana Medical Systems (Tucson, Arizona).
El objetivo del estudio ha sido analizar ambos métodos en una serie de casos de carcinoma urotelial de vejiga
(CUV) T1 alto grado (G3).
MATERIAL Y MÉTODOS
Se estudian 45 pacientes tratados en los últimos 5 años por CUV T1G3. Se realizaron técnicas de
inmunohistoquímica para HER-2 en cortes de parafina de cuatro macromatrices tisulares (MTs) compuestas de
casos de carcinoma urotelial de vejiga T1 alto grado (G3). Se utilizaron dos métodos: a) el anticuerpo 4B5 de
Ventana®, y método Ultraview, en inmunoteñidor automático Bench Mark Ultrasystem, y b) HercepTest en
inmunoteñidor de Dako. La tinción se valoró de acuerdo con las guías del CAP (Colegio Americano de
Patólogos), puntuándose como negativo (0 o 1+), equívoco (2+) o positivo (3+). Valoracion estadística mediante
estudio de regresión lineal.
RESULTADOS
Se estudiaron 87 cilindros tisulares correspondientes a 45 tumores distintos. Método de Ventana (anticuerpo
4B5) fueron positivos para HER-2 (3+) 23 (27.2%), correspondiendo a 18 (40%) tumores diferentes, y
negativos (1+/0) 28 (32.9%). Equívocos (2+) 29 (34.1%) y cinco no fueron valorables. Herceptest, 9 cilindros
fueron (3+) (10.6%) de 8 (17.7%) tumores distintos, 31 (36.5%) cilindros negativos (1+/0). 41 (48.2%)
cilindros se valoraron como equívocos (2+) y cinco no fueron valorables.
Hubo coincidencia de ambos métodos en positivos (3+) en 8 cilindros (9.4%) y negativos en 20 (23.5%). Existe
significación estadística entre la positividad para ambas técnicas lo que demuestra que ambas son válidas para la
detección de sobrexpresión de HER2 (p=0,000895)
CONCLUSIONES
En general se ha observado una menor intensidad de la tinción con el HercepTest que con el método de Ventana.
Es probable que sea necesario mejorar la técnica de IHQ o la forma de valorar los resultados de la misma y
establecer una correlación de los hallazgos de IHQ con los de hibridación in situ (amplificación del gen)
(Estudio financiado por beca FIU-AEU)
P-84
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RESUMEN DE COMUNICACIÓN
Evaluación de la expresión de p21 (Cip1/Waf1), FGFR3, PI3K, AKT y ciclinas D1 y D3 en tumores de vejiga
T1: implicaciones clínicas y significado pronóstico.
Sánchez González, A.; Blanca Pedregosa, A.M.; Carrasco Valiente, J.; Campos Hernández, J.P.; Gómez Gómez, E.;
Ruíz García, J.; Regueiro López, J.C.; Requena Tapia, M.J.
UGC Urología Hospital Universitario Reina Sofía - IMIBIC.
INTRODUCCIÓN:
Si bien los tumores vesicales T1 suelen tener buen pronóstico, un 60% recidivan, precisando tratamientos
adicionales. Mutaciones y desregulaciones de los genes reguladores del ciclo celular se han asociado con el
cáncer vesical.
OBJETIVO:
Determinar la expresión proteica diferencial de los biomarcadores FGFR3, PI3K (subunidades PI3Kp110α,
PI3KClassIII, PI3Kp85), AKT, p21WAF y Ciclinas D1 y D3 en tejido tumoral versus mucosa sana adyacente,
así como establecer su posible papel como marcadores de recidiva tumoral.
MATERIAL Y MÉTODOS:
Para determinar los niveles de expresión proteica se seleccionaron entre septiembre de 2014 y abril de 2015 a 40
pacientes con tumores de vejiga pT1 intervenidos mediante RTU (grupo estudio) y 12 casos de mucosa sana
adyacente (grupo control), utilizando la técnica de Western Blot.
Se realizó un análisis estadístico mediante los test t de Student y Chi cuadrado incluyendo las variables clínicopatológicas (edad, sexo, tamaño tumoral, grado, multifocalidad, recidiva y presencia de carcinoma in situ).
RESULTADOS:
En el grupo de estudio se obtuvo una mayor expresión proteica de FGFR3 (p<0.0001), PI3Kp110α (p=0.0007), PI3KClassIII (p<0.0001), Ciclinas D1 y D3 (p=0.0018 y p<0.0001) y p21 (p<0.0001) con
respecto a la muestra control, no encontrándose diferencias significativas para PI3Kp85 (p=0.2714) y AKT
(p=0.2714).
Se observó una correlación estadísticamente significativa entre PI3Kp110α, PI3KClassIII, PI3Kp85 y AKT y la
recidiva dentro del primer año (p=0.010, p=0.05, p=0.029 y p=0.029 respectivamente), así como, entre
PI3KClassIII (p=0.019) y Ciclina D3 (p=0.001) y el tipo tumoral (primario vs recidivante).
El FGFR3 (p=0.034) se correlacionó con el tamaño tumoral y PI3Kp110α (p=0.014) con la multifocalidad.
CONCLUSIONES:
Los resultados obtenidos sugieren que los biomarcadores FGFR3, PI3Kp110, PI3KClassIII, Ciclinas D1 y D3 y
p21 presentan una mayor expresión en tejido tumoral pudiendo servir en el manejo de tumores vesicales T1 para
identificar aquellos de alto riesgo.
P-85
LXXXI Congreso Nacional de Urología. Toledo. 15 al 18 de junio de 2016
Presentación: Poster Virtual
RESUMEN DE COMUNICACIÓN
Papel de la uroplaquina 3C (UPK3C) como posible factor pronóstico en el tumor vesical.
Serra Deola, Arnau; Ugarte Chicote, Javier; Ascaso Til, Helena; Santillana Altimira, Josep Maria; Ruiz Plazas, Xavier;
Canudas, Silvia; Badenes Gallardo, Almudena; Fabià Mayans, Ariadna; Centeno Alvarez, Clara; Sagristà Vidal, Rosa,;
Prados Saavedra, Manel; Vila Barja, Jose; García-España, Antonio; Segarra Tomas, Josep
Hospital Universitari Joan XXIII, Unidad de Investigación Biomédica u departamento de Urología, Tarragona.
Introducción:
Los carcinomas superficiales de vejiga presentan un riesgo de recidiva y progresión del 70%-10%. Actualmente
no disponemos de suficientes factores que permitan individualizar su evolución, por lo que consideramos
prioritaria la búsqueda de nuevos marcadores pronósticos.
Las placas rígidas que recubren la zona apical de las células diferenciadas en contacto con el lumen urotelial son
formadas por dímeros de 5 proteínas llamados uroplaquinas (UPKs). Su síntesis depende de la diferenciación
celular urotelial (UPK1a/UPk2 y UPK1b/UPK3a o UPK1b/UPK3b) (Wu et al. 1994; Moll et al. 1995;
Olsburgh et al. 2003).
En carcinomas uroteliales humanos no se ha podido demostrar una estricta relación entre la disminución de su
expresión y la progresión tumoral (Huang et al. 2007). En nuestro grupo hemos identificado recientemente una
nueva uroplaquina; UPK3c (DeSalle et al 2015). Al contrario que las anteriores UPKs, ésta se expresa
mayoritariamente en las capas celulares uroteliales menos diferenciadas y no forma dímeros (Chicote JU, 2016).
En este estudio analizamos su expresión en modelos murinos transgénicos de tumores vesicales superficiales e
invasivos y en un panel de tumores vesicales humanos.
Metodología:
Analizamos la expresión de uroplaquinas, FGFR3, p130 y RB mediante la técnica Western blot, en 31
carcinomas vesicales humanos (10 Ta y 1 T1 de bajo grado; 9 T1 y 11 T2 de alto grado) y en los tumores
superficiales e invasivos murinos transgénicos mediante microscopía confocal.
Resultados:
La expresión de UPK3a y UPK3c es excluyente entre el urotelio sano y el tumoral en los modelos murinos
transgénicos. En carcinomas humanos se observa una relación directa entre la expresión de FGFR3, marcador de
buen pronóstico, y la de UPK3c.
Conclusión:
En el 80% de los tumores de bajo grado se encuentran mutaciones del FGFR3 (Hernández et al. 2006;), que en
el 85% de los casos induce su sobre-expresión (Tomlinson et al. 2007; Bodoor et al. 2010). Aunque en este
estudio no hemos analizado las mutaciones de FGFR3 y el tamaño de muestra es pequeño, la relación directa
entre UPK3c y FGFR3 sugeriría que la expresión de UPK3c en tumores es de buen pronóstico. Consideramos
necesaria la realización estudio más amplios.
P-86
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Presentación: Poster Virtual
RESUMEN DE COMUNICACIÓN
Ingieneria tisular basada en la descelularización y recelularización de una matriz vesical murina con
células madre mesenquimales adultas de tejido adiposo Humano
Marzullo Zucchet, L.J.; Delgado Oliva, F.J.; Vera Donoso C.D.; Bahílo Mateu, M.P; Mellado Lopez, M; Campos, J;
Moreno Manzano, V; Boronat Tormo, F
Hospital Universitari i Politecnic La Fe. Laboratorio de Regeneración Tisular y Neuronal - Centro de Investigación
Príncipe Felipe
INTRODUCCIÓN
La Matriz Acelular Vesical (MAV) constituye un soporte ideal en la reconstrucción tisular de la vejiga debido a
sus propiedades mecánicas y al favorecimiento del crecimiento e integración de células uroepiteliales, musculares
lisas y tejido nervioso. Recientemente se ha descrito la capacidad de células madres mesenquimales (ADS) en el
rescate de la función vesical. Describimos la técnica y resultados preliminares del proceso de obtención de la
MAV y posterior recelularización con células ADS adultas de tejido adiposo humano en un modelo murino.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se realizó cistectomía subtotal a 12 ratas Wistar hembras y se procedió a la obtención de la MAV mediante la
descelularización mediante lavado secuencial en una serie de soluciones (PBS, TRIS HCL, H2O milliQ, SDS
1%, 0,5% TRITON X-100 e Hidróxido amónico 0,05%). Las ADS se aislaron a partir de lipoaspirados
humanos centrifugados, lavados y mediante digestión enzimática se obtuvo la Fracción Vasculo-Estromal (FVS),
que se cultivó separando finalmente las células hematopoyéticas y mesenquimales, amplificandolas en condiciones
adherentes. Finalmente se realizó la recelularización de las MAVs con 500.000 ADS en 200 microlitros,
manteniendo las vejigas en condiciones estándar de cultivo durante 3 días, 1 o 2 semanas. La eficacia de ambos
procesos (descelularización-recelularización) fue valorada mediante estudio histológico con tinción de Masson y
por el marcaje en fluorescencia DAPI y Mitotraker.
RESULTADOS
Las ADS se integran de forma eficiente al parénquima vesical, repoblando las capas del tejido conectivo y
muscular. Las ADS depositadas en el interior del espacio vesical se alinean a lo largo del urotelio recubriendo la
última capa expuesta a la cavidad interna. La eficacia de repoblación fue mayor a dos semanas en comparación
con 3 o 7 días.
CONCLUSIÓN
La obtención de MAV y recelularización de la misma con células mesenquimales humanas en un modelo murino
es un proceso factible. Es el primer paso hacia la obtención de vejigas recelularizadas funcionales.
P-87
LXXXI Congreso Nacional de Urología. Toledo. 15 al 18 de junio de 2016
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RESUMEN DE COMUNICACIÓN
Exosomas en orina como biomarcadores para el cáncer de vejiga
Otta Oshiro, R.J.; Acosta Reveles, M.A.; Andreu Martínez, Z; Redruello, A; Yañez-Mó, M.; Olivier Gómez, C.
Hospital Universitario de La Princesa
Introducción:
Los exosomas son un tipo de vesículas extracelulares que se liberan por muchos tipos de células. Los exosomas
contienen proteínas, lípidos, mRNA y miRNA que actúan como potentes comunicadores intercelulares. En un
ambiente tumoral estas vesículas influyen sobre la matriz extracelular y promueven la progresión tumoral.
Los exosomas pueden ser aislados de diferentes fluídos (orina, sangre, lavado broncoalveolar, líquido
cefaloraquídeo) por lo que representan una fuente de biomarcadores no-invasivos.
El objetivo del presente estudio es determinar posibles biomarcadores de agresividad tumoral en pacientes con
carcinoma urotelial vesical mediante la extracción de miRNAs purificados de exosomas aislados de muestras de
orina.
Material y métodos:
Se aislaron exosomas provenientes de la orina de pacientes con carcinoma urotelial vesical. Pacientes con
carcinoma urotelial de bajo grado (n=18), de alto grado (n=19) y donantes sanos (n=5). Se realizó
espectrometría de masas y arrays de miRNA para encontrar diferencias en el perfil tumoral. Estos resultados
fueron examinados con western blot y reacción en cadena de polimerasa.
Resultados:
Encontramos que el miRNA 375 se infra-expresa en el carcinoma urotelial de alto grado comparado con los
carcinomas de bajo grado o los donantes sanos. También encontramos el miRNA 146 se ve afectado
significativamente en el carcinoma urotelial de bajo grado comparado con el carcinoma de alto grado o los
donantes sanos.
Conclusiones:
El cáncer de vejiga es un tumor complejo y heterogéneo. El estudio de los exosomas en orina es un campo de
investigación prometedor para entender el comportamiento tumoral.
Nuestros resultados apuntan a que el miRNA 375 y el miRNA 146 podrían ayudar a diferenciar tumores de alto
grado.
Palabras Clave:
Exosomas, Cáncer, biomarcadores.
P-88
LXXXI Congreso Nacional de Urología. Toledo. 15 al 18 de junio de 2016
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RESUMEN DE COMUNICACIÓN
Roles opuestos de PIK3CA y EZH2 en cáncer vesical no músculo invasivo
Benítez Sala R. 1; Villacampa Aubá F. 1; Pérez Cadavid S. 1; Duarte Ojeda J.M. 1; Martínez Fernández M. 2; Dueñas
M. 2; García Muñoz H. 1; Castellano Gauna D. 1; Paramio J.M. 2; De la Rosa Kehrmann F. 1; Passas Martínez J.B. 1
1. Hospital Universitario 12 de Octubre, Unidad de Urooncología, Madrid, España. 2. Hospital Universitario 12 de
Octubre y CIEMAT, Unidad de Investigación Biomédica I+12, Madrid, España.
Introducción y Objetivos. La recurrencia tumoral y la posible progresión son desafíos críticos en el manejo
clínico de los pacientes con cáncer vesical no músculo invasivo (CVNMI). En consecuencia hay una necesidad de
biomarcadores específicos que puede ayudar a predecir los riesgos de recurrencia y progresión. Nuestro trabajo
previo reveló que la represión de genes mediada por la expresión aumentada de EZH2 se asociaba con
recurrencia precoz, y que las alteraciones del PIK3CA (mutaciones o ganancia de copias de genes) se asociaban
con menos probabilidad de recidiva tumoral. Aquí hemos investigado si estos dos procesos pueden actuar por
una vía común pero opuesta, en la recurrencia del CVNMI.
Material y Método. Se estudió muestras tumorales de 87 pacientes consecutivos con cáncer vesical. Se
registró las variables clinicopatológicas habituales. Para evaluar las posibles interacciones entre las vías de señales
de EZH2 y PIK3CA, combinamos transcriptoma global y análisis bioinformático, qPCR e inmunohistoquímica.
Resultados. Los tumores fueron 77 CVNMI y 10 CVMI, con una mediana de seguimiento de 29 meses (rango
1-37). 33 de los 77 pacientes con CVNMI recidivaron durante el seguimiento. Encontramos que las muestras
que albergaban alteraciones del PIK3CA presentaban una expresión aumentada de miR101 y miR138. Además
observamos una correlación positiva entre alteraciones de PIK3CA e incremento de la actividad Akt con
fosforilación aumentada de EZH2 en residuo Ser21. El análisis de Kaplan-Meier demostró que los pacientes que
mostraban expresión reducida de miR101 y miR138 o aquellos que mostraban niveles aumentados de EZH2 no
fosforilado, presentaban recurrencia precoz y eran propensos a la progresión sobre la recurrencia.
Conclusiones. Proporcionamos por primera vez evidencia genómica y bioquímica que muestra una regulación
negativa de la actividad EZH2, que podría explicar la asociación inversa entre la actividad EZH2 y las señales
dependientes de PI3K en la recurrencia y progresión de CVNMI.
Palabras clave: cáncer vesical, PIK3CA, EZH2.
P-89
LXXXI Congreso Nacional de Urología. Toledo. 15 al 18 de junio de 2016
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RESUMEN DE COMUNICACIÓN
Relación entre factores de riesgo y sobreexpresión de HER2 en el carcinoma urotelial de vejiga T1G3
Castro Iglesias, A.M. (1); López Díez, E. (1); Ortiz Rey, J.A. (2); San Miguel Fraile, M.P. (2); Gándara Cortés, M. (2);
Almuster Domínguez, S. (1); Gómez de María, C. (2); Ojea Calvo, A. (1)
Servicios de Urología (1) y Anatomía Patológica (2). Complexo Hospitalario Universitario de Vigo
INTRODUCCIÓN
El carcinoma urotelial de vejiga (CUV) T1G3 es considerado una entidad de alto riesgo. La sobreexpresión de
HER2 orienta en los tumores de mama y estómago su pronóstico e individualiza el tratamiento.
El objetivo del estudio es establecer si existe relación entre los factores de riesgo clásicos del CUV y la
sobreexpresión de HER2.
MATERIAL Y MÉTODO
Se estudian 45 pacientes con otros tantos CUV-T1G3 primarios intervenidos en nuestro centro en los últimos
cinco años. Se estudian los factores utilizados en las calculadoras de riesgo de recidiva y progresión de la EAU y
grupo CUETO: edad (<60/60-70/>70), sexo (h/m), tamaño (<3/≥3 cm), número (1/2-7/>7) y otros como CIS
acompañante (si/no),y citología urinaria (positiva/negativa). La sobreexpresión de HER2 se determinó mediante
técnica inmunohistoquímica en cortes de parafina, con anticuerpo 4B5 de Ventana® y método de visualización
Ultraview en inmunoteñidor automático Bench Mark Ultrasystem. La tinción se valoró según guías del Colegio
Americano de Patólogos (negativo (0 o 1+); equívoco (2+), positivo (3+). Todos los casos fueron revisados por
dos patólogos expertos.
Análisis estadístico de estudio descriptivo en frecuencias y porcentajes para variables categóricas, estudio
bivariante test de Fisher y estudio de regresión lineal con variable dependiente, HER2, independientes, los
restantes factores de riesgo.
RESULTADOS
Estudio descriptivo: HER2 (IHQ-Ventana): (3+) 40%, (2+) 33,3%, (0/1+) 17,8%
Factores de riesgo: >70 años 64,4%, varones 84,4%, ≥3 cm 64,4%, citología+ 42.2%, CIS+ 17.8%. HER2
(3+) 40%
El estudio bivariante (Test de Fisher) y estudio de regresión lineal no encuentra significación estadística entre
HER2 positivo con respecto a CIS(+) y citología+ (p=0,6895 y p=0,9617)
CONCLUSIÓN
CUV-T1G3 sobreexpresa HER2 en cifra superior al primario de mama o gástrico.
Ante la ausencia de correlación de los factores de riesgo y la sobreexpresión de HER2 en el estudio,
consideramos que debemos aumentar la serie de casos para fundamentar este resultado.
(Estudio financiado mediante Beca FIU-AEU)